天然药化常见的鉴别反应.docx

自然药化常见的鉴别反应(部分)一、颜色反应的对比(一 三苗类的颜色反应1 .Liebermann-Burchard 反应将样品溶于乙酸酎中，加浓硫酸-乙酸酎(1 : 20 )数滴，可产生黄红一紫一蓝等颜色变化,最终褪色。2 .Kahldenberg 反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化铀的氯仿溶液(或三氯化铺饱和的氯仿溶液)，干燥后60-70加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。3 .Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乏段乙醇溶液，加热至100 ,呈些，渐渐变为紫色。4 .Salkowski 反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。5.Tschugaeff 反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。(二卜留体类化合物的颜色反应1 .Liebermann-Burchard 反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-乙酸酊(1 : 20 )数滴，可产生红紫蓝绿一污绿等颜色变化,最终褪色。也可将样品溶于冰乙酸，加试剂产生同样的反应。2 .Kahldenberg 反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%至数维的氯仿溶液，干燥后60°C70°C力口热，样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。3 .Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液,加热至60 ,呈红色,渐渐变为紫色。4 .Salkowski 反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后,在硫酸层呈现红色或蓝色,氯仿层有绿色荧光消失。5.Tschugaeff 反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。二、强心甘的颜色反应1.Cl7位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心昔在碱性醇溶液中，五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。乙型强心甘在碱性醇溶液中，不能产生活性亚甲基，无此类反应。所以，采用此类反应可区分甲、乙型强心昔。(1 ) Legal反应：又称亚硝酰铁禽化钠试剂反应。取样品1 2mg ,溶于叱嚏23滴中，加3%亚硝酰铁富化钠溶液和2molL氢氧化钠溶液各1滴，反应液呈深红色并慢慢退去。(2 ) Raymond反应：阳性反应是反应液呈紫红色。(3 ) Kedd反应：又称3,5-二硝基苯甲酸试剂反应。阳性反应是反应液呈红色或紫红色。(4 ) Baljet反应：又称碱性苦味酸试剂反应。阳性反应是反应液呈现橙色或橙红色。2.0 去氧糖颜色反应(1 ) Keller-Kiliani ( K-K )反应：此反应在如乙邀溶液中进行，如有去氧糖，乙酸层显蓝色。界面的颜色随昔元羟基、双键的位置和数目不同而异，可显红色、绿色、黄色等。留意此反应只对游离的。-去氧糖或。去氧糖与昔元连接的昔显色,对。去氧糖和葡萄糖或其他羟基糖连接的二糖、三糖及乙酰化的。-去氧糖不显色。因它们在此条件下不能水解出。-去氧糖。此反应阳性可确定去氧糖的存在,但对此反应不显色的有时未必具有完全的否定意义。(2 )咕吨氢醇反应：反应试剂为咕吨氢醇试剂,此反应极为灵敏，只要分子中有-去氧糖即呈红色，且分子中的。-去氧糖可定量地发生反应，故还可用于定量分析。(3 )对二甲氨基苯甲醛反应：分子中若有去氧糖可显灰红色斑点。(4 )过碘酸-对硝基苯胺反应：此反应可在滤纸或薄层板上进行，反应过程是先喷过碘酸钠水溶液，再喷对硝基苯胺试液，则快速在灰黄色背底上消失深黄色斑点，置紫外灯下观看则为棕色背底上消失黄色荧光斑点。再喷以5%氢氧化钠甲醇溶液，则斑点转为绿色。三|、醒类化合物的颜色反应|醒类的颜色反应主要基于其氧化还原性质以及分子中的酚羟基嬴(1 ) Feigl反应：全部酶类衍生物在碱性条件下经加热能快速与醛类及邻二硝基苯反应生成紫色化合物。