核桃分心木成分的研究V4.docx

附件6编号蜃什火4学士学位论文核桃分心木成分的研究学院名称：生命与地理科学学院专业班级：食品质量与安全2018级10班学生姓名：帕提古买海木学号：201804273038指导教师：李雪玲（副教授）完成日期：2023年04月14日本次实验是为了研究乙醇提取法对核桃分心木中黄酮成分的提取效果，分别对比了两种不同的方法来提取分心木，根据其相关实验数据，对比出提取黄酮成分效果更好的方式。以黄酮得率为指标，芦丁为标准品，设计单因素试验对比在回流提取法下的黄酮得率。设计正交试验优化核桃分心木黄酮的回流提取工艺。结果显示：乙醇提取法在料液比1:30,加入60%的乙醇提取90min,黄酮得率最高，达到了2.76%。本次实验结果对于改进核桃分心木黄酮成分提取方式有所帮助，为今后进一步核桃分心木的相关产品通供了一定的理论支持。关键词：核桃分心木；黄酮类物质；分离纯化Studyontheconstituentsofdiaphragmajug1andisAbstractThisexperimentistostudytheeffectofethano1extractionontheextractionofFIavonoidsfromwa1nutdistractor.Twodifferentmethodsarecomparedtoextractdistractor.Accordingtothere1evantexperimenta1data,thebetterwaytoextractf1avonoidsiscompared.Takingtheyie1doff1avonoidsastheindexandrutinasthestandard,asing1efactortestwasdesignedtocomparetheyie1doff1avonoidsunderref1uxextraction.Orthogona1testwasdesignedtooptimizetheref1uxextractionprocessofF1avonoidsfromwa1nutdistractor.Theresu1tsshowedthattheyie1doff1avonoidswasthehighest,upto2.76%,whentheso1id-1iquidratiowas1:30and60%ethano1wasaddedfor90min.Theresu1tsofthisexperimentarehe1pfu1toimprovetheextractionmethodOfF1avonoidsfromwa1nutdistractor,andprovidesometheoretica1supportforthere1atedproductsofwa1nutdistractorinthefuture.Keywords：Diaphragmajug1andis;F1avonoids;Separationandpurification摘要2Abstract31前言61.1 研究背景612研究目的和意义61.3 国内外研究进展61.4 研究内容72.理论基础71 .1黄酮类化合物的简介72 .2黄酮类化合物的提取72.2.1有机溶剂提取法72.2.2超声提取法72. 2.3酶解法83. 2.4微波萃取法83.实验部分83.1 材料与试剂83. 3实验准备工作83. 3.1绘制芦丁溶液的标准曲线83. 4不同料液比、提取时间、乙醇体积分数提取核桃分心木黄酮93. 4.1不同料液比提取核桃分心木黄酮93. 4.2不同提取时间提取核桃分心木黄酮93. 4.3不同乙醇体积分数提取核桃分心木黄酮93. 4.4正交试验93. 5分心木总黄酮的测定103. 