常用染色液和试剂的配制.docx
一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中,再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油,然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。成熟时间约2-4周。若加0.4g碘酸钠可加快成熟。二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油,在研钵内研磨30min以上,至看不见颗粒为止,再将全部(66m1)剩余甘油倒入,于56温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存,一般刚配制的母液染色效果欠佳,保存时间越长越好。临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后,加入少量甲醇再反复研磨,最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀,染料全部溶解后,将染液保存于棕色瓶内备用。四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%2%铁明矶水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。五、硫堇染液(工作液)干液(硫堇):硫堇Ig或2g溶于Ioom150%乙醇中,溶解后过滤备用;醋酸钠缓冲液:醋酸钠3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中;0.1mo1/1盐酸;按:=40:28:32比例配成混合液,调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。将以上试剂混合溶解后用0.5%苯酚水溶液稀释至100m1o八、卡诺(Carnoy)氏液配方1:无水乙醇3份,冰醋酸1份,混匀即可。配方2:无水乙醇6份,冰醋酸1份,氯仿3份,混匀即可。九、酸性生理盐水的配制将IOm1O.1mo1/1盐酸加入30Om1生理盐水中,调整其PH值至2.53.5十、迈耶(Mayer)氏蛋白甘油粘贴剂取一个鸡蛋的蛋清,充分搅拌成泡沫状,然后用粗滤纸或双层纱布过滤,经过数小时即可滤出透明蛋白液。再加入等量的甘油并轻轻摇动,使两者混合。最后加入少许麝香草酚防腐。可保存几个月,半年以后不宜使用。十一、血管注射标本色剂红色色剂:银珠3g,明胶15g,蒸储水IOOm1;蓝色色剂:普鲁士蓝1g,明胶15g,蒸储水IOom1将银珠和普鲁士蓝分别在研钵内研细,加入温水少许搅和,将明胶和蒸储水倒入25Om1烧杯内,置水浴锅中隔水加热沸腾使明胶完全熔化,过滤后分别倒入盛有银珠和普鲁士蓝的研钵内搅拌均匀。最后分别倒回烧杯中,并置入水浴锅内保温。水温视明胶浓度而定。亦可用代用品淀粉(2份)、甲醛(1份)、甘油(1份)、水(6-8份)和其他红、蓝色染料进行配制。先将淀粉、甲醛和甘油混匀,再加入染料进行搅拌,逐渐加入水调匀。十二、红细胞稀释液称取氯化钠0.5g,硫酸钠2.5g5氯化高汞0.25g,用蒸储水溶解至Ioom1十三、白细胞稀释液取冰醋酸1.5m1和1%龙胆紫1m1,混匀,加蒸储水至Ioom1。十四、碘酒称取碘28和碘化钾1.5g,先加入少量的75%乙醇搅拌,待溶解后再用75%乙醇稀释至IOOm1。十五、碘液碘Ig、碘化钾2g,蒸储水300m1,先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘溶解在碘化钾溶液中,最后用水稀释至IOOOrn1o十六、肝素溶液纯的肝素Wmg能抗凝IOOm1血液。如果肝素的纯度不高或已过期,所用的剂量应增大2-3倍。一般可配1%肝素于0.9%生理盐水中使用。十七、草酸盐抗凝剂称取草酸镂1.2s、草酸钾0.8g,加蒸储水至Ioom1。为防止霉菌生长,可加40%甲醛溶液1m1o十八、柠檬钠抗凝剂常配成3%-5%蒸储水溶液。每毫升血加3-5mg即可达到抗凝目的十九、D76显影液称取米吐尔28g,无水亚硫酸钠IOOg,几奴尼5g,硼砂2g,依次逐个溶解于75Om1(50)的水中,最后加水至1OOOm1二十、D72显影液称取来吐尔3.1g、无水亚硫酸钠45g,几奴尼12g,无水碳酸钠67.5g,澳化钾1.9g,依次逐个溶解于75Om1(50°C)的水中,最后加水至IOOOm1。二十一、SB-1停显液取28%醋酸48m1稀释至1000m1。(28%醋酸用98%浓度的冰醋酸3份,加水8份混合而成。二十二、F5酸性定影液称取硫代硫酸钠240g,无水亚硫酸钠15g,醋酸(28%)45m1、硼酸7.5g,硫酸铝钾15g,依次逐个溶解于70Om1(50°C)的水中,最后加水至IOoOm1。