易错点27 细胞工程与胚胎工程（教师版）.docx

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1、易错点27细胞工程与胚胎工程易错分析1 .有关“植物细胞培养”由愈伤组织进行细胞分化时，一般要先诱导其生芽，然后诱导其生根，可通过控制培养基中生长素和细胞分裂素的比例来实现。光照：在愈伤组织诱导阶段，对有些植物来说，避光培养有利于细胞脱分化形成愈伤组织。当愈伤组织再分化出芽和叶时，一定要有光照，有利于叶片内叶绿素的合成。体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。细胞的全能性指的是细胞的一种潜在能力，这种潜在能力只有在特定的环境中才能表现出来，而不是指细胞在任何条件下都能发育成完整的生物体。植物组织培养中所需的碳源一般为蔗糖，少数为葡萄糖和果糖，原因是蔗糖既可提供充足的碳源，又可维持相对

2、适中的渗透压，而葡萄糖和果糖在与蔗糖提供相同数量碳源的前提下，其造成的渗透压可能过高。2 .有关“原代培养和传代培养”(1)区分原代培养和传代培养的关键是看用胰蛋白酶处理的对象和是否分瓶(分瓶前，第一次用胰蛋白醐对动物组织进行处理后的培养是原代培养。第二次用胰蛋白酹处理，使细胞从瓶壁上脱离下来，分瓶后的细胞培养为传代培养。3 .有关“细胞贴壁和接触抑制”悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。4 .有关“单克隆抗体”用特定抗原对小鼠进行免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗

3、原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。获取小鼠已经免疫的B淋巴细胞的部位：脾。诱导融合的方法：动物细胞融合特有的诱导方法为用灭活的病毒处理，其他物理、化学诱导融合的方法与植物体细胞杂交过程中诱导原生质体融合的方法基本相同。杂交细胞：在诱导因素的作用下进行细胞的诱导融合，形成的杂交细胞有多种，若仅考虑两两融合的情况,形成的杂交细胞有三种，AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我们所需要的杂交细胞，所以需要用选择培养基进行筛选。两次筛选的目的：第一次是在诱导融合之后，利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。第二次是对上述杂交

4、瘤细胞进行筛选，利用96孔板培养，采用专一抗体检测的方法筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。错题纠正优良”*公牛产T-分如二细胞A细胞B用胚应1.如图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，有关分析正确的是（）胚胎干细胞分离培养组织和器官A.应用1中的卵母细胞常取自卵巢，并可直接用于融合B.应用2常用雌性激素处理供体1,目的是使其超数排卵C.应用3一般选择桑葛胚或囊胚进行分割D.应用4体现了动物细胞的全能性【答案】C【分析】1、应用1用到了核移植技术和胚胎移植技术，应用2用到了体外受精技术和胚胎移植技术，应用3用到了胚胎分割技术和胚胎移植技术，应用4用到了胚胎干细胞培养技术。2、细胞的性

5、是指经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。【详解】A、应用1用到了核移植技术和胚胎移植技术，用到的卵母细胞常取自卵巢，但是需要在体外培养到M11中期，A错误；B、应用2用到了体外受精技术和胚胎移植技术，常用外源促性腺激素处理供体1,目的是目的是使其超数排卵，B错误;C、应用3用到了胚胎分割技术和胚胎移植技术，一般选择发育良好、形态正常的桑芟胚或囊胚进行分割，C正确；D、应用4用到了胚胎干细胞培养技术，因为培养的目的是需要的组织和器官，而不是个体或其他各种细胞，所以不能体现动物细胞的全能性，D错误。故选C。2.下图是利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛的流程图，表示相

6、应操作。下列关于早期胚胎形成过程的叙述，正确的是（）A.过程常对雌牛甲进行超数排卵处理B.过程获取的体细胞可以是成熟的红细胞C.过程获得的重组细胞中含有4个染色体组D.过程需要构建抑制细胞分化的培养体系【答案】A【分析】动物细胞核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。【详解】A、为提高良种奶牛的繁殖能力，在获取卵母细胞之前过程需用促性腺激素对奶牛进行超数排卵处理，A正确；B、哺乳动物成

7、熟的红细胞没有细胞核，但是也没有其他的各种细胞器，所以过程获取的体细胞不能用成熟的红细胞，B错误；C、由于获得的体细胞需要进行去核处理，所以过程获得的重组细胞中含有2个染色体组，C错误；D、过程需要构建促进细胞分化的培养体系，培养早期胚胎，D错误。故选AQ3.下图是通过基因工程培养的转基因生物或产品的过程，结合相关知识问答下列问题:目的基因药用蛋,转入药用蛋白基因的牛无限增殖调I111控基因(PrG)乜In体夕卜培养一单克隆抗体富含赖氨酸的蛋白质膏基因O玉米受体细胞一二，转基因玉米重组Ti质粒(1)基因工程技术中最关键的步骤是。让转基因牛的乳汁中含有药用蛋白的流程是：通过构建药用蛋白基因与乳腺

