牛金属硫蛋白MTelisa试剂盒说明书.docx
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1、牛金属硫蛋白(MT)e1isa试剂盒说明书e1isa试剂盒常见组成部分:1)酶和底物:在E1ISA中ZUi常用的酶为HRP和A1P.2)抗体:在EIJSA中应用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。3)抗原:在E1ISA中应用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。主要有三类,即自然抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。4人E选择素(ESHectinCD62E)检测试剂盒包被:将免疫活性物质(抗原或抗体)结合于固相载体上的过程称为包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纤维薄膜等;常用的方法有吸附法、化学交联法及亲和素生物素间接包被法5)固相载体:固相载体是E1ISA中用以分离结合标记物和游
2、离标记物的主要手段,应与各种免疫活性物质有良好的结合性能并且不改变其免疫活性。常用的固相载体有聚苯乙烯塑料和硝酸纤维素膜。样本实验前准备:E1ISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。(1)血清室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。(2)血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(20003000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。(3)尿液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-30
3、00转/分),仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。(4)细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(20053000转/分).仔细收集上清。(5)培养细胞检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到IoO万/m1左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。(6)组织标本切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4o用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持28的温度。加入
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