D二聚体检测胶乳凝集法作业指导书.docx

D二聚体检测（胶乳凝集法）作业指导书1 .原理用D-二聚体的单克隆抗体致敏胶乳颗粒，当血浆中D-二聚体浓度升高，胶乳颗粒将发生凝集。2 .标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。2.2标本种类：血浆2.3标本要求：采集静脉血2m1,枸檬酸钠抗凝（蓝色盖子的抗凝管），分离血浆备用。3.标本储存：待测血浆室温下储存不超过4小时，4C不超过8小时，-20C不超过一个月。4,标本运输：室温运输。5 .标本拒收标准：凝集、溶血、脂血和细菌污染标本不能作测定。6 .试剂6. 1试剂名称：D二聚体检测试剂盒6.2试剂生产厂家：美国FiSher科技有限公司6. 3包装规格：80Test/kit6.4试剂组成：6. 4.1致敏胶乳试剂1atexReagent7. 4.2阳性对照PositiveContro18. 4.3阴性对照NegativeContro19. 4.4样品稀释液Sa1ineSo1ution10. .5实验板6 .4.6搅棒6 .5试剂储存条件及有效期：保存于28,有效期1年。7 .操作步骤：7. 1定性检测：7 .1.1用前将所有试剂回复至室温。7.1.2按下表在实验板#1,#2,#3区域滴加试齐IJ。实验板区域#1#2#3阴性对照阳性对照标本对照501501标本501胶乳试剂5015151用搅拌棒搅匀，旋转实验板，在2分钟内于直射光源下观察结果7.2半定量检测7.2.1用前将所有试剂恢复至室温。7.2.2用样品稀释液稀释标本：稀释比例未稀释1：21：41：8未稀释标本中所含D-二聚体(gm1)0.250.51.02.0稀释后标本501501501501胶乳试剂501501501501用搅拌棒搅匀，旋转实验板，在2分钟内于直射光源下观察结果8 .结果判断：阴性：呈现圆滑均匀的乳状悬液。阳性：呈现凝集颗粒。半定量测定：浓度为出现阳性结果的最高稀释度XO.25gm19 .参考范围：阴性或<0.25gm110 .质量控制：每次试验均应设阴性和阳性对照，其结果应与预期相符。11 .临床意义：H.1高凝状态，血栓性疾病和D1C时，血浆D-二聚体明显升高，是诊断D1C的重要依据。11.2D-二聚体在继发性纤溶症时升高，而在原发性纤溶症时正常，这是鉴别两者的重要依据。12 .操作性能：快捷简便、灵敏度0.225gm1,重复性好，特异性高。13 .方法局限性：13. 1D-二聚体阴性不能完全排除栓塞的存在。13.2正常水平的D-二聚体偶尔会出现非特异性凝集。13. 3EDTA抗凝血储存超过4个小时，将会出现非特异性凝集。14.注意事项：14. 1脂血或者有微生物污染都有可能造成非特异性凝集。14. 22分钟内观察结果。14.3试剂和对照中含叠氮钠，勿触及皮肤和粘膜。15.参考文献：15. 1E1ms,M.J,eta1,(1986)Rapiddetectionofcross-1inkedfibrindegradationproductsinp1asmausingmonoc1ona1antibodycoated1atexpartic1es.J.Path.85：36Q-36415. 2Ba11egaeer,V,eta1.(1987)Fibrino1yticresponsetovesousocc1usionandfibrinfragmentD-dimer1eve1sinnorma1andcomp1icatedpregnancy.ThrombHaemostas58：1030-1032