8、蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，需要用到酶，通过方法导入受精卵，选取合适的受精卵进行培养，运用的技术手段有技术，培育出“批量生产药物的工厂转基因牛。(2)选用农杆菌的Ti质粒与目的基因构建重组Ti质粒，把重组Ti质粒导入玉米体细胞中的方法是O【答案】(1)基因表达载体的构建限制酶和连接酶显微注射胚胎培养、细胞培养、胚胎移植(2)农杆菌转化法【分析】1、基因工程的工具：(1)限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核甘酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核甘酸之间的磷酸二酯键断裂。(2)DNA连接的：连接的是两个核甘酸之间的磷酸二酯键。(3)运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动

9、植物病毒。2、基因工程技术的基本步骤：(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-

10、分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质一抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】(1)基因表达载体的构建是基因工程技术中最美键的步骤。在构建基因表达载体时需要用限制酶切割目的基因和运载体，然后用连接酶将目的基因和运载体链接起来。将重组质粒导入动物受精卵细胞需要用显微注射法。从受精卵培育转基因牛过程即发生了胚胎的发育过程，需要将受精卵培养到桑我胚期或囊胚期才能进行胚胎移植，所以此过程运用的技术手段有早期胚胎培养和胚胎移植技术。(2)农杆菌的Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)可转移到受体细胞，并且能将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上。根据农杆菌

11、的这种特点,将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，把重组Ti质粒导入玉米体细胞中完成转化的方法是农杆菌转化法。知识总结1 .植物组织培养的具体操作胡萝卜的组织培养(1)操作步骤取材胡萝卜洗净、削皮、切段(约IoCm)；酒精棉球擦手消毒；胡萝卜段消毒：用酒精溶液消毒30s后，立即用无菌水清洗23次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗23次；将胡萝卜段切成1cm厚的横切片，再选取有形成层的部位，切取1cP左右的小块接种避光条件下培养，诱导其脱分化，长出愈伤组织转接将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上，诱导其再分化生成试管苗进而发育成完整小植株移栽移栽到大田，培养成正常植株(2)

12、注意事项选用形成层进行培养的原因是形成层细胞分裂旺盛，全能性较高，易于脱分化。选用其他部位也可以(理论上具有全能性的细胞均可)。光照的控制：在愈伤组织的诱导阶段往往要避光培养，有利于细胞脱分化产生愈伤组织。当愈伤组织分化出芽和叶时，一定要有光照，以利于叶片内叶绿素的合成。2 .植物激素对植物组织培养的影响（1）按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果使用顺序实验结果先使用生长索，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高简记：先“生”分裂不分化，后“生”分裂又分化，同“使”分化频率高（2）当同时使用这两类激素时，两者

13、用量的比例影响植物细胞的发育方向生长素/细胞分裂素植物细胞的发育方向比值高有利于根的分化、抑制芽的形成比值低有利于芽的分化、抑制根的形成比值适中促进愈伤组织的形成简记：“高”根，“低”芽，“中”愈伤3 .植物体细胞杂交与植物有性杂交中遗传物质的变化设白菜细胞含2x条染色体，2个染色体组；甘蓝细胞含2y条染色体，2个染色体组。项目不同物种体细胞杂交不同物种有性杂交同一物种杂交过程白菜体甘蓝体细胞细胞T/向杂种割胞植物组织培I养杂种植株甘蓝卵口菜精子细胞T1A人谭导E受植卵植物组织培I养杂种植株白菜（或甘白菜（或甘蓝）精f蓝）卵细胞EjT1S受印卵分裂分化子代植株子代染色体数目2x+2yx+y2x

14、（白菜）或2M甘蓝）子代染色体组数422子代是几倍体异源四倍体异源二倍体同源二倍体子代是否可育可育不可育可育繁殖方式无性繁殖有性繁殖有性繁殖变异类型染色体变异染色体变异一4.辨析动物细胞培养相关的两组概念细胞贴壁与接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制。(2)原代培养与传代培养原代培养：动物组织消化后的初次培养称为原代培养。原代培养的细胞核型正常。传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。一般情况下，细胞在传至1050代

15、左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。5 .植物组织培养与动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养理论基础植物细胞的全能性细胞增殖培养基类型固体或半固体培养基液体培养基成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂、植物激素等糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、动物血清等取材植物较幼嫩部分或花药等动物胚胎或幼龄动物的器官或组织关键环节细胞的脱分化和再分化细胞增殖和癌变结果形成新的组织或植物个体，可以体现细胞的全能性形成细胞群，不形成个体，不体现细胞的全能性应用植株快速繁殖；脱毒植株的培育；制备人工种子；生产药物、杀虫剂等；转基因植物的培育蛋白质生物制品的生产；皮肤移植材料的培育；检测有毒