(2)无色亚甲蓝显色试验：无色亚甲蓝溶液为苯醍类及蔡醍类的专用显色剂。蓝色斑点,与葱醍类化合物相区分。(3 ) Borntrager反应：羟基醍类在碱性溶液中发生颜色转变，会使颜色深入。多呈橙、红、紫红及蓝色。羟基蔻能以及具有游离酚羟基的葱醍昔均可呈色，但蕙酚、蕙酮、二蕙酮类化合物则需氧化形成羟基蕙醍类化合物后才能呈色也就是不显色。(4 ) KestingCraven反应(活性亚甲基)：苯酶及禁配类化合物当其醍环上有未被取代的位置时，可在碱性条件下与一些含有活性次甲基试剂(如乙酰乙酸酯、丙二酸酯、丙二睛等)的醇溶液反应，生成蓝绿色或蓝紫色。蔡配的苯环上如有羟基取代，此反应即减慢反应速度或不反应。慈醍类化合物因醍环两侧有苯环，不能发生该反应，故可加以区分。(5 )与金属离子的反应：在慈酿类化合物中，假如有。-酚羟基或邻二酚羟基结构时，则可与Pb2÷, Mg2+等金属离子形成络合物。反应灵敏，生成的颜色因分子中羟基的位置不同而不同，有助于识别羟基位置显的颜色不同：环上有1个。羟基橙色邻二酚羟基蓝紫色对二酚羟基显紫到紫红色各有1个羟基或还有间位羟基一橙红色至红色(6)对亚硝基二甲苯胺反应：9位或10位未取代的羟基慈酮类化合物，尤其是1,8-二羟基衍生物，其翔基对位的亚甲基上的氢很活泼，可与0.1%对亚硝基-二甲苯胺毗嚏溶液反应缩合而产生各种颜色。本反应可作为蕙酮类化合物的定性鉴别反应，不受蕙酶类、黄酮类、香豆素类、糖类及酚类化合物的干扰。四、香豆素的颜色反应(1 )异羟月亏酸铁反应香豆素类成分具有内酯结构，在碱性条件下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟丽酸，在酸性条件下再与Fe3+络合而显红色。此反应为香豆素的检识或结构鉴定。(2)酚羟基反应香豆素类成分常具有酚羟基取代，可与三氟化铁溶液反应产生绿色至墨绿色沉淀。常采用与三氯化铁溶液的反应推断酚羟基的有无。四、黄酮类颜色反应HCI-Mg :多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色；四氢硼钠还原反应：二氢黄酮类化合物专属性较高；错盐-枸檬酸反应：3-0H , 5-0H ;氨性氯化镰反应：邻二酚羟基；五氯化镂：查耳酮。1 .还原反应(1 )盐酸-镁粉反应鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应；多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色，少数显蓝色或绿色，分子中特殊是当B环上有0H或-OCH3取代时，呈现的颜色亦即随之深入。查耳酮、橙酮、儿茶素类无该显色反应；异黄酮类除少数例外，也不显色。留意事项：采用此反应进行黄配类化合物的鉴别时，需留意花色素类及部分橙配、查耳酮类等单纯在浓盐酸酸性下也会发生颜色变化，消失假阳性结果。操作：必要时需预先作空白对比试验，即在供试液中不加镁粉，而仅加入浓盐酸进行观看，若产生红色，则表明供试液中含有花色素类或某些橙配或查耳配类。(2)钠汞齐还原反应黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色；黄酮醇类显黄淡红色；二氢黄酮醇类显恒同色。(3)四氢硼钠还原反应四氢硼钠(NaBH4 )是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂,此反应可在试管中或滤纸上进行。现象：二氢黄酮类或二氢黄酮醇类被还原产生红紫红色，其他黄酮类均为负反应。应用：可用于鉴别二氢黄配类、二氢黄配醇类和其他黄酮类化合物。2 .与金属盐类试剂的络合反应具有3羟基、4-翔基或5羟基、4叛基或邻二酚羟基等结构，则可以与很多金属盐类试剂如铝盐、错盐、锂盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。(1 )三氯化铝反应生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但“羟基黄酮醇或7,4二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。(2 )错盐-枸檬酸反应应用：采用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或50H的存在与否。