输血科Rh血型鉴定操作规程.docx
【操作步骤】1、试管法a）力口 1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中（12*75mm）ob）再加1滴约3-596的被检红细胞悬液于试管中，混匀。c）放入BaSo2002-2型离心机以3400rmin离心15秒。d）检查是否有溶血，然后轻轻摇动试管，肉眼观察有无凝集现象，必要时须用低倍镜观察，记录结果。e）若是阴性结果，需在37C孵育15-30分钟，然后再离心观察结果。结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。2、微柱凝胶法（ABO、RhD血型检测卡）a）取ABO、RhD血型检测卡，在卡上标记患者信息，将卡上的锡纸膜撕开。b）将受检者0.5%-0. 8%红细胞悬液分别加入第一至第三支微管中，或第四至第六微管中，每管50ul。c）即刻使用TD-3A型血型血清学用离心机离心5min, 2分钟900rpm, 3分钟1500rpm,取出肉眼判定结果。3、结果判定a）试管法阳性反应：出现红细胞凝集，为RhD阳性。阴性反应：红细胞不出现凝集，为RhD阴性。b）微柱凝胶法阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。【操作步骤】1、试管法a）力口 1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中（12*75mm）ob）再加1滴约3-596的被检红细胞悬液于试管中，混匀。c）放入BaSo2002-2型离心机以3400rmin离心15秒。d）检查是否有溶血，然后轻轻摇动试管，肉眼观察有无凝集现象，必要时须用低倍镜观察，记录结果。e）若是阴性结果，需在37C孵育15-30分钟，然后再离心观察结果。结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。2、微柱凝胶法（ABO、RhD血型检测卡）a）取ABO、RhD血型检测卡，在卡上标记患者信息，将卡上的锡纸膜撕开。b）将受检者0.5%-0. 8%红细胞悬液分别加入第一至第三支微管中，或第四至第六微管中，每管50ul。c）即刻使用TD-3A型血型血清学用离心机离心5min, 2分钟900rpm, 3分钟1500rpm,取出肉眼判定结果。3、结果判定a）试管法阳性反应：出现红细胞凝集，为RhD阳性。阴性反应：红细胞不出现凝集，为RhD阴性。b）微柱凝胶法阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。11
