肌微管素1MTM1ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本体液.docx
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1、肌微管素1(MTM1)E1ISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液肌微管素I(MTM1)E11SA试剂盒忒验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(E1JSA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子E1ISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和醉结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。肌微管素I(Mtmi)E1ISA试剂盒自备材料1 .蒸储水。2 .加样器:5ukIOuk505、100u
2、1200、500ukIOOOu13 .振荡器及磁力搅拌器等。安全性1 .避免直接接触终止液和底物A、Bo一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2 .实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3 .不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1 .试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2 .实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3 .不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4 .使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5 .使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份
3、及样品。6 .洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7 .底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8 .加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9 .按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-操作过程中避免任何细胞剌激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,10OC)Xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-EDTA,柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。IOOOXg离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液一IoooXg离心10分钟去
4、除颗粒和聚合物。4、保存一一如果样品不立即使用,应将其分成小部分70保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过漉。不要在37C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50)的稀释:蒸储水50倍稀释。操作步骤1 .使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2 .根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复
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