戊型肝炎病毒抗体IgG ( 抗-HEV·IgG )标准操作程序SOP文件.docx

ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-SOP-01-19戊型肝炎病毒抗体IgG （抗HEV IgG）版序：ABCD页码：第1页，共2页前言戊型肝炎。原来称作肠道传染性非甲非乙型肝炎，在同一个地区可以同甲型肝炎相伴发生，散在流行。HEAb包括HEAb. IgG和HEAb. IgM两类抗体。原理本试剂盒采用间接法检测人血清或血浆中的抗TIEV IgG抗体。具有简便、快速、准确及可多次使用等优点。试剂厂家上海实业科华生物技术有限公司试剂盒组成1、2、3、4、包被板条阴性对照血清阳性对照血清酶标记物溶液5、样本稀释液试剂的稳定性与贮存6、底物液A7、底物液B8、终止液9、浓缩洗涤液（用蒸锵水1： 25稀释后使用）试剂自生产日起避光贮存于2-8,有效期内稳定。标本的收集与处理标本为无溶血血清。操作步骤1、加对照血清：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔，并在阴、阳对照孔内直接加入相应血清各100ulo2、加样（1： 21稀释）：在板孔底部，加入2滴（100ul）样本稀释液，再加入5ul样本，轻拍混匀封板后，置37水浴25分钟。3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次后在吸水纸上拍干。4、加酶：除空白对照孔外，每孔加2滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37C水浴25分钟。5、洗涤：同步骤3。6,显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻拍混匀后，置37水浴10分钟。7,每孔加终止液50ul, 450nm比色。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-SOP-01-19戊型肝炎病毒抗体IgG (抗HEV IgG)版序：ABCD页码：第2页，共2页结果判定1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，呈明显兰色或显色明显深于阴性对照者判为阳性；显色与阴性对照相近或稍深于阴性对照者判为阴性。2、酶标仪检测(选择波长450nm)：每孔终止液1滴后，用空白孔校零，测定各孔吸光度0D值。Cutoff Value二阴性对照平均0D值+0. 22样本 0D 值Cutoff Value 为抗-HEV IgG 阳性；样本 0D 值=Cutoff Value 为抗TEV IgG 阴性。质量控制每批检测同步进行质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。参考范围酶联免疫吸附试验(ELISA)：阴性临床意义:(1) HEAb. IgM阳性，表示近期感染戊肝炎病毒。(2)凡急性期与恢复期双份血清的HEVAb. IgG效价=4倍增高，可判为HEVAb. IgG阳性，表明新近感染戊型肝炎病毒，有临床确诊价值。注意事项1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂盒用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37放置至溶解。洗涤要充分，各孔均需加满，防止孔口内游离酶不能洗净。6、试剂盒置于2-8贮存，效期6个月。7、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。