氟乙酰胺实验室检测方法气相色谱氮磷检测器法.docx

氟乙酰胺实验室检测方法气相色谱氮磷检测器法1 .液液萃取/气相色谱氮磷检测器法定量测定血液中氟乙酰胺（中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所，李晓华等）1.1 适用范围：对血液、血浆或血清样品中进行氟乙酰胺定量测定。1.2 原理：首先使用液液萃取对样品前进行前处理，然后将处理后样品定容，并经过毛细管柱分离，使用氮磷检测器对其中组分氟乙酰胺进行测定，通过氟乙酰胺标准品的保留时间以及标准曲线来进行定性和定量检测。1.3 方法重要参数1.3 .1线性范围:标准品溶液125%m速.0gm1°可对血液、血浆或血清中氟乙酰胺含量在125ngm1000ngm1的样品进行氟乙酰胺定量测定。1.3.2 精确度：批内精密度实验低、中、高三个浓度变异系数分别为9.6、9.8,7.8%,批间精密度实验低、中、高三个浓度变异系数分别为6.6、8.5、6.2%o1.3.3 准确度：低、中、高三个浓度实验变异系数分别为9.5、9.8、7.9%o1.3.4 检出限：最低定量浓度为125ngm101.3.5 全程测定时间：60分钟1.4 器材与试剂气相色谱仪(配置氮磷检测器)；非极性毛细管气相色谱柱(HP-I)；振荡仪；离心机；加样枪；吹氮仪毒鼠强标准；乙酸乙酯1.5 操作步骤1.6 .1色谱条件a)色谱柱：HP-1交联石英毛细管柱30mX032mi.d.×O.25umob)温度：进样口25(C,检测器25(TC0程序升温：初始温度6(TC,以25oCmin的速率升温至25(C,保留时间Imin;c)载气：高纯氮气，柱头压力35kPa(5Psi),不分流进样，分流时间075min,隔垫清扫1.6m1/min。尾吹流量：30m1mino氢气流量：3.3m1mio空气流量：86m1mino1.6.2 标准曲线的配制称取50mg氟乙酰胺标准品，用乙酸乙酯在50m1容量瓶中定容，配制成Img/m1的氟乙酰胺储备液。用储备液稀释出1ONg/ni1、5gm1>2.5Mgm1>12511的标准溶液，利用此系列标准溶液绘制标准曲线，相关系数为0.999o1.6.3 样品前处理取出InII血浆样品放入试管中，加入2nd乙酸乙酯，石蜡膜封口，振荡混匀4分钟(如果乳化现象比较严重，可以加入O.5m1的异丙醇）,3000rpm离心4分钟,将上清液取出,重复上述萃取过程一次，将两次上清液合并。合并的上清液在40。C水浴下吹氮至近干，加入0.Im1乙酸乙酯定容，振荡混匀1分钟。1.5.4进样检测取定容后的溶液Iu1进样检测。16质量控制a）空白对照样色谱图上没有保留时间与氟乙酰胺相同的峰。b）进待测样品前必须进空白样或乙酸乙酯溶剂，以确认进样针和色谱仪器系统未受污染。c）样品色谱图上氟乙酰胺的保留时间与标准品的差值不应该超过003分钟。d）标准曲线的相关系数应大于0.99,在4个标准浓度点中，可以去除1个点，重新计算标准曲线，但这个点不能是最高点和最低点。e）详细填写实验原始记录及结果报告，交由质控人员检查，校核后报告结果。