食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定 气相色谱串联质谱法.docx

ICS 67.050CCS X 10准T/CIQA 000 - XXXX食品中环氧乙烷和2.氯乙醇总量的测定气相色谱串联质谱法Determination of total ethylene oxide and 2-chloroethanol in foodGas chromatography-tandem mass spectrometry（征求意见稿）2024-XX-XX 实施2024-XX-XX 发布中国出入境检验检疫协会 发布刖 百本文件按照GB/T 1. 1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国出入境检验检疫协会提出并归口。本文件起草单位：南京海关动植物与食品检测中心，上海安谱实验科技股份有限公司，南京师范大 学。本文件主要起草人：胡国绅、沈伟健、张炯恺、吴丽娜，余可叠、陆慧媛、王红、马海建、张驰中、 侯燕、丁涛。食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定气相色谱串联质谱法1范围本文件规定了食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定 气相色谱串联质谱法。本文件适用于动物源性食品、植物源性食品、粮食及其制品、焙烤类食品、调味品、果脯类食品和 油炸食品中环氧乙烷和2-氯乙醇总量的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件, 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4方法提要样品中环氧乙烷经过冰醋酸和氯化钠转化为2-氯乙醇，经有机试剂提取、净化后，过0. 22 m滤膜， 上机分析。目标物经毛细管气相色谱柱分离，串接质谱仪检测，以2-氯乙醇的特征离子对定性，外标法 定量。通过测得的2-氯乙醇含量，根据换算系数，得到环氧乙烷和2-氯乙醇的总量。5试剂和材料5. 1试齐IJ6. 1. 1乙月青，色谱纯。7. 1.2正己烷，色谱纯。8. 1.3冰醋酸，分析纯。9. 1.4 QUEehERS缓冲盐混合物：4 g硫酸镁、1 g氯化钠、1 g柠檬酸钠、0 5 g柠檬酸氢二钠。5. 1.5 0. 22 m有机相滤膜。5.2 标准物质5.3 . 1 2-氯乙醇：LOmgmL,市售有证标准溶液。5.4 试剂配制1 .3.1正己烷饱和乙月青：取体积比为1:1的正己烷和乙月青于分液漏斗中，震荡均匀，静置后，取下层 待用。5 . 3. 2 O. K冰醋酸正己烷饱和乙月青：将1 mL冰醋酸加入到999 mL的正己烷饱和乙晴中，混匀待用。5.5 标准溶液配制5.6 . 1标准储备液：准确移取1 mL 2-氯乙醇溶液（5.2. 1）于10 mL容量瓶中，用乙月青定容，配制成 浓度为100 ug/mL的储备液，-18 冰箱内避光保存，有效期1个月。5.7 .2标准中间液：准确移取0.1 mL标准储备液（5.4.1）于10 mL容量瓶中，用乙月青定容，配制成 浓度为LO ug/mL的中间液，-18 冰箱内避光，保存有效期1个月。5.8 .3标准使用液：准确量取一定量体积的标准中间液（5.4.2）,用乙月青配制成2、5、10、20、50、 100 ng/mL的标准工作溶液，现用现配。6仪器和设备6.1 气相色谱串联质谱仪（GC-MS/MS）：配电子轰击离子源（El源）。6. 2 高速离心机：转速，8000 rmin06.2 微型旋涡混合仪。6.3 天平：感量为0.01 go6.4 色谱柱：毛细管色谱柱，柱长60 m,内径0.25 mm,膜厚1.4 m,固定相为6%氟丙基/苯基-94% 聚二甲基硅氧烷，或其他等效的毛细管色谱柱。7分析步骤7.1 试样制备固体试样，使用冷冻研磨仪或剪刀等工具将其破碎成粒径小于ImmXlmm后，尽快称量。切割样品 时，不可使其发热变软。将试样适当保存，0-5 °C冷藏保存，一周内使用。7.2 提取及净化称取2.0Og试样于离心管中，加入10. OmLO. 1%冰醋酸正己烷饱和乙月青（5.3.2）,尽快用盖密封， 用机械振荡器震荡5 min。加入QUEChERS缓冲盐混合物（5. 1.4）,震摇30 min,离心5 min,取上清液1 mL,过0.22 m滤膜供气相色谱串联质谱仪测定。8仪器参考条件8.1 气相色谱仪部分a） 色谱柱：DB-Select 624 UL 60 m×0. 25 mm×l. 4 um；b） 进样口温度：80 保持 0.25 min, 900 °Cmin 升温至 220 ；c）进样方式：脉冲分流进样，分流比3： 1；d） 柱温：40 保持 5 min, 30 °Cmin 升温至 220 ,保持 4 min；e） 载气:99. 9%氢气。8.2 串联质谱仪部分a）传输线温度：220 ；b）四级杆温度：150 ；c）电离方式：EI；d） 电离能量：70 eV；e）测定方式：多反应监测模式。监测离子对信息见表1。表1定性和定量离子对及电离能量母离子 m/ z子离子 m/z电离能量 eV定量离子对80444定性离子对80314823149标准曲线依据8. 1和8. 2的条件对标准使用液（5. 4. 3）分别进样，以待测物定量离子对峰面积为纵坐标, 标准使用液浓度（ngmL）为横坐标，绘制标准工作曲线。10结果分析10.1 定性分析按照仪器参考条件测定试样溶液和标准工作溶液,如果试样中的目标物色谱峰保留时间与标准工作 溶液一致（变化范围在±2.5%之内）；且试样中目标物的两个定性离子的相对丰度比（k）与浓度相当标准 工作溶液中目标物的两个子离定性离子的相对丰度比相比，其允许偏差不超过下表2规定的范围，则可 判定为试样中存在目标物。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差（）相对离子丰度k>5050k>2020k>10k10允许的最大偏差+ 20+ 25+ 30+ 5010.2定量分析根据绘制的标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中目标化合物响应值均应在仪器测定的线性范 围内。标准物质色谱图参见附录A图A.1。10.3 结果计算与表述试样中环氧乙烷和2-氯乙醇总量按公式（1）计算：X=f XS 55式中:X 一试样中环氧乙烷和2-氯乙醇的含量（以环氧乙烷计），单位微克每千克（ugkg）；C 一试样中2-氯乙醇的浓度，单位为纳克每千克（ngmL）；V 一定容体积，单位为毫升（mL）；M 一称样量，单位为克（g）；0. 55 转换系数。计算结果保留小数点后两位。11精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。12定量限当称样量为2.0Og时，2-氯乙醇的定量限为20.0 gkg,环氧乙烷和2-氯乙醇总量的定量限为.0 U gkgo附录A（资料性）2-氯乙醇标准溶液的色谱图图A. 1 2-氯乙醇标准溶液100 ngmL色谱图图A.2试剂空白色谱图附录B(资料性)添加回收试验采用阴性的脱水香葱样品进行三个水平(20.0 gkg> 40. 0 gkg> 200. 0 gkg)的加标回收 率验证，具体数据见表B. 1。表B. 1脱水香葱中2-氯乙醇的测定值加标回收率及精密度数据添加水平 g/kg测定值 g/kg回收率 %RSD%20.019.9599. 77.8318.8794.317. 1785.821.85109. 219.8099.019.3796.840.040. 05100. 15.4637.4093.540. 55101.438. 7896.943. 14107.942.66106. 7200.0216. 54108.33. 32204. 29102. 1212. 26106. 1209. 34104. 7196. 6398.3206. 59103. 3