精子顶体形态豌豆凝集素荧光标记PSAFITC染色试剂盒产品说明书中文版主要用途.docx
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1、精子顶体形态豌豆凝集素荧光标记(PSAFITC)染色试剂盒产品说明书(中文版)主要用途精子顶体形态豌豆凝集素荧光标记(PSA-F1TC)染色试剂是一种旨在使用荧光素标记的豌豆凝集素和赫斯特33258双重荧光染色技术,分析生理性反应性或病理性退行性顶体缺失的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物(例如猴、猪等)或人体精子细胞以及冻存精子细胞,包括睾丸中、附睾中以及射精后的精子细胞的顶体状态。产品严格无菌,即到即用,操作简便,性能稳定,荧光清晰。技术背景在男科学(AndroIOgy)中,精子(SPennaIOZOa)分析提供了精子生成(spermatogenesi
2、s)精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力(vita1ity)、运动能力(moti1ity)授精潜力(ferti1izingpotentia1膜结构或染色质结构完整性(integrity)顶体反应(acrosoma1reaction)功能的评价是精子分析的重要指标,也是决定人工受孕或体外授精(invitroferti1ization;IVF)的重要参数。其中顶体反应,是指当精子接近卵子实施授精时,精子头部前半端的帽状结构顶体,糅放出溶解随,以便精子和卵子的膜融合。顶体反应测试是一项稳定的精子功能参数,可以用于预测受精成功率。因此顶体的结构完整性(intact)是评价的主要标志,也是不
3、育症和避孕药物研究的对象。使用荧光素标记的无毒性的豌豆凝集素(Is。IhioCyanoHuoresceinatedisumsativumagg1utinin:PSA-FITC)和赫斯特33258(Hoechst33258)双重荧光染色技术,是精子顶体反应分析和授精效率评价的最常用的方法。首先使用赫斯特33258染色,分析精子活力,基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特点,受到活体精子细胞(包括游动性和非游动性精子)的排斥,而容易进入死亡精子细胞。其次使用荧光素标记的豌豆凝集素染料,与顶体基质(matrix)上糖蛋白顶体素原(proacrisin)上的半乳糖或甘露糖糖基(SaCChridere
4、SidUe)的反应,显示完整性(未反应性UnreaeIed)顶体。双染的作用,以帮助区分生理性反应性顶体缺失(1oss)或病理性退行性顶体缺失。通过常用的荧光显微镜(激发波长488nm,散发波长530nm)便可清晰观察到绿色顶体状态(Status)0产品内容保存液(Reagen1A)毫升染色液A(ReagentB)微升清理液(Reagen1C)毫升固着液(Reagen1D)毫升染色液B(Reagen1E)毫升产品说明书1份保存方式保存在一20冰箱里:染色液A和B(ReagentB和E)避免光照,有效保证6月用户自备15毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于样品染色操作