灵芝检验操作规程（依据2023版药典）.docx
灵芝验操作规程（依据2023版药典）【性状】赤芝外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，直径1018cm,厚12cm0皮壳坚硬，黄褐色至红褐色，有光泽，具环状棱纹和辐射状皱纹，边缘薄而平截，常稍内卷。菌肉白色至淡棕色。菌柄圆柱形，侧生，少偏生，长715cm,直径13.5cm,红褐色至紫褐色，光亮。狗子细小，黄褐色。气微香，味苦涩。紫芝皮壳紫黑色，有漆样光泽。菌肉锈褐色。菌柄长1723cm0栽培品子实体较粗壮、肥厚，直径1222cm,厚1.54cm0皮壳外常被有大量粉尘样的黄褐色电子。【鉴别】（1）本品粉末浅棕色、棕褐色至紫褐色。菌丝散在或粘结成团，无色或淡棕色，细长，稍弯曲，有分枝，直径2.56.5m0胞子褐色，卵形，顶端平截，外壁无色，内壁有疣状突起，长812km,宽58m°（2）取本品粉末2g,加乙醇30m1,加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醛2m1使溶解，作为供试品溶液。另取灵芝对照药材2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各41,分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油酸（6090°C）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。（3）取本品粉末1g,加水50m1,加热回流1小时，趁热滤过，滤液置蒸发皿中，用少量水分次洗涤容器，合并洗液并入蒸发InI中，置水浴上蒸干，残渣用水5m1溶解，置50m1离心管中，缓缓加入乙醇25m1,不断搅拌，静置1小时，离心（转速为每分钟4000转），取沉淀物，用乙醇IOm1洗涤，离心，取沉淀物，烘干，放冷，加4mo11三氟乙酸溶液2m1,置IOm1安甑瓶或顶空瓶中，封口，混匀，在120水解3小时，放冷，水解液转移至50m1烧瓶中，用2m1水洗涤容器，洗涤液并入烧瓶中，60C减压蒸干，用70%乙醇2m1溶解，置离心管中，离心，取上清液作为供试品溶液。另取半乳糖对照品、葡萄糖对照品、甘露糖对照品和木糖对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每Im1各含0.1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各3可，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-丙酮-水（5:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对氨基苯甲酸溶液（取4.氨基苯甲酸0.5g,溶于冰醋酸9m1中，加水IOm1和85%磷酸溶液0.5m1,混匀），在105加热约10分钟，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。其中最强荧光斑点为葡萄糖，甘露糖和半乳糖荧光斑点强度相近，位于葡萄糖斑点上、下两侧，木糖斑点在甘露糖上，荧光斑点强度最弱。【检查】水分不得过17.0%（通则0832第二法）。总灰分不得过3.2%（通则2302）O【浸出物】照水溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，不得少于3.0%o【含测定】多糖对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每Im1含012mg的溶液，即得。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.2m1、0.4m1、0.6m1、0.8m1、1.0m1、1.2m1,分别置Iom1具塞试管中，各加水至2.0m1,迅速精密加入硫酸慈酮溶液（精密称取意酮0.1g,加硫酸Ioom1使溶解，摇匀）6m1,立即摇匀，放置15分钟后，立即置冰浴中冷却15分钟，取出，以相应的试剂为空白，照紫外可见分光光度法（通则0401）,在625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。供试品溶液的制备取本品粉末约2g,精密称定，置圆底烧瓶中，加水60m1,静置1小时，加热回流4小时，趁热滤过，用少量热水洗涤滤器和滤渣，将滤渣及滤纸置烧瓶中，加水60m1,加热回流3小时，趁热滤过，合并滤液，置水浴上蒸干，残渣用水5m1溶解，边搅拌边缓慢滴加乙醇75m1,摇匀，在4放置12小时，离心，弃去上清液，沉淀物用热水溶解并转移至50m1量瓶中，放冷，加水至刻度，摇匀，取溶液适量，离心，精密量取上清液3m1,置25m1量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。测定法精密量取供试品溶液2m1,置Iom1具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自”迅速精密加入硫酸葱酮溶液6m1“起，同法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的含量，计算，即得。本品按干燥品计算，含灵芝多糖以无水葡萄糖（C6H12O6）计，不得少于0.90%。三菇及笛醇对照品溶液的制备取齐墩果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Im1含0.2mg的溶液，即得。标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1m1、0.2m1、0.3m1、0.4m1、0.5m1,分别置15m1具塞试管中，挥干，放冷，精密加入新配制的香草醛冰醋酸溶液（精密称取香草醛0.5g,加冰醋酸使溶解成IomI,即得）0.2m1、高氯酸0.8m1,摇匀，在70C水浴中加热15分钟，立即置冰浴中冷却5分钟，取出，精密加入乙酸乙酯4m1,摇匀，以相应试剂为空白，照紫外可见分光光度法（通则0401）,在546nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。供试品溶液的制备取本品粉末约2g,精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醇50m1,超声处理（功率140W,频率42kHz）45分钟，滤过，滤液置IOOmI量瓶中，用适量乙醇，分次洗涤滤器和滤渣，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。测定法精密量取供试品溶液0.2m1,置15m1具塞试管中，照标准曲线制备项下的方法，自“挥干”起，同法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中齐墩果酸的含量，计算，即得。本品按干燥品计算，含三菇及留醇以齐墩果酸（C30H483）计，不得少于0.50%o
