TGXAS-山葡萄培苗生产技术规程.docx

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1、ICS65CCSB61T/GXAS标准TGXASXXXX-XXXX山葡萄组培苗生产技术规程TechnicaIcodeofpracticefortissuecu1tureseedIingproductionofVitisamurensis(征求意见稿)(2023.06.15)在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施广西标准化协会发布目次1范围12规范性引用文件13术语和定义14外植体采集和处理1I1外植体来源1Ii)外植体采集14a外植体处理i5诱导培养2KI诱导培养基2K9培养条件2K2外植体接种26增殖培养2R1增殖培养基

2、2R夕培养条件2Kq接种2R4继代培养27生根培养27I生根培养基279培养条件274生根转接28炼苗移栽2ft1炼苗2fti)育苗容器3QQ基质3ft4洗苗3QK移栽39苗期管理3U1水分3a9光照3Qq施肥34病虫害防治310苗木出圃3IO1苗木分级3起苗3inq包装运输4本文件参照GB/T1.1-2023标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区林业科学研究院提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西壮族自治区林业科学研究院、广西壮族自治区农业科学研究院葡萄与葡萄酒研究所、南宁

3、市翔林生物科技有限公司。本文件主要起草人：张晓宁、吴代东、肖玉菲、朱慧、林东、李洪艳、魏秋兰、韦荣福、张悻、周思泓、覃玉凤、成果、覃子海、钟连香、陈博雯。山葡萄组培苗生产技术规程1范围本文件规定了山葡萄（VWsRupr）外植体采集和处理、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽、苗期管理、苗木出圃、档案管理等技术和要求。界定了山葡萄组培苗生产技术的术语和定义。本文件适用于广西境内山葡萄组培苗生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。G

4、B6000主要造林树种苗木质量分级GB/T15776造林技术规程1Y/T1000容器育苗技术规程3术语和定义GB/T20000.界定的以及下列术语和定义适用于本文件。a1外植体exp1ants植物组织培养过程中，从供体植物上取下来用于培养的细胞、组织或器官。植物生长调节剂P1antgrowthreguIator具有调节植物生长发育作用的有机化合物。芽诱导budsinduction将培养材料放入诱导培养基中进行培养，分化出不定芽的过程。4外植体采集和处理41外植体来源选择枝条茂盛、健康、无病虫害的山葡萄优良单株。43外植体采集每年的春夏季节，在连续3天没有雨水的晴朗的中午，采集当年萌发的半木质化

5、的茎段。44外植体处理4.3.1 预处理将采集的山葡萄茎段用湿毛巾包裹带回实验室，剪去叶片，置于洗洁精溶液中浸泡30min,并用流动自来水冲洗60min,剪掉枝条切口部分，剪成带腋芽1个2个、长2.0CnI3.0CnI的茎段，用0.1%多菌灵浸泡5min。用无菌水冲洗3次4次。4.3.2 消毒在超净工作台上，用75%乙醇溶液浸泡外植体20s,无菌水迅速漂洗5次6次，再用0.1%升汞溶液浸泡外植体20Inin,无菌水漂洗5次6次，将消毒好的外植体两端组织剪去约0.2cm,再用无菌滤纸将枝条表面的水分吸干备用。5诱导培养51诱导培养基诱导培养基配方：改良MS+1.5mg/16-BA+0.2mg/1

6、NAA+30g/1蔗糖+4g/1琼脂,PH值为5.8。E5培养条件培养温度为252。光照强度15001x20001x,光照时间10hd12hd,空气湿度40%50%54外植体接种将外植体修剪为2cm的带芽茎段，茎段基部垂直接种到诱导培养基中，立稳。6增殖培养A1增殖培养基增殖培养基配方：改良MS+2.0mg/16-BA+0.4mg/1NAA+0.1mg/1TDZ+30g/1蔗糖+4.0g/1琼脂，PH值为5.8。A3培养条件同5.2。A1接种外植体诱导培养至萌芽长度大于3.0Cn1后，剪取萌芽接种于继代培养基上。A4继代培养增殖培养10d20d后，将增殖芽分株为单芽或小丛，继续转入继代培养基。