若消失黄色，说明3-0H或5-0H与皓盐生成了络合物。继之再加入枸檬酸，如黄色不减褪，示有30H或3 , 5二0H ;假如黄色显著减褪，示无3-0H ,但有5-0H。原理：由于5-羟基、4-粉基与铅盐生成的络合物没有3-羟基、4-黑基错络合物稳定。简单被弱酸分解。此反应也可在滤纸上进行，得到的精盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光。(3)氨性氯化锂反应如产生绿色至棕色乃至黑色沉淀，则表示有邻二酚羟基。(4)三氯化铁反应多含有酚羟基,能与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，可呈现紫、绿、蓝等不同颜色。3 .碱性试剂反应生成黄色、橙色或红色等。4 .硼酸显色反应5 .羟基黄酮、6'羟基查耳酣,可与硼酸反应，产生亮黄色。一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光。在枸椽酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光。6 .五氯化铺反应查耳酮类则生成红色或紫红色沉淀，而黄配、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色。应用：区分查耳酮类与其他黄酮类化合物。7 .其他显色反应应用：Gibb's反应也可用于鉴别酚羟基对位是否被取代。方法：酚羟基对位未被取代者在加入Gibb's试剂后即显蓝色或蓝绿色。1 .还原反应(1 )盐酸-镁粉反应鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应；多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红紫红色，少数显蓝色或绿色，分子中特殊是当B环上有-0H或0CH3取代时，呈现的颜色亦即随之深入。查耳酮、橙酮、儿茶素类无该显色反应；异黄酮类除少数例外，也不显色。留意事项：采用此反应进行黄配类化合物的鉴别时，需留意花色素类及部分橙配、查耳酮类等单纯在浓盐酸酸性下也会发生颜色变化，消失假阳性结果。操作：必要时需预先作空白对比试验，即在供试液中不加镁粉，而仅加入浓盐酸进行观看，若产生红色，则表明供试液中含有花色素类或某些橙配或查耳配类。(2)钠汞齐还原反应方法：样品的乙醇溶液中加入钠汞齐，放置数分钟至数小时或加热，过滤，滤液用盐酸酸化。现象：黄酮、二氢黄酮、异黄酮、二氢异黄酮类显红色；黄酮醇类显黄淡红色；二氢黄酮醇类显棕黄色。(3)四氢硼钠还原反应四氢硼钠(NaBH4 )是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，此反应可在试管中或滤纸上进行。现象：二氢黄酮类或二氢黄配醇类被还原产生红紫红色，其他黄酮类均为负反应。应用：可用于鉴别二氢黄酮类、二氢黄酮醇类和其他黄酮类化合物。2.与金属盐类试剂的络合反应黄酮类化合物分子中若具有3羟基、4涉基或5羟基、4-粉基或邻二酚羟基等结构，则可以与很多金属盐类试剂如铝盐、皓盐、镰盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。(1 )三氯化铝反应方法：此反应可在滤纸、薄层上或试管中进行。现象：生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但“羟基黄酮醇或7,4,二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。(2 )错盐-枸檬酸反应应用：采用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或5-0H的存在与否。方法：是取样品0.5 1mg ,用甲醇10ml溶解，加2%二氯氧错甲醇溶液1ml ,若消失黄色，说明3-0H或5-0H与错盐生成了络合物。继之再加入2%枸檬酸甲醇溶液，如黄色不减褪，示有30H或3,5二0H ;假如黄色显著减褪，示无3-0H ,但有 5-OHo原理：由于5-羟基、4-默基与错盐生成的络合物没有3-羟基、4-涉基错络合物稳定。简单被弱酸分解。此反应也可在滤纸上进行，得到的错盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光。(3)氨性氯化锂反应黄酮类化合物的分