制药公司牛病毒检测SOP.docx
《制药公司牛病毒检测SOP.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《制药公司牛病毒检测SOP.docx(2页珍藏版)》请在第一文库网上搜索。
1、细胞培养法及荧光抗体检测(I)样品制备:取约25Om1的新生牛血清供试品用于检测,将其配制成含15%供试品的培养液,用于检测全过程的细胞换液及传代。以检测合格的血清作为阴性对照血清。(2)指示细胞制备:至少采用猴源(如Vero细胞)、以及2种牛源细胞(BT和MDBK细胞或无病毒污染的原代牛肾细胞)以及人二倍体细胞作为指示细胞。细胞复苏后至少传代一次后使用。根据所需量制备足够量的细胞。(3)用含有供试品的培养液将4种指示细胞分别接种于75cm2细胞培养瓶中,接种量应使细胞在培养7天后可达到至少8090%汇合。同时制备阴性对照血清培养瓶。将培养瓶置37、5%Co2培养箱中培养至少7天。可在第5天时
2、换液一次。(4)第7天进行第1次盲传,将接种供试品及阴性对照的每种指示细胞培养瓶分别传出至少2个75cm2培养瓶,继续培养至第14天,在第12天时可换液一次。(5)在第13天时(或笫2次传代前1天)或阴性对照瓶细胞达到至少70%汇合时,制备阳性对照用细胞。即取1个阴性对照细胞瓶分别传至6孔板或其它适宜的细胞板中用于细胞病变观察(CPE).血吸附检查(HAd)及荧光抗体检测(IF),次日接种阳性对照病毒。(6)第14天时进行笫2次盲传。将第1次传代后的细胞培养物分别传至6孔板或其它适宜的细胞板中,进行细胞病变观察及HAd检查时,接种于每种指示细胞上的待测样本至少接种3孔;进行荧光抗体检测时,接种
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 制药 公司 病毒 检测 SOP
