抗乙肝表面抗原抗体抗－HBs标准操作程序SOP文件.docx

ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-16抗一 HBs版序：ABCD页码：第1页，共4页用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的抗乙肝表面抗原抗体（抗-HBs）。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。概述：抗-HBs （一般是IgG）出现在感染乙肝病毒或接种乙肝疫苗以后。抗体针对HBsAg的a决定簇及各亚类的决定簇。对于乙肝疫苗方面，抗-HBs试验可以检查接种疫苗的必要性和效果。此外，抗-HBs试验还可用于乙肝感染急性期以后的病程监测。Elecsys抗TBs试验采用从人血清提纯的HBsAg亚型ad和ay抗原。原理：（aday）混匀，形成夹心复合物。第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的和素间的反应结合到微粒上。第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通对磁铁吸复合物通过生物素与弱附 到rt1极 卜.未白采用双抗原夹心法原理，整个过程18分钟完成。第1步：40l标本中的抗-HBs、生物素化的HBsAg （aday）和钉（Ru）标记的HBsAgABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-16抗一 HBs版序：ABCD页码：第2页，共4页注意：保证定标液不污染瓶盖。标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：EDTA-K3抗凝。如用肝素锂、枸椽酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝，测定值会降低约25%。标本在2 8度可稳定6天，-20度可稳定3个月。标本可冻融6次。有沉淀的标本使用前需离心。不可使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡。检测步骤：提供的材料：货号：11820524, 100人份的Elecsys抗- HBs试剂盒包含： M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素化的HBsAg R2三联比陡行标记的HBsAg Cal 1定标液1 Cal 2定标液2需要的材料(未提供)： Elecsys 抗- HBs 质控品 1 和2 (PreciControl 抗- HBs)货号 11876317 Elecsys通用稀释液货号11732277 Elecsys 2010分析仪 Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货号 11662988 Elecsys测量池清洗液(CleanCell)货号 11662970 Elecsys 添加剂液(SysWash)货号 11930346 Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号 11298500方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。Elecsys2010：将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。系统自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。定标：每批抗-HBs试剂盒必须用新鲜试剂和抗-HBs Cal 1, Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-16抗一 HBs版序：ABCD页码：第3页，共4页 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒） 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。 根据规定进行多次标定。定标液范围（IU/1） ： Cal 1： 4-15；Cal 2： 350-600质控：用Elecsys抗-HBs质控品1和2 （PreciControl）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。计算：对每一个标本，仪器会自动计算抗-HBs含量，单位是IU/1。干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素30mgdl）、溶血（血红蛋白L5gdl）、脂血（脂质1500mgdl）和生物素30ngml等干扰。接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（2100Uml） o抗-HBs浓度高达150, 000IUml也不出现钩状效应。17种常用药物经试验对本测定无干扰。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体和抗钉抗体的干扰。Elecsys抗- HBs测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。检测范围：2. 001000IUml稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:100稀释。稀释后的标本抗-HBs含量必须高于lOIU/ml。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。正常参考值：结果的解释：标本的抗-HBs含量10IUl判断为抗HBs无反应性。标本的抗-HBs含量=10IUl判断为抗- HBs有反应性。注意：由于抗体的多样性，抗TBs的测定值可根据检测方法的不同而改变。用不同厂家生产的试剂测出的结果可相差4倍（偶有相差10倍者）。在疫苗接种效果观察过程中，如因检测方法改动引起的含量变化，必须用原法同时测定核实过。根据目前文件编号：ABCD-02-16ABCD医院免疫实验室版序：ABCD抗一HBs页码：第4页，共4页的推荐标准，HBV感染后产生的保护能力取决于抗TBs的水平是否高于10IU/1。根据Robert Koch协会疫苗标准委员会制定的标准，如抗-HBsG00IUl,需再次接种疫苗并需监测一年时间。