完美（中国）- 美国罗格斯大学联合研究实验室2018年度总结报告.docx

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1、完美（中国）美国罗格斯大学联合研究实验室2018年度总结报告小结2018年是完美（中国）-美国罗格斯大学联合研究实验室第二期合作协议开始的第一个年度。通过双方的共同努力各项工作进展顺利。2018年的研究工作包括两方面内容，第一为开发前列腺保健产品的前期研究工作，第二方面为芦荟胶换代产品的抗炎作用研究。第一方面的研究工作主要为对前列腺保健产品的文献调研，查阅了参考文献了解前列腺慢性疾病包括慢性前列腺炎、前列腺肥大，前列腺癌等疾病在国内外的发病情况，病因和发病机理，目前的研究现状和研究进展。也查阅现有的资料及信息，了解目前中国和美国关于前列腺保健及慢性疾病预防方面的产品，以及目前前列腺保健产品市场

2、的相关信息，与完美公司研发人员沟通，对前列腺保健产品的功效成份开展实验研究工作。研究内容包括功效成份的抗炎作用，抗细胞增生作用，以及对前列腺癌细胞的抑制作用。研究结果发现了功效成份的抗炎及抗肿瘤作用，为公司前列腺保健产品的功效提供科学依据。第二方面的研究工作主要为测试完美上海研发部的芦荟胶产品，采用联合实验室建立的皮肤炎症模型对完美芦荟胶换代产品的抗炎作用及机理进行研究。实验研究包括运用体外炎症细胞（巨噬细胞RAW264.7）模型和体内小鼠皮肤炎症模型进行研究。研究发现了各种实验样晶的抗炎功效，并对抗炎作用的机理做了一些探索，为产品的功效提供科学实验依据。联合实验室负责人于4月份到完美公司，向

3、公司领导和研发部研究人员报告工作和介绍联合实验室的研究模型。颜建章总监5月份访问罗格斯大学和联合实验室，讨论研究工作的进展。完美公司顾问曾宪纲博士于7月份开始在联合实验室进行为期两年的访问学者工作，完美中山研发部的劳景辉研究员7-8月份到联合实验室参访，并在实验室进行了前列腺细胞实验。9-10月份完美上海研发部的王利利研究员到联合实验室参访，并在实验室进行了芦荟胶抗炎实验。通过访问学者的学习，推动在完美公司建立细胞实验室，促进行今后的研发工作。联合实验室负责人还于12月份到完美公司，向公司领导和研发部研究人员报告2018年度的实验研究工作和讨论2019年的实验研究需求。联合实验室2018年研究

4、项目第一部分开发前列腺保健产品的基础研究工作IT项目立项背景及前列腺健康技术信息调研前列腺是男性特有的性腺器官，它在男性健康中有着重要的生理功能。前列腺引起的疾病在男性健康中发病的频率高，其中前列腺引发的疾病最为常见的有前列腺炎、前列腺增生、前列腺癌。据统计，我国35岁的男性患前列腺炎高达31%4K;前列腺增生通常发生在40岁以后，到60岁时大于50%,80岁时高达83%前列腺癌在美国居男性恶性肿瘤之首，占男性死亡原因第二位，虽然中国前列腺癌远低于西方国家，但是我国前列腺癌的发病率也呈现逐年上升趋势。前列腺疾病在男性健康中越来越得到重视，人们也越来越重视其前列腺疾病的预防中来，因此，前列腺健康

5、市场潜力巨大。前列腺健康问题容易引起很多的健康隐患甚至慢性病，前列腺疾病引起的一系列的临床症状如尿频、尿急、尿痛，排尿困难、夜尿增多、血尿、会阴部触痛及胀痛等令人苦恼不安的症状，病情严重者可能会导致泌尿系统功能障碍，这些症状影响着前列腺疾病患者的健康、工作、生活质量。前列腺疾病在男性人群中涉及面广，而且从青年到老年人群中都有。随着前列腺健康越来越受到重视，相关的基础研究、技术手段不断出现，市场上也出现了一系列有关前列腺健康的的保健品，但是产品种类比较单一，产品创新不足。例如抗前列腺增生药物整体市场，目前仍以5-还原酶抑制剂和受体阻滞剂为主导，一直缺少新产品的成功推出。近几年市场格局都没有太大变

