饲料中添加红曲米对红白锦鲤幼鱼生长体色及生化指标的影响.docx

摘要：为研究饲料中添加红曲米对红白锦鲤Cyprinuscarpio幼鱼生长、体色及部分血液和肝胰脏生化指标的影响,试验配制5种饲料，分别添加红曲米0(对照)、0.5、1.0、1.5、3.0gkg,选择初始体质量为(8.79±180)g的红白锦鲤幼鱼450尾，随机分为5组，每组设3个重复，每个重复30尾，投喂56d后停喂含红曲米的饲料，采用不添加红曲米的基础饲料继续投喂14d,养殖周期共70d,在试验的第56天时取样检测生长、生化指标，分别在停喂红曲米饲料的第0、7、14天时取样检测体表色度指标。结果表明：在饲料中添加红曲米能显著提高试验鱼的增重率、特定生长率及饲料效率(/K0.05),且显著降低试验鱼血糖含量及血清中谷草转氨酶(AST)活性(/<0.05)；红曲米添加量为1.5g/kg时，试验鱼谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著高于对照组(A0.05),当红曲米添加量过高(3.0g/kg)时，试验鱼肝胰脏丙二醛(MDA)含量显著升高(人0.05),而不同水平的红曲米对超氧化物歧化酶(SoD)及过氧化氢酶(CAT)活性无显著性影响(。0.05)；添加1.0g/kg红曲米的饲料能显著提高试验鱼体表a值和皮肤中类胡萝卜素含量(7K0.05),停喂红曲米饲料7、14d后，1Og/kg组试验鱼体表a值仍显著高于对照组(/K0.05)。研究表明，在饲料中添加红曲米能有效提高红白锦鲤幼鱼的生长性能，降低其血糖含量，改善体色，建议添加量为1.0g/kg,可维持14do关键词：锦鲤；红曲米；生长；体色；血液生化指标；肝胰脏生化指标红曲米(redkojirice)也称红曲，是以釉稻、粳稻、糯米等稻米为原料，经红曲霉菌(monascus)发酵而成的棕红色或紫红色的纯天然无污染米曲，具有良好的着色性和多种功能活性，红曲米包含多种功能成分,主要有洛伐他汀类（InonaCo1ir1K,胆固醇降低剂）、红曲色素（食品着色剂）、二甲酸（一种抗氧化剂）、麦角留醇（ergostero1）、抗菌活性物质、酶类活性物质和Y-氨基丁酸（一种抗高血压物质）等化合物，其中，红曲色素是一种安全性极高的天然食用色素及防腐剂，目前已被广泛用于食品、医药和化妆品等领域,被认为是化学防腐剂的最佳替代品之一。洛伐他汀类是胆固醇生物合成的抑制剂，能够有效调节人和其他动物的血清胆固醇含量，在医学临床上具有广泛的用途，如洛伐他汀类是治疗人高胆固醇血症最有效的药物之一，还能防止或缓解动脉硬化和冠心病等。此外，红曲米还兼具抗氧化、抗肿瘤、抗应激、预防癌症、增强免疫力等重要生物学功能。目前，红曲米作为功能性饲料添加剂主要用于禽类养殖。研究证实，蛋鸡饲料中添加0.5%的富含红曲色素微生物发酵饲料可提高蛋鸡生产性能，改善鸡蛋品质。此外，对海兰褐蛋鸡的研究也发现，添加0.5%红曲霉-中草药复合物（以红曲粉为主，与山药、神曲、山楂和红枣配伍而成）能有效缓解其产蛋后期生产性能下降的趋势,并有效增强蛋壳厚度，加深蛋黄色泽。但在水产动物方面，仅见红曲米作为鱼类防腐剂或保鲜剂使用，尚缺乏红曲米作为饲料添加剂的使用研究。锦鲤Cyprinuscarpio因其体格健美、色彩艳丽、花纹多变而广受消费者喜爱，其观赏价值主要取决于体色和体型。目前，国内外对于锦鲤体色的研究已有一些报道，但关于红曲米作为饲料添加剂对锦鲤生长、着色、健康方面的影响尚未见报道。本试验中，以红白锦鲤幼鱼为研究对象，探讨不同红曲米添加量对幼鱼生长性能、色素积累及部分血液和肝胰脏生化指标等的影响，以期为红曲米作为锦鲤饲料添加剂的使用提供参考。1材料与方法1.1 材料试验用红白锦鲤幼鱼购自天津市隆锦水产养殖有限公司，试验在天津市隆锦水产养殖公司车间进行，红曲米购自西安泽邦生物科技有限公司。