5.1黄酮得率的测定103. 5.2黄酮得率的计算方法104. 6数据分析方法104结果与分析104.1芦丁标准曲线104. 2不同料液比、提取时间、乙醇体积分数提取核桃分心木黄酮试验结果.114. 2.1不同料液比提取核桃分心木黄酮试验结果114. 2.2不同提取时间提取核桃分心木黄酮试验结果114. 2.3不同乙醇体积分数提取核桃分心木黄酮124. 3不同料液比、提取时间、乙醇体积分数提取核桃分心木黄酮试验结果.134. 3.1不同料液比提取核桃分心木黄酮135. 3.2不同提取时间提取核桃分心木黄酮1344名吉"Vts14参考文献15致谢1.前言1. 1研究背景分心木，别名胡桃衣，胡桃科、胡桃属，最初产生于欧洲东南部和亚洲中西部。在全球范围内，核桃多有广泛的种植和产出，在我国也有较为广泛的分布。自汉朝时期传入中原地带后，核桃在我国的种植衍生历史已有上千年。核桃在我国的种植区域集中在黄河沿岸、长江沿岸以及西北和西部的干燥少雨地区，属于温带和亚热带作物。研究表明，核桃中有好多生物活性成分，包括黄酮、有机酸、酚类、等，其中黄酮类化合物含量较高。随着时间的推移科学家们对黄酮类化合物的认识和研究渐渐变多，黄酮类化合物在人体内拥有很好的生理和药物活性，主要在抗病毒、耐受癌症、耐氧化、抗炎、耐衰老等方面有很好的效果。李澄澄等拿超声波法获取了从隔膜中提出总黄酮的最佳工艺变量,其中浸取剂的乙醇浓度约为50%,所用温度为50,料液比为1：20（mm）,提取30min,最后总黄酮含量达4.745%。1.2 研究目的和意义核桃一直是我国的主要经济作物之一，我国是核桃产量大国，如何利用核桃资源进行更多食品加工、化学工艺制作等，一直是值得关注的问题。近年来，关于核桃分心木的价值得到了越来越多的认识，关于核桃分心木中的化学成分，特别是黄酮的提取，成为了更多学者研究的课题。但是在目前能查找到的研究成果中，大多数学者都在关注某种提取方法的研究,很少有学者对比不同提取方式提取分心木中黄酮成分的提取效果。因此本研究在收集整理之前的研究成果的同时，更倾向于关注2中方式提取分心木黄酮得率，这也将弥补相关的研究空白，为进一步开发和利用核桃相关产品,提高分心木的利用价值提高更多可能的理论支持。1.3 国内外研究进展现代工艺发现，60%乙醇超声提纯法可达到黄酮的最大利用率，提取黄酮类物质高达目前对核桃分心木中化合物的单体定性研究不多。针对黄酮类、酸类、酚类的研究已逐渐发展完善。黄酮类：经过硅胶柱色谱法可从核桃分心木中析出二氢懈皮素，柚皮素，儿茶素。（2）酿类:硅胶柱色谱可从核桃分心木中提取大黄山（5）,2乙氧基胡桃醍（7）,4,8二羟基4四氢奈酿（6）。（3）二芳基庚烷质量测定：二芳基庚烷是七碳原子通过脂肪链链接1,7-位芳香环的化合物，研究表明其具有很强的抗肿瘤作用，广泛应用于临床的肿瘤质量中。核桃分心木中二芳基庚烷呈环酸性，经分离可得直线型和环形化合物。（4）菇、挥发油类化合物：核桃分心木中可提取四环三菇化合物，和气墩果酸，曾有学者从其中分理处长寿花糖昔，红景天昔，甘油，任三烯，松香芹酮，桃金娘稀静，马鞭草稀醇，等挥发性物质。Meng等您-3H在Intema1iona1journa1ofbio1ogica1macromo1ecu1es发表了3篇，该杂志影响因子为3.909,为2区刊物，主要内容是优化核桃隔多糖的提取工艺，并研究其抗肿瘤、免疫增强、抗氧化和抗菌活性等作用。对于大多数该物质来说，它是由两个苯环连接而成的，有C6-C3-C6结构。自然界中的植物普遍含有该物质，多与糖结合成昔类或碳糖基，有的以游离形式存在。因为其成分中含有酮基，因此略呈现微黄色，被称之为黄酮。如何开发利用天然成分产物是食品加工业近年来炙手可热的课题，而核桃分心木中的黄酮成分，其功效和利用成果，也成为越来越多学者研究的内容。