6、化，排名前几位的产品市场份额相对稳定，且市场集中度较高，仅坦洛新和非那雄胺两者即瓜分了85%以上的市场份额。前列腺保健品方面也缺少效果突出的成功产品。目前市场上常见的前列腺健康保健产晶如下表表1.常见前列腺健康保健产品产品成分功效适合人群NaturebountyProstateP1usHea1thComp1ex番茄红素、锯棕桐、南瓜籽油、硒、蔓越常、加强前列腺健康。男性保健。防前列腺癌。中老年人复方番茄红素番茄红素、亚麻籽油、蜂蜡、明胶、甘油、纯化水、胭脂红、柠檬黄、焦糖色、二氧化钛增强免疫力免疫力下降者GNC健安喜番茄红素番茄红素增强免疫、保护前列腺、增强男性精子活力、延缓衰老、保护心血管、

7、抗癌18岁以上男性和女性、心脏或血管问题人群、前列腺问题男性、工作压力大办公室白领、喜高脂食物人群汤臣倍健番茄红素维生素E软胶囊番茄红素油树脂、天然维生素E醋酸酯、蜂蜡、小麦胚芽油、明胶、纯化水、甘油、焦糖色、二氧化钛、诱惑红抗氧化增强前列腺健康中老年人康恩贝番茄红素维生素E软胶囊番茄红素、天然维生素E（Ga-生育酚）、大豆油、蜂蜡、明胶、甘油、纯化水、焦糖色增强免疫力，抗炎，男性保健免疫力低下者，中老年人普丽普莱番茄红素番茄红素促进前列腺、心脏健康，支持免疫系统中老年人前列腺健康保健产晶的主要功效原料包括：番茄红素（IyCoPene）,锯棕植I（SaWpa1metto）,南瓜籽，锌，硒，维生

8、素E以及一些其它天然植物提取物。经与完美公司研发人员沟通讨论，由完美中山研发部将需要检测效应的功效原料以及完美的前列腺保健品样品寄到联合实验室进行功效检测。1-2第一批样品实验研究内容完美中山研发部寄来联合实验室的第一批样品包括：姜黄提取物，植物密醇酯，番茄红素，天然番茄红素，南瓜籽油微囊粉，混合生育酚，破壁油菜花粉，前列腺样品1,前列腺样品2,前列腺样品3和前列腺样品4。第一批样品于今年6月份收到后进行了以下的实验研究。1-2A检测前列腺保健品功能成分及组方对炎症细胞RAW264.7中NO的作用NO是气态内源性生物信使分子，可以被很多细胞合成。No能够参与多种多样的生理生化过程。例如：血管扩

9、张，巨噬细胞介导的细胞毒性等。一氧化氮（No）也是在炎症反应过程中由被激活的炎性细胞大量产生的炎性介质。它由诱生型一氧化氮合酶（iN0s）催化合成（Ananthieta1.,2010）。在感染或者炎症状态下iNOS被高度激活，所产生的Ne）在微摩尔水平。因此，在各种炎症模型中Ne）可以用作判断炎症反应的指示剂。在研究中，我们使用GrieSS试剂（Sigma）法来测定各个待测物质对1PS诱导的RAW264.7细胞中NO影响作用。抑制NO可以降低炎症，因此检测各个待测物质对NO的抑制作用可以从一个侧面反映其抑制炎症的作用。在实验中，细胞调整细胞浓度为IX1（）6个m1,接种于24孔培养板内，每孔加

10、In11细胞悬浮液，置于37、5%C02培养箱内孵育；24h后细胞贴壁，设置空白对照组，实验组，每种样品浓度均有3孔重复，加1PS后置于37、5%C02培养箱内孵育；24h后，每孔取IOOU1上清液，然后每孔加入等体积100M1Griess试剂，轻轻摇动培养板混匀，置于室温孵育；IOmin后，在540nm波长处检测吸光光度值（OD值），重复2次。NO的浓度依据NaN02标准曲线进行计算。1-2B.检测前列腺保健品功能成分及组方对前列腺癌1NCaP细胞的作用前列腺癌1NCaP细胞是用于检测药物对前列腺癌抑制作用的常用体外细胞模型。通过检测药物或待测保健品功效成分对1NCaP细胞的作用，可以反映其