1.2 方法1.2.1 试验饲料配制以鱼粉、玉米蛋白粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕等为蛋白源，大豆油为脂肪源，添加不同水平红曲米。基础饲料原料组分为菜籽粕20乐豆粕18%,玉米蛋白粉15%,棉籽粕12%,面粉9.5%,小麦数8%,鱼粉6%,豆油5%,预混料4%,微晶纤维素2%,氧化胆碱0.5%o其中，每千克预混料含维生素A225000IU,维生素D12500-50000IU,维生素E2800IU,维生素K,100mg,维生素B260mg,维生素B2160mg,维生素B2200mg,泛酸2300mg,叶酸，11mg,烟酸2510mg,镒60800mg,铁48018750mg,锌5005000mg,铜20100mg,硒2.512.5mgo在基础饲料中分别添加红曲米0（对照）、0.5、10、1.5.3.0gkg,配制成5组试验饲料。其中，红曲米为深红色精细粉末，洛伐他丁含量为1.3%。所有固体饲料原料均过198Um筛，原料逐级放大混匀后，用双螺杆制粒机（华南理工大学机械工程研究所制造）制成颗粒饲料，每组饲料设两种规格（。=15、2.Omm）,在烘箱（DK400,YAMATO）40C下烘干2h,取出后自然风干至水分为12%左右，于-20冰箱中保存，饲料营养水平见表1。表1饲料营养水平（风干基础）Tab.1Nutrient1eve1softheexperimenta1diets(air-drybasis)J"%红曲米添加量/(gkg-1)redkojirice1eve1水分moisture灰分ashcontent粗蛋白质crudep>tein粗脂肪crudefa1。（对照组）8.39.6334.6910.690.57.98.9834.7510.831.07.89.9134.6110.141.58.29.4235.1811.033.07.48.7335.6510.461.2.2 试验设计及饲养管理试验开始前将红白锦鲤幼鱼暂养14d以适应环境。暂养期间投喂不添加红曲米的基础饲料，暂养结束后，挑选身体健康、外表无伤、初始体质量为（8.79±1.80）g的红白锦鲤幼鱼450尾，随机分为5组，每组设置3个平行，每个平行组放置30尾鱼,饲喂含红曲米的饲料第56天时，取样检测幼鱼生长、生化指标。而后，余下的鱼使用基础饲料继续投喂14d,停喂红曲米饲料第0、7、14天时，取样检测体表色度值和各组织类胡萝卜素含量，养殖周期共为70do试验期间，每日8:00和16:30投喂，每日投喂量约为鱼体质量的3%,每日吸除缸底粪便和残饵,每日换水1次,每次换水量为总水量的1/3,所换水均经24h曝气。试验期间水温为(250±1.0)°C,PH为7.67.8,氨氮含量WO.05mg1,溶解氧含量26.0mg1o1.2.3 样品采集经56d饲养后，试验鱼禁食24h,经丁香酚(1：10OOo)麻醉后,称重并记录鱼的数量。从每只水槽随机取10尾试验鱼，测定其体表、"、)值(此为停喂Od的色度值)，于后尾部采血，将血液离心5min(4°C,3500rmin),取上清液保存备用，用于检测血液生化指标；采血后的试验鱼于冰盘上解剖取其肝胰脏和皮肤，用于检测肝胰脏生化指标和类胡萝卜素含量(此为停喂Od时的类胡萝卜素含量)。之后在停喂红曲米饲料的第7、14天时，从每槽随机取6尾试验鱼，测定其体表£、a、)值，用上述方法采集皮肤、肝胰脏、肠道、眼组织，所有样品均于-80°C超低温冰箱中保存备用。1.2.4 指标的测定与计算1)生长指标的计算。