乙型肝炎病毒核心抗体IgM（ HBcIgM ）标准操作程序SOP文件.docx

文件编号：ABCD-01-52ABCD医院免疫实验室乙型肝炎病毒核心抗体IgM ( HBcIgM )版序：ABCD页码：第1页，共2页前言HBAb是由乙型肝炎核心抗原刺激肝细胞产生的一种免疫球蛋白，其中有IgG、IgM、IgA和IgE型。临床上常规检测的有IgM和IgG型。原理本试剂盒采用捕获法检测人血清或血浆中的抗-HBc IgM抗体。具有简便、快速、准确及可多次使用等优点。试剂厂家上海实业科华生物技术有限公司试剂盒组成5、底物液A6、底物液B7、终止液8、浓缩洗涤液(蒸储水1： 251、包被板条2、阴性对照血清3、阳性对照血清4、酶标记物溶液稀释后使用)试剂的稳定性与贮存试剂自生产日起避光贮存于2-8,有效期内稳定。标本的收集与处理标本为无溶血血清。操作步骤1、加对照：设空白对照1孔，阴、阳性对照各2孔，并直接加入100ul阴、阳性对照血清。2、加样：(1： 1000稀释)(1)在空白试管内，每管加入5ml生理盐水，再分别加入5ul样本，摇匀,即为1： 1000的稀释样本；(2)在包被板相应样本孔底部，加入100ul已稀释的样本，轻轻振荡封板后，置37水浴20分钟。3、洗涤：扣去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置20秒，扣去洗涤液，重复4次，最后一次在吸水纸上拍干。4、加酶：除空白对照孔外，每孔加1滴酶标记物，轻轻振荡封板后，置37C水浴20分钟。5,洗涤：同步骤3洗涤6、显色：每孔加底物液A、B各1滴，轻轻振荡封板后，置37水浴10分钟。文件编号：ABCD-01-52ABCD医院免疫实验室版序：ABCD乙型肝炎病毒核心抗体IgM ( HBcIgM ) 页码：第2页，共2页结果判定1、目测：在白色背景下观察各孔颜色，明显兰色判为阳性；无色或极淡兰色判为阴性。2、酶标仪检测(选波长450nm)：每孔加终止液1滴，用空白孔校零，测定各孔0D值。样本0D值=4判断为阳性，否则为阴性阴性对照平均0D值注：阴性对照孔0D值小于0.05时，按0.05计算；大于0.05时，按实际质:控制每批检测同步进行标准和质控品测定，绘制室内质控图。其它按室内质量控制管理规定进行。参考范围酶联免疫吸附试验(ELISA)：阴性临床意义：(1)乙肝核心抗体IgM增高可诊断急性乙型肝炎。(2)单纯核心抗体IgG增高常表示有既往感染。(3) HBcb的出现表明肝内乙肝病毒复制活跃，肝细胞受损较重，并且传染性较强。(4) HBcAb对乙型肝炎无保护作用，其持续阳性可长达数十年甚至保持终身。注意事项1、不同批号的试剂不可混用。2、试剂用前先平衡至室温。含血球的标本易出现假阳性，应避免使用。3、未用完的板条应及时封存于易封袋中。4、滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直。5、若浓缩洗涤液出现结晶，可于37C放置至溶解。洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内的酶不能洗净。6、本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室规程操作。