致痉挛性杀鼠剂实验室检测方法.docx

致痉挛性杀鼠剂实验室检测方法1.液液萃取/气相色谱氮磷检测器法定量测定血液中毒鼠强（中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所，李晓华等）1.1 适用范围：对血液、血浆或血清样品中进行毒鼠强定量测定。1.2 原理：首先使用液液萃取对样品前进行前处理，然后将处理后样品定容，并经过毛细管柱分离，使用氮磷检测器对其中组分毒鼠强进行测定，通过毒鼠强标准品的保留时间以及标准曲线来进行定性和定量检测。1.3 方法重要参数1.3.1 线性范围：标准品溶液O.g-5.og。可对血液、血浆或血清中毒鼠强含量在10ngm500ngm1的样品进行毒鼠强定量测定。1.3.2 精确度：批内精密度实验低、中、高三个浓度变异系数分别为9.6%、9.8%和7.8%,批间精密度实验低、中、高三个浓度变异系数分别为6.6%、8.5%和6.2虬1.3.3 准确度：低、中、高三个浓度实验变异系数分别为9.5%、9.8%和7.9%o1.3.4 检出限：最低定量浓度为IOng/m1。1.3.5 全程测定时间：120分钟1.4 器材与试剂气相色谱仪（配置氮磷检测器）；非极性毛细管气相色谱柱（HP-I）；振荡仪；离心机；加样枪；吹氮仪毒鼠强标准；乙酸乙酯1.5 操作步骤1.6 .1色谱条件a）色谱柱：HP-1交联石英毛细管柱30mX032mi.d.×O.25umob）温度：进样口25（C,检测器25（TC0程序升温：初始温度15（TC,保留时间InIin,以TC/niin的速率升温至250,保留时间Imin;c）载气：高纯氮气，柱头压力35kPa,不分流进样，分流时间O.75min,隔垫清扫3.6m1/min。尾吹流量:30m1mio氢气流量：3.3m1mino空气流量：86m1/min。1.5.2标准曲线的配制称取IOOnIg毒鼠强标准，用乙酸乙酯在IOOnII容量瓶中定容，配制成Img/m1的毒鼠强储备液。用储备液稀释出5gm1>2gm1>INg/m1、0.5gm1>0.2gm1和0.1gm1的标准溶液，利用此系列标准溶液绘制标准曲线，相关系数为0.999o1.5.2样品前处理取出InII血浆样品放入试管中，加入2nd乙酸乙酯，石蜡膜封口，振荡混匀4分钟（如果乳化现象比较严重，可以加入O.5m1的异丙醇），3000rpm离心4分钟，将上清液取出，重复上述萃取过程一次，将两次上清液合并。合并的上清液在40。C水浴下吹氮至近干，加入0.Im1乙酸乙酯定容，振荡混匀1分钟。1. 5.3进样检测取定容后的溶液Iu1进样检测。1.6质量控制a）空白对照样色谱图上没有保留时间与毒鼠强相同的峰。b）进待测样品前必须进空白样或乙酸乙酯溶剂，以确认进样针和色谱仪器系统未受污染。C）样品色谱图上毒鼠强的保留时间与标准品的差值不应该超过0.03分钟。d）标准曲线的相关系数应大于0.99,在4个标准浓度点中，可以去除1个点，重新计算标准曲线，但这个点不能是最高点和最低点。e）质控样测得值应在质控样品浓度的80%120%之间。f）详细填写实验原始记录及结果报告，交由质控人员检查，校核后报告结果。