生化分析仪项目试剂间相互干扰类型、干扰排查发现及干扰消除.docx

生化分析仪项目试剂间相互干扰类型、干扰排查发现及干扰消除试剂间相互干扰类型试剂中含有下一个检测所要测定的底物，或是含有的某种试剂成 分与下一反应的底物有作用，直接干扰下一反应的测定结果。另一种原因是该试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带 来间接的干扰，因为在有试剂污染的情况下，下一个测试所测定的是 前后两个项目反应的综合作用结果。部分已知的常用试剂间可能产生的相互干扰如下：1、PH值改变试剂中反应缓冲液之间因仪器携带污染而使下一反 应的PH值改变，使下一反应达不到最佳状态。双缩版法测血清总蛋白，若其他条件相同，反应在碱性(PH值8-9) 条件时，蛋白肽键(一CONH)才都能与碱性铜溶液作用生成紫色反应， 完全测出血清蛋白的总量。若pHV8时，总蛋白测定结果偏低，直接影响球蛋白、白蛋白/ 球蛋白的结果。酶活力测定在最适PH值时，反应最快，灵敏度最高， 但是因为缓冲能力有限，可因携带污染使酶促反应出现无效值。大多数酶反应pH值在6. 0-7. 5之间；ALP、-GT LDH须在碱 性条件下最适宜。2、TG、T-CH. UA、MG试剂中含有胆酸盐，对循环酶法测定胆汁 酸能产生严重干扰。3、ALT (IFCC) . AST (IFCC)试剂中含有高活力LD成分，有可能会对LD的测定带来干扰。4、CK (NAC-activated)、CK-MB (NAC-activated)试剂中含有 Glu成分，其分析方法的原理中包含Glu的己糖激酶(HK)反应过程， 因此可能对Glu测定带来干扰，尤其对Glu的HK法测定可能带来严 重干扰。5、 Glu(HK)> CK (NAC-activated) 、 CK-MB (NAC-activated)、 TG HDL-C, LDL-C(直接法)等试剂中使用了镁盐，可能会对其后的 Mg2+测定带来干扰2 ； TP试剂中高浓度的Cu2+对Mg2+测定也会 产生干扰。6、ALT、AST、LDH、CK、CK-MB. UA、LGT、TP, LDH 等试剂由 于试剂中含有K÷,与K+的酶法测定有相同或相反的进程,对K+的酶 法测定产生干扰。7、ChE(Butyrylthiocholine)> TC (ChOD-PAP)> GIu(GOD-PAP). UA(Uricase) > TBDH (DGKC)等试剂使用磷酸缓冲液，可能会对无 机磷的测定带来干扰。8、Mg2+试剂(CaImagite)中含有EGTA成分，为Ca2+络合剂，可 能对Ca2+的测定带来干扰。9、CK检测不应在ALP>Ca检测之前，因CK反应液中加入EDTA-Na, 能抑制ALP活性，结合Ca而使结果偏低。10、BUN酶法测定因谷氨酸脱氢酶(GLDH)消耗NADH,不能放在 底物NADH如ALT、AST项目前检测。干扰排查和发现1、将某一试剂作为样本进行全套项目测定，考察结果的情况， 进而确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目；双试剂的R1、 R2两种都要做，这样在解决干扰时有针对性。2、1份样本分为两份，一份加生理盐水或其他适当的稀释液， 另一份加等量的试剂，同时测定、考察结果的变化，进而确定可能发 生试剂交叉污染时造成干扰的项目。3、怀疑A项试剂对B项目存在干扰，可以用样本先单做B项目 若干次；然后先做A项目，接着做B项目若干次。通过统计学分析， 可以知道A试剂通过试剂针对B项目的干扰程度。干扰消除1、为减少试剂间的相互干扰，应定期对仪器进行适当的保养， 如更换管道，用去污剂、酸性洗液清洗比色杯，用去污剂擦清试剂针, 用苯甲醇擦洗搅拌棒等。2、合理安排检测项目的顺序：一般在安排项目顺序时要求两个 项H间至少要有一个非干扰项目，而最彻底的做法则是将被干扰项目 置于干扰项目之前，以消除干扰发生的可能。同时要求检验人员对仪器的工作状态要了如指掌，并在一个样本 的项目选择或一个样本的最后一项与下一样本的第一个项目选择时 对于试剂交叉污染的可能性加以考虑，合理安排项目顺序，以便得到 更为合理的结果。对常见的生化项目可以按以下顺序安排检测：P、Alb、DBIL、TBIL、K、Ca> CK、TBA、TG> AFU、ALT、CK-MB> APOA1、T-CH、APoB、Ck HDL-C、LP (a)、AST、GPDA、AMY、LDL-C、 BUN、UA、CHE、ADA、r-GT> Mg、Na、ALP、LDH、GPDA、TP、Cro3、一些生化分析仪还有额外的冲洗功能,可以在被干扰项目检测 前对试剂针,比色杯用酸性洗液、碱性洗液进行2次或多次冲洗,以减 少项目间的交叉污染。4、有的全自动化分析仪器有不同的通道,可以将有干扰的项目排 在不同的通道中检测。5、选用具有抗交叉污染的试剂盒：如在游离胆固醇试剂中添加 胆固醇酯抑制剂，以减少胆固醇酯酶水解胆固醇酯引起对游离胆固醇 测定的污染。通过以上几种方法,大部分试剂间的交叉污染能够被解决,实际工 作中，用全自动生化分析仪进行连续的多个项目的测定，每个反应的 详细过程难以探知。要求在实际工作中必须对生化分析仪的工作原理，方法，流程， 状态非常了解，还须对试剂的组成，反应原理作深入的分析，理论分 析结合实际应用,方可以摸索出一套符合本单位工作的方法。