11、对前列腺癌的抑制作用，体外细胞实验的结果可以为体内的动物实验提供依据，为体内实验作准备。在研究中，我们检测了完美公司提供的各种功效成分和组方样晶对1NCaP细胞增生和凋亡的作用。细胞增生抑制实验采用台盼蓝拒染法进行检测，细胞凋亡实验采用propidiumiodide荧光染色形态学分析方法进行检测，在实验中，前列腺癌细胞以接种浓度0.2XIO,个m1的浓度接种于直径35mm培养皿，5%CO2,37培养过夜。加入溶解于DMSo中的各种功效成分和组方样品，72小时后，使用台盼蓝染色的方法测定不同浓度各样品对细胞生长和死亡的影响。具体方法为：使用胰酶消化贴壁生长的细胞，将细胞悬液801与0.4%的台盼

12、蓝201均匀混合，静置2分钟后，使用显微镜(NikOnoPtiPhot)观察和计数，视野下，光亮透明细胞计为活细胞，台盼蓝染为蓝色细胞计为死细胞。细胞凋亡检测具体方法为：1NCaP细胞以接种浓度0.2IO5个m1的浓度接种于直径35mm培养皿，5%CO2,37C培养过夜。加入溶解于DMSO中的各种功效成分和组方样品，72小时后，胰酶消化贴壁生长的细胞，悬浮液用CytoSPin离心机将细胞离心于玻片上制成细胞涂片，于室温下干燥之后用两酮/甲醇(1：1)固定10分钟，细胞涂片用ProPidiUmiOdide(1微克/毫升)染色15分钟，荧光显微镜下检测凋亡细胞。1-3第一批样品实验研究结果及分析1

13、-3A完美样品对炎症细胞RAW264.7中NO的作用本项实验中，完美第一批样品对NO的抑制作用采用GrieSS试剂法检测。小鼠巨噬细胞RAW264.7加入1PS进行刺激，用不同浓度的样品(10-80gm1)处理之后用Sigma公司的Griess试剂检测，实验结果显示，小鼠巨噬细胞RAW264.7加入1PS刺激后NO的产生增加。姜黄提取物对NO的抑制作用呈量效关系，在低浓度的时候对NO有一定的抑制作用，中低浓度的情况下对NO的产生有明显抑制作用，中高浓度(40-80gm1)的情况下，对NO的产生有很强的抑制作用(表2)o番茄红素对NO有中等程度的抑制作用，80gm1浓度下对NO的抑制作用大约为3

14、0-40%,中低浓度下作用较弱。其他功效成分抑制NO的作用都比较弱，抑制率在20%以内。4个完美前列腺组方样品对NO的抑制作用也比较弱，NO抑制率方面4个样品相差不大，80gm1浓度下对NO的抑制作用大约为20%左右。各浓度功效成分和组方样品对NO的抑制作用见表2。表2,完美第一批样品对巨噬细胞NO的抑制作用受试样品名称样品浓度No的百分含量模型(1PS)100.00100.00阴性对照组2.503.04姜黄提取物80ugm14.534.90姜黄提取物40ugm112.5512.63姜黄提取物20ugm160.8132.46姜黄提取物10ugm184.0579.94植物醇酯80ugm176.4

15、280.90植物缶醇酯40ugm180.4286.07植物笛醇酯20ugm179.7888.52植物留醇酯1OugZm193.9696.68番茄红素80ugm163.6366.51番茄红素40ugm188.2083.09番茄红素20ugm194.5485.38番茄红素10ugm178.1889.06天然番茄红素80ugm187.1490.39天然番茄红素40ugm1116.2495.02天然番茄红素20ugm196.6894.07天然番茄红素10ugm1111.76119.86南瓜籽油微囊粉80ugm188.1689.69南瓜籽油微囊粉40ugm194.9888.43南瓜籽油微囊粉20ugm195.4493.55南瓜籽油微囊粉10ugm199.0793.66混合生育酚80ugm190.0187.19混合生育酚40ugm191.5889.50混合生育酚20ugm196.32