实验室食品中亚硝酸盐的测定盐酸萘乙二胺法亚硝酸盐测定.docx

实验室食品中亚硝酸盐的测定盐酸蔡乙二胺法亚硝酸盐测1范围本标准规定了食品中亚硝酸盐的测定方法。适用于食品中亚硝酸盐的测定。亚硝酸盐方法检出限为Img/kg。2原理试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸蔡乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。3试剂3. 1亚铁氟化钾溶液:称取106.Og亚铁氟化钾KFe(CN)63比0,用水溶解,并稀释至IoOon11。3.2 乙酸锌溶液：称取220.Og乙酸锌Zn(CHsCOO)2、20,加30m1冰乙酸溶于水，并稀释至1000m1o3.3 饱和硼砂溶液：称取5.Og硼酸钠(Na2BQ7IOH2O),溶于IOOm1热水中，冷却后备用。3.4 对氨基苯磺酸溶液(4g1):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于IOOnI120%盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。3.5 盐酸蔡乙二胺溶液(2g1)：称取0.2g盐酸蔡乙二胺，溶解于IOOm1水中，混匀后，置棕色瓶中，避光保存。3.6 亚硝酸钠标准溶液：准确称取0IOOOg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入50OnI1容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于200Ug的亚硝酸钠。3.7 亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.OOm1,置于20OnI1容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.Oug亚硝酸钠。4仪器4. 1小型绞肉机。4.2分光光度计。5分析步骤5.1 试样处理称取5.Og经绞碎混匀的试样，置于50m1烧杯中，加12.5m1硼砂饱和液，搅拌均匀，以70。C左右的水约300m1将试样洗入50Om1容量瓶中，于沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加入5m1亚铁氟化钾溶液，摇匀，再加入5m1乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置0.5h,除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去初滤液30m1,滤液备用。5.2 测定吸取40.Om1上述滤液于50m1带塞比色管中，另吸取0.00.0.20.0.40.0.60.0.80.1.00.150、2.00.2.50m1亚硝酸钠标准使用液（相当于0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5ug亚硝酸钠），分别置于50m1带塞比色管中。于标准管与试样管中分别加入2m1对氨基苯磺酸溶液（4g1）,混匀,静置3min-5min后各加入InI1盐酸蔡乙二胺溶液（2g1）,加水至刻度，混匀，静置15min,用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较，同时做试剂空白。6结果计算试样中亚硝酸盐的含量按式（1）进行计算。mxX1000vI式中：X试样中亚硝酸盐的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；M试样质量，单位为克（g）；A测定用样液中亚硝酸盐的质量，单位为微克（Ug）；V1试样处理液总体积，单位为毫升（m1；V2一测定用样液体积，单位为毫升（m1）。计算结果保留两位有效数字。7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%o