移液器使用标准操作规程.docx
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1、所属类别:稳定细胞株部文件编号:ACR0/QMS/S0P/SC1-09文件名称:移液器使用标准操作规程生效日期:2017.2.28编制:张雪瑶编写日期:2017.2.21批准人职位:部门主管批准人:批准日期:2017.2.28文件类别:SOP页数:13版本号:1.3控制级别:控制文件1目的规范实验室技术人员移液器使用方法,降低不规范操作造成的实验误差,减少错误操作造成的移液器损坏,规范移液器的维护和保养。2适用范围质量分析部所有员工3移液器工作原理3.1 气体活塞式(Air-cushion)Airdisp1acement移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下,排
2、出部分空气,利用大气压吸入液体,再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度。Positivedisp1acement3.2 外置活塞式(Positive-disp1acement)通过分液管或吸头内活塞的连续运动移取和打出液体,活塞和液体直接接触,没有空气柱,适用于密度、黏度与水不同的液体,如易挥发性溶液、粘稠液体等。4移液器的基本知识4.1 基本概念4.1.1 移液器量程移液器可以吸取溶液的范围,通常会标示在移液器上和说明书上常见的量程:0.1-2.51,0.5-101,2-201,5-501,10-1001,20-2001,100-1
3、0001,1000-500014.1.2 配备枪头主要有三种蓝枪头(IOoO1),黄枪头(2001),普通白枪头(101)还有其他的特殊枪头,比如长白枪头(101)和5m1枪头蓝枪头-IOOO1移液器;黄枪头-2001移液器或者101移液器(不建议使用),白枪头-101移液器4.1.3 移液器品牌德国艾本德(EPPENDORF);芬兰雷勃(FinnPiPette),瑞士哈美顿(Hami1ton),DRAGONMED(大龙)等。4.2 移液器量程选择4.2.1 移液器的选择根据所需移液的体积来选择适合的移液器。拿起移液器后第一步先确认移液器的量程,比如拿起一个2001的移液器,先看其量程为20-
4、2001,那么在调节取液范围的过程中,应该注意不要超过移液器的量程。注意事项:移液器的选择尽量选择小量程移液器,比如移液2001选择200N1的移液器,而不选择Iooo1移液器;移液20此选择2-201移液器,不选择20-2001移液器,这样可以确保移液量的精确。4.2.2 量程的调节正确的容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响。从大体积调为小体积:按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可;从小体积调为大体积:设定
5、所需要的容量时应调整到大于设定容量值的1/4圈,再调至设定值,这样可排除机械间隙,使设定量值准确,即先将容量调节钮旋转超过目的容量值的1/4圈,再向下调至设定值,调到移液器最大量程时例外(见图1)。注意事项:任何时候不得调出移液器的最大量程和最小量程。4.2.3 枪头(吸液嘴)的装配单道移液器:将移液枪(器)垂直插入配套枪头中,在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装。多道(如8道或12道)移液枪:将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成
6、清晰的密封圈。(见图2)注意事项:在将枪头(pipettetips)套上移液枪时,很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下,这是错误的做法,因为这样会导致移液枪的内部配件(如弹簧)因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散,甚至会导致刻度调节旋钮卡住。5移液器使用过程任何一个完整的移液循环,包括吸头安装容量设定预洗吸头吸液放液卸去吸头等六个步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。5.1 安装吸头和量程调节见422和4.2.35.2 预洗吸头在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放2到3次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现
7、性。其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。5.3 吸液连接恰当的吸嘴/按下排放控制钮至第一档/将移液器吸嘴垂直进入液面下1-4mm(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握):0.1-101容量的移液器进入液面下1-2mm;2-2001容量的移液器进入液面下2-3mm;200-10001容量的移液器进入液面下3mm;1-5m1容量的移液器进入液面下3-4mm;注:为使测量准确可将吸嘴预洗3次,即反复吸排液体
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