黑穗醋栗组织培养育苗技术规程.docx
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1、黑穗醋栗组织培养育苗技术规程1范围本标准规定了黑穗醋栗(RibeSnigrUm1)组织培养育苗技术的培养基的制备、消毒灭菌、材料的选择与处理、初代培养、继代培养、生根培养、炼苗和移栽及生产档案。本标准适用于黑穗醋栗组织培养育苗技术。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则NY/T1276农药安全使用规范总则1Y/T1882-2010林木组织培养育苗技术规程3培养基的制备培养基配制按1Y/T1882-2010中规定执行3.
2、1 初代培养基MS+1.0mg116-B+0.1mg1,IBA+0.5mg1G3+30g1,蔗糖,pH5.8。3.2 继代培养基MS+2.0mg16-B+0.2mg1d1B+30g1T蔗糖,pH5.8。3.3 生根培养基1/2MS+0.1mg11IBA+20g1,蔗糖,PH5.8。3.4 培养基保存灭菌后的培养基放入接种室,常温条件下7d内使用,24C条件下14d内使用。培养基应保存于洁净环境中,注意避光和防尘。4消毒灭菌4.1 材料消毒灭菌将采取的植条用饱和洗衣粉水漂洗10min,流水冲洗2h后置超净工作台上用75%的酒精消毒,无菌水荡洗3次,每次3min,再用0.1%升汞消毒,无菌水荡洗5
3、次,每次3min,最后用无菌滤纸吸干植物材料表面的水分。4.2 培养基灭菌瓶装培养基需在12h内完成灭菌,采用高压蒸汽灭菌锅灭菌,在压力11MPa、温度121C条件下灭菌20mio4.3 器具的消毒灭菌剪子、镒子、烧杯等接种器具用高压灭菌锅在压力11MPa,温度121以下灭菌20min。5材料的选择与处理5.1 材料的选择从生长健壮、无病虫害的母株上选取半木质化枝条、茎尖作为材料。5.2 接种取下培养瓶的封口膜,将培养瓶口和镣子在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒并冷却后,把茎段、茎尖切割成0.5cm0.8cm后接种到培养基中,每个培养瓶放3个5个外植体,接种后盖上封口膜,并标注日期。6初代培养6.1
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