检验科血液室作业指导书-血液分析流水线作业指导书.docx

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1、1目的保证XN9000血液分析流水线的正常使用，有效检测外周全血中的红细胞、白细胞、血小板及相关参数，对血液相关疾病的诊断、治疗以及疗效观察提供参考数据。2适用范围适用于本实验室正在使用的所有该型号仪器。3职责本实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。如有改动，需先由本室负责人提出，再报经科主任批准。4程序4.1 仪罂简介XN9000血液分析流水线是由XN-A1血液分析仪、XN-B4血液分析仪和SP1O推片机组成的流水线轨道。4.2 仪器工作原理4.2.1 鞘流DC检测方法（RBC、P1T、HCT）在该检测器内，样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后，由前

2、鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。通过小孔以后，经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流，并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔，所以也可防止产生异常血细胞脉冲。4.2.2 使用半导体激光器的流式细胞计数方法使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。然后将该样品送入流动池中。这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时,由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中

3、心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收，侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。a.前向散射光和侧向散射光当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。XE-2100检测前向散射光和侧向散射光，前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内部（如细胞核的体积大小）的信息。b.侧向荧光当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓度的增加，荧光强度也增加。通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色的信息，XE-2

4、100检测侧向荧光。4.2.3 S1S-血红蛋白测定法在稀释的血液中加入溶血素，红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂冼硫酸钠的作用下，二价铁转变成三价铁，并与月桂洗硫酸钠结合形成S1S-Hb,S1S-Hb进入血红蛋白检测系统。测定S1S-Hb在555nm波长下的吸光度值，并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。4.2.4计算（红细胞指数）红细胞指数（MCV、MCH和MCHC）通过RBC计数（RBC）、Hb浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）的值计算出。计算公式如下：HCT10,5MCV（f1）=RBC/1HGB（g1）10,2MCH（pg）=RBC/1HGB（g1）MCHC（

5、g1）=HCT4.2.6 标本推片及染色a.推片：仪器自动混匀标本，根据标本的HCT值选择点样量、推片角度、推片速度，推出厚薄均匀的血涂片。推片参数如下（表1）：表1推片参数水平HCT上限HCT下限样品体积（脉冲）展开玻璃角（度）展开玻璃速度（毫米/秒）待机时间（秒）涂片开始位置（脉冲）1-20132715()21002202513271402100325301327130210043()351327120210053540132711021006404513271002100745501327902100850551327802100b.染色：瑞吉染色，由于细胞内不同化学成分对染料的亲和力不

6、一样，酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝对细胞内的化学成分进行染色，同时采用磷酸缓冲液对细胞染色效果进行调整，以达到较好的染色效果。染色参数如下：Stain1pre-fix：UseStain1Fixtime：0003Stain1Drytime：00,05,Stain1cyc1e：15Stain1Staining：0130”Stain1di1ution：UseStain1di1.time：0400Rinse：UseHeaterUseDrytime：02004.3 仪器的基本资料适用于血液白细胞计数及分类，红细胞计数，血红蛋白，血小板计数，红细胞压积，红细胞体积分布宽度，平均红细胞血红蛋白含量，平均红细

7、胞血红蛋白浓度，平均红细胞体积，血小板体积分布宽度，血小板压积和网织红细胞计数等检验以及异常标本自动推片和染色。4.4 试剂组成4.4.1 浓缩稀释液(CE11PAeK-DST)试剂品牌：Sysmex试剂成份：包装规格：101氯化钠160.0g1硼酸25.00g1四硼酸纳5.0g1EDTA-K25.0g1使用方法：配合RU-20浓缩试剂稀释装置，浓缩液经25倍自动稀释后使用。储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为153(C使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。安全事项：在使用前确认是否有污染或颜色变化，一经发现，请速更换。如出现冻结现象，将其解冻，混匀后使用。注

8、意事项：注意防尘。4.4.2 RET/P1T-F用全血稀释液(CE11PACKDF1)试剂品牌：Sysmex包装规格：1.51x2试剂成分：甲醇和乙二醇储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为130。使用期限：在失效期前使用。安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。4.4.3 血红蛋白溶血剂(Su1fo1yser)试剂品牌：Sysmex试剂成份：包装规格：151月桂洗硫酸钠1.7g1储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为530。

9、使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。注意事项：若试剂有污染或颜色的变化，更换试剂。如出现冻结现象，将其解冻、混匀后使用。4.4.4 WNR溶血剂(1yserce11WNR)试剂品牌：Sysmex包装规格：412试剂成份：乙二醇储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为130。使用期限：在失效期前使用。安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。4.4.5

10、 WDF溶血剂(1ySerCeI1WDF)包装规格：4120.18%0.08%试剂品牌：Sysmex试剂成份：非离子表面活性剂有机季钱盐储存条件：须存储于干净的环境中，适宜温度为530。使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要的医疗措施。注意事项：在试剂使用前须确认是否有污染或颜色的变化，一经发现，须速更换。若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。4.4.6 WPC溶血剂(1ySerCeHWPC)试剂品牌：Sysmex包装规格：1.51x3试剂成份:氢氧化钠0.03%氯化钠0.41%非离子表面活性剂2.4%

11、储存条件：须存储于干净的环境中，避光，适宜温度为235C.使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。但避免冻结。4.4.7 WNR染色液(F1UOroCeI1WNR)试剂品牌：Sysmex试剂成份：包装规格：82m12聚次甲基染料0.01%1,2-亚乙基二醇99.9%储存条件：须存储于干净的环境中，避光，适宜温度为235。使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当

12、考虑必要的医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。但避免冻结。WDF染色液(F1uoroce11WDF)储存条件：须存储于干净的环境中，避光，适宜温度为235。使用期限：在失效期前使用；开封后的使用期限为60天。安全事项：避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要的医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。但避免冻结。4.4.8 RET染色液(FIUoroCeI1RET)试剂品牌：Sysmex包装规格：12m1x2试剂成分：聚次甲基染料。储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为130。使用期限

13、：在失效期前使用。安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。4.4.9 P1T荧光染色液(FIUOroCeHP1T)试剂品牌：Sysmex包装规格：12m1x2试剂成分：聚次甲基染料。储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为130。使用期限：在失效期前使用。安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。4.4.10 WPC

14、荧光染色液(F1UorOCeI1WPC)试剂品牌：Sysmex包装规格：12m1x2试剂成分：聚次甲基染料。储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为130。使用期限：在失效期前使用。安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。若试剂发生凝固，须替换。4.4.11 清洗液(CE11C1EANAUTO)试剂品牌：Sysmex包装规格：4m120试剂成份:次氯酸钠（有效氯浓度为5%）储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为130。使用期限：在失效期前使用。安全事项：本品为强碱性洗涤剂，避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗,并考虑必要的医疗措施。注意事项：若试剂有任何污损、浑浊、凝固不稳定或颜色变化的迹象，须更换。4.4.12 BASO染液试剂品牌：珠海BASo公司包装规格：51试剂成分：瑞氏粉，吉氏粉。储存条件：须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为1530。使用期限：在失效期前使用。安全事项：避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并考虑必要的医疗措施。注意事项：若发现染色效果出现明显变差，须替换。4.4.