7、继代转接代数不宜超过30代。7生根培养71生根培养基生根培养基配方：1/2MS培养基+0.2mg/1IBA+0.4mg/1NAA+15g/1蔗糖+4g/1琼脂，PH值为5.8。7）培养条件同5.2。74生根转接将生长健壮、长度大于3cm的继代增值芽丛分切为单芽茎段，剪去基部老叶，接种到生根培养基中，Iod左右即可生根，培养15d20d.8炼苗移栽ft1炼苗选取生长健壮、根数3条以上、根长ICm以上的组培生根苗,移到遮光度60%70%,环境温度2028C的大棚内，炼苗10d15d移栽前3d5d松开培养瓶盖。A5育苗容器无纺布育苗袋(规格9cmX3cm或10cm12cm)oR1基质基质由黄心土:珍

8、珠岩:河沙=2:1:2的体积配比混匀而成。在移栽前3d内用0.1%高锦酸钾(KMA)溶液将基质淋透消毒，1d后再用清水淋洒洗去药液。A4洗苗选取苗高23cm,根系21cm,叶色浓绿、健壮的瓶苗，打开培养瓶盖，轻轻将培养基及幼苗倒出，用清水洗净幼苗根部的培养基，保持根系完整湿润。fiS移栽清水淋透基质，用直径ICm木棍在容器杯的中心插一小孔，将苗植入容器基质中间，轻压根部，淋透定根水。9苗期管理。1水分每天喷(淋)水1次2次，保持基质湿度80%90%。03光照移栽后一周内，透光度保持在30%40%,一周后逐渐增加光照到50%左右，一个月后透光度增至70%80%。1施肥宜在傍晚进行。组培苗长出新叶

9、后，每IOd喷施1次0.1%0.3%复合肥(N:P:K=15:15:15)溶液，施肥后立即用清水冲洗叶面，出圃前IOd停止施肥。0A病虫害防治9.4.1苗期主要病虫害病虫害防治遵循预防为主，综合防治的原则。苗期病虫害较少，主要有霜霉病、白粉病、蛟蛀、地老虎、葡萄天蛾及黑豆病。9.4.2防治方法见附录A。10苗木出圃Ift1苗木分级表1苗木等级表苗木种类苗龄合格苗综合控制指标I、级苗百分率I翎苗H级苗地径(cm)苗高(cm)地径(cm)苗高(Cm)容器组培苗0,25年0.20N300.10-0.152030根系发达，长势好，苗干直，无机械损伤，无病虫害80%起苗时间应与栽植季节一致。起苗前Id2

10、d浇透水，起苗时尽量避免损伤苗根和苗干，不得用手提苗茎。11包装运输按GB/T15776的规定执行。11档案管理按1Y/TIoOo规定执行。附录A（资料性）山葡萄苗血茎要病虫害防治见表A.1。表A.1山葡萄苗期主要病虫害防治病虫害名称危害部位防治方法霜霉病嫩枝、叶预防：病害发生前，喷施78%科博600800倍液。每隔Iod15d喷一次。叶片出现霜霉病症状时，可喷施50%烯酰吗咻粉剂30004000倍液，每隔7天喷1次。白粉病嫩枝、叶发芽前喷1次波美35度石硫合剂:发芽后喷波美0.20.3度石硫合剂,或50%甲基托布津可湿性粉剂500倍液；病初用50%丙环哩乳油IOm1加水IoOkg喷雾，或40

11、%氨硅喋乳油600倍液。葡萄虎天牛枝条根据出现的枯萎新梢，在折断处附近寻杀幼虫。发生量大时，在成虫盛发期喷布50%杀螟松乳油1000倍液或20%杀灭菊脂3000倍液。或用棉花酹50%敌敌畏乳油200倍液堵塞虫孔。成虫产卵期喷500倍的90%敌百虫或IOOO倍的50%敌敌畏乳油。球坚介壳虫叶片、枝条各种介壳虫以每代初龄若虫孵化后，尚未形成介壳之前及时喷药防治，效果最好。药剂可选择0.3波美度石硫合剂，50%辛硫磷乳油IOOO倍，80%敌敌畏乳油800IoOO倍液，50%马拉松乳油IOOo倍液，20%灭扫利乳油3000倍液，20%速灭杀丁乳油3OOO倍液，20%嫡蛇克乳油8001200倍液等。卷叶象鼻虫叶片用绿色威雷200300倍液于成虫羽化前喷1次,或在卜.午至黄昏喷施80%敌敌畏、90舟敌百虫、50%马拉硫磷、50%倍硫磷、50%辛硫磷、90%杀螟丹8001000倍液，或10%天王星30003500倍液。