计算公式为增重率(WG)=(z-<)<×100%,(1)特定生长率(SGR)=(In/Mn/z)¢×100%,(2)饲料效率(FE)EW+忆盼/C,摄食率(FI)=6r(z+0/2X100%,(4)成活率(SR)=成活数/总数X100%o(5)其中：川为试验鱼初始总质量(g)；V为试验鱼终末总质量(g)；W为死亡试验鱼总质量(g)；川为鱼体初始平均质量(g)；/为鱼体终末平均质量(g)；£为试验时间(d)；C为摄饵量(干质量，g)o2)一般营养成分的测定。采用恒重恒压干燥法(GB/T5009.32010)、杜马斯燃烧法(ThennOfisherscientificF1ASH2000全自动蛋白测定仪)(GB/T243182009)、索氏抽提法(GerhardtSOXTHERM)(GB/T5009.62010)、灼烧重量法(GB/T5009.42010),分别测定水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量。3)血液和肝胰脏生化指标的测定。血清谷草转氨酶(aspartatetransaminase,AST)>谷丙转氨酶(a1anineaminotransferase,A1T)>血糖(b1oodg1ucose,G1u)>甘油三酯(trig1yceride,TG)及总胆固醇(tota1cho1estero1,ChO1)送至天津市金域医学检验所检验，采用罗氏(ROCheC311,Gennan)全自动生化分析仪测定。采用南京建成生物工程研究所试剂盒分别测定肝胰脏丙二醛(ma1ondia1dehyde,MDA)>过氧化氢酶(Cata1ase,CAT)>超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(g1utathioneperoxidase,GSH-PX)含量。4)体表色度值的测定。采用色差仪(CR-400)测定锦鲤体表红质上、a、。值。5)类胡萝卜素含量的测定。取适量样品记录样品质量，对红白锦鲤红色的皮肤(带鳞片)、背鳍、尾鳍、眼、肝胰脏、肠道及饲料进行总类胡萝卜素含量(mgkg)的测定，计算公式为总类胡萝卜素含量二册垃/(以。(6)其中：/为吸光度值；4为常数(10)；V为提取液体积(In1)；£为摩尔消光系数(2500)；G为样品质量(g)。1.3数据处理试验数据均采用平均值土标准差(mean±SD)表示，采用SPSS19.0软件进行单因素方差分析(ANOVA),采用Tukey法进行组间多重比较，显著性水平设为0.05。2结果与分析2.1 饲喂红曲米饲料56d后幼鱼生长指标的变化从表2可见：投喂红曲米饲料56d后，各组试验鱼存活率为87.78%100.00%,组间无显著性差异(P>0.05)；饲料中添加红曲米均能显著提高试验鱼增重率、特定增长率及饲料效率(/K0.05),且添加量为15gkg时，各指标均达到最大值；而不同红曲米添加量对试验鱼摄食率无显著性影响(0O05)o表2饲喂56d后不同红曲米添加量对红白锦鲤幼鱼生长指标的影响Tab.2Effectsofdifferentredkojirice1eve1songrowthperformanceofthejuveni1ered-whitekoicarpfedfor56d红曲米添加/(gkg-')增近率/%特定生长率/(%-d',)饲料效率/%摄食率/%成活率/%itm1kojiri<c1eve1weightgainrate%p<xificgmth1cfeedcf1icicnc7I<mkIintakesurviva1ra1e043.IS±0.72°0.65±0.O140.28±0.01a2.19t,1593.33±6.670.574.34t6.38'I.O1±0.07b0.44±003*2.20±0.()392.78±8.551.076.7216.64k1.03±0.07»0.45±0.03、2.20±0.031.±0.1.584.25±9.78'I.I1±0.100.5