14研究内容本研究拟采用的是乙醇提取法，主要是依据被提取物的极性来选择适合的溶剂。根据极性相似的两者互溶度大的原理。有试验表明，核桃分心木通过紫外分光光度法测定结果如下，核桃分心木溶液中总黄酮含量6.2%,平均回收率99.5%,其75%乙醇提取物中总黄酮含量6.5%,平均回收率100%,结论表明，选用75%乙醇提取黄酮类物质的方法可达到核桃分心木利用率的最大化。2.理论基础2.1 黄酮类化合物的简介对于大多数该物质来说，它是由两个苯环连接而成的，有C6-C3-C6结构。黄酮类物质广泛分布在植物中，近几年来，开发利用天然产物备受关注，其中关于核桃分心木中黄酮成分的提取和利用也成为更多学者关注的新课题。黄酮有很多作用，它对血液循环有促进作用，同时摄入适量的黄酮能够降低胆固醇,使心脑血管病出现可能性减少，对于患有这类疾病的人来说，黄酮对于减轻其症状有积极作用。该物质具有极高抗氧化作用，对于革除大部分氧自由基有显著效果，例如花青素能够使细胞衰变速度减缓，对于防止癌症的出现该物质也能起到一定的效果。黄酮还含有一种PAF抗凝因子，能够显著减少心脑血管病出现的可能性。2. 2黄酮类化合物的提取2.2.1 有机溶剂提取法可以用有机溶剂提取，主要是依据被提取物的极性来选择适合的溶剂。根据极性相似的两者互溶度大的原理。消耗时间较长，会有一些有毒的溶剂污染产品。2.2.2 超声提取法超声波通过促进物料中分子成分的波动周期和速率，从而实现溶液的快速渗透，提大幅缩短有效成分溶于溶液的时间，可以促进物料分子的波动周期和速率，可以降低提取时间。超声波提取法的工作原理是超声波能损坏存在于植物细胞外围的一层厚壁、由磷脂构成的富有弹性地半透性膜等结构，对有效组分溶出有好处，持续攻击更对溶质扩散有益处；超声提取法因其提取效率高、能源损耗较少、不损害有用组分的特点，与普通的浸泡提取法比较，鹤立鸡群；利用超声波法提取天然存在的化学成分，是暂时比较新的方法，但是它已经被广泛用于很多天然植物的黄酮成分提取中，比如枸杞、石竹目、淡竹叶等。2.2.3够解法酶解法是利用有机胶状物质协助提取活性物质以改善单位时间内产物的量的新型实用科技，它可以帮助产物萃取率有效提升；其原因是，酶会破坏存在于植物细胞外围的一层厚壁，减少阻止物质的传播力量，并加快有效组分的流动。该提取方法对于护卫提取的目标不受伤害有很好的作用、得出的目标物比较多、可以应用的范围广，酶具有高度的选择性，因此对不同提取材料，不一样的酶对提取率影响有差异。但受影响比较大，环境不对酶就容易失活。在黄酮类物质的提取中也有广泛地应用。2.2.4微波萃取法微波提取可以避免热水提取时的材料凝聚等缺点。微波萃取的优点是原料消耗少、污染小、加热均匀、无干燥等预处理、萃取效率高、选择性较好、回收率较高、所需要的时间较短，不足之处是所使用的电磁波会对人体有害。因为微博萃取技术对于天然植物有效成分的提取效率有着明显的改善效果，因此已经被越来越越广泛的利用到黄酮类化合物，以及其他植物有效成分的提取产业中来。3.实验部分1 .1材料与试剂本次实验所需要的材料和试剂包括芦丁标准品、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、95%乙醉、浓盐酸、新疆本地纸皮核桃分心木、氯化钠、硝酸钠。图3-1是本实验的流程图。3 图3-1实躲流程图4 .3实验准备工作3.3.1绘制芦丁溶液的标准曲线从冰箱中取出IOmg芦丁标准品倒入烧杯中，用60%乙醇至完全溶解，再倒入50m1容量瓶定容。将配置好的溶液0、1.()、2.0、3.0、4.0、5.0m1移取至IJIom1容量瓶，得到质量浓度分别为0、0.01、0.02、0.03、0