人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位标准操作程序SOP文件.docx

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1、ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-29人类绒毛膜促性腺激素+ B亚单位版序：ABCD页码：第1页，共4页用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的绒毛膜促性腺激素（HCG）力口HCGB亚单位的含量，用于早孕检测。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。概述：HCG的生理功能是维持妊娠黄体及影响类固醇产生。孕妇血清中主要含完整的HCGo检测HCG浓度可在受孕一周后诊断怀孕，在妊娠前三个月测定HCG特别重要，此期间HCG升高提示绒毛膜癌、葡萄胎、多胎妊娠。HCG升高还可见于生殖细胞、卵巢、膀胱、胰腺、胃、肺和肝脏肿瘤病人。含量降低提示流产、宫外孕、妊毒

2、症、死胎。本试剂所用的特异性单克隆抗体可识别完整的HCG、HCG的槽型结构、B核的片断和亚单位。钉标记的抗体和生物素化的抗体针对HCG分子的不同的抗原决定簇。原理：采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第 1 步：20 ul （Elecsys2010,E170）或 15 u 1 （Elecsysl010）标本、生物素化的抗HCG单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗HCG单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压

3、后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。试齐士M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6. 5mlo粒子浓度0.72mgl,生物素结合能力：470ng生物素mg粒子。含防腐剂。R1：生物素化的抗HCG单克隆抗体（灰盖），1瓶，10小。浓度6.3mgl,磷酸缓冲液0.04moll, pH7. 5o 含防腐剂。R2： Ru（bpy）32+标记的抗HCG单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度4.6mgl,磷酸缓冲液0.04moll, pH6.50含防腐剂。储存和稳定性：存放在2-8度

4、，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度12周；放在E170上，7周;放在Elecsys2010上，8周；（使用后放回2-8度；如置20-25度，约20小时）。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-29人类绒毛膜促性腺激素+ B亚单位版序：ABCD页码：第2页，共4页标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：肝素、EDTA-K3,枸椽酸钠或草酸钾抗凝均可。标本在2 8度可稳定8小时,-20度可稳定12个月。冻融一次。标本如有沉淀需离心后再使用。不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。检测步骤：提供的材料：货号:11973193, 100人份的Elecsy

5、s HCG+B试剂盒包含: M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素化的抗HCG抗体 R2三联毗咤钉标记的抗HCG抗体需要的材料(未提供)： Elecsys HCG +B 定标液(CalSet)货号 11973207 Elecsys 通用质控品(PreciControl Universal)货号731416 Elecsys通用稀释液货号11732277 Elecsys2010 分析仪 Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货号 11662988 Elecsys 测量池清洗液(CleanCell)货号 11662970 Elecsys 添加剂液(SysWash)货号 11930346 Elecs

6、ys 系统清洗液(SysClean)货号 11933159方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。定标：每批HCG+B试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用HCG+ CalSet定标液定标。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂(试剂经仪器注册24小时以内)标定一次，如再次标定即根据下列要求： 一个月(同一批号试剂) 7天(放置仪

7、器上的同一试剂盒) 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-29人类绒毛膜促性腺激素+ B亚单位版序：ABCD页码：第3页，共4页质控：Elecsys通用质控品（PreciControl Universal） 1和2以及其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。计算：对每一个标本，仪器会自动计算HCG+B含量，单位是mIUml或IU/L。干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素24mgdl）、溶血（血红蛋白1.0gdl）

8、、脂血（脂质1400mgdl）和生物素80ngM等干扰。接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干（3400Uml） o15种常用药物经试验对本测定无干扰HCG+B浓度高达300000mIUml也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人会出现假阳性反应。ElecsysHCG检测结果应结合病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。检测范围：0. 10010, 000mIUuml稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:20稀释。稀释后的标本HCG+B含量必须高于100mIUml0如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机

9、器自动稀释，机器会自动计算结果。正常参考值： 112名非怀孕、健康妇女第97.5%的测定值是3血1/1111； 36名更年期后健康妇女为6mIUmL 277名健康男性第97.5%的测定值是2 mIUmlo 下表列出妊娠期间HCG的参考值。“妊娠周数”的计算是从上次月经期的开始日算起ABCD医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-29人类绒毛膜促性腺激素+ B亚单位版序：ABCD页码：第4页，共4页妊娠HCG IUml 1000 mIUml*周数例数中位数范围5-95%4421. 110. 04-4. 485528. 050. 27-28. 766729.73. 70-84. 976258.89.70-12083779.531. 1-18492591.561.2-152101271.022.0-1431421933. 114. 3-75. 81535527.512. 3-60. 31616321.98. 8-54. 5176818.08. 1-51.3183018.43. 9-49. 4191420.93. 6-56. 6如有必要，各实验室应自己测定一个参考值。