猪瘟专用血清质量标准.docx

猪瘟疫苗专用血清质量标准编号：STP-Z1008-00页码：13版本号：01修订号：01机密等级：秘密起草人起草日期颁发部门质量管理部审核人审核日期批准人批准日期生效日期分发清单研发部质量管理部综合管理部生产管理部市场销售部财务部1. 目的建立猪瘟疫苗专用血清质量标准，保证成品血清质量。2. 适用范围适用于猪瘟疫苗生产专用的初制血清及成品的质量标准。3. 职责3.1. 质量管理部：负责本规程的起草、修订、审核、培训、实施和监督。3. 2.质量管理部QC人员：负责本规程的实施。4. 3.总经理：负责本规程的批准。5. 定义精制血清：初制血清按类型混合后经过滤除菌、分装等程序成为成品血清。6. 引用标准中华人民共和国药典2015版第四部；中国兽药典2010版7. 材料及设备8. 1无9. 流程图无10. 内容1.1. 1.物理性状：橙黄色清亮透明稍粘稠液体。1.2. PH值：依通则0631,7.0-8.51.3. 蛋白质含量：依通则0731（双缩胭法）检查，应为3550g1.8.4.血红蛋白：分光光度计法，不高于20Omg/1。8. 5.大肠杆菌噬菌体：采用噬斑法和增殖法检测，不得有噬菌体的污染8.6. 渗透压摩尔浓度：依通则0632,应为250330m0smo1kg08.7. 无菌检验：依通则1101检查，符合规定。8.9. 支原体：依通则3301检查，不得有支原体污染。8.10. 细菌内毒素：依通则43凝胶法，每m1不高于IOEU。8.10.病毒检查：8.11.依通则3604病毒检查，应符合规定。8.12.支持细胞增殖检查：用Sp20-g14或适宜的非贴壁传代细胞进行。8.12.1.细胞生长曲线的测定取供试品按10%的浓度配置细胞培养液，按每m1含量104的细胞浓度接种细胞，每天计数活细胞，连续观察一周，并绘制生长曲线，细胞的最大增殖浓度应不低于107m1o8.12.2.细胞倍增时间的测定按Sp20-Ag14细胞生长曲线计算细胞的倍增时间。取细胞峰值前一天的细胞计数（K）、接种细胞数（冷及生长时间（乃计算。倍增时间=T/AA=Iog2WSp20-Ag14细胞的倍增时间不超过20小时。8.12.3.克隆率的测定按有限稀释法将细胞稀释，并按每孔1个细胞的浓度接种于96孔细胞培养板，每板至少接种60孔。于37C、5%二氧化碳条件下培养一周后计算克隆率，应不低于70%。克隆率二ABXI00%式中A为细胞克隆孔数。B为接种细胞的总孔数。8.13.牛病毒性腹泻病毒抗原及抗体检测8. 13.1用牛肾细胞（MDBK）等适宜细胞逐头筛选的新生牛血清牛病毒性腹泻病病毒中和抗体小于1：2。酶联免疫吸附法检测BVDV抗体全部阴性。8.13. 2酶联免疫吸附试验逐头筛选牛病毒性腹泻病毒抗原阴性，PCR法检测阴性。8.14.不得添加抗生素和胰岛素等任何化学物质8.15.贮藏温度：T5C及以下8.16.效期：生产之日起5年规格：IoOm1/瓶、500m1瓶、IOoOm1/瓶9.注意事项无10.附录及派生记录无11.相关文件11.1无菌检验操作SOPSop-Z1OOI-OI11.2细菌内毒素检测（凝胶法）SOPS0P-Z1002-0111.3蛋白检验操作SOPS0P-Z1003-0111.4血红蛋白检验操作SOPSOP-Z1004-0111.5支原体检查（培养法）SOPS0P-Z1005-0111.6支原体检查（DNA法）SOPS0P-Z1006-0111.7大肠杆菌噬菌检验操作SOPS0P-Z1007-0111.8病毒检验操作SOPS0P-Z1008-0111.9促细胞增殖检查SOPS0P-Z1009-0111.10摩尔渗透压测定SOPS0P-Z1010-0111.11pH检验操作SOPS0P-Z1011-0111.12BVDV中和抗体检测SOPSOP-Z1O13-0011.13牛病毒性腹泻PCR检测SOPS0P-Z1038-0011.14酶联免疫吸附试验检测BVDV抗原S0P-Z1052-0011.15酶联免疫吸附试验检测BVDV抗体S0P-Z1053-0012.修订记录修订号修改内容生效日期01依据药典修改了蛋白、血红蛋白、病毒测定方法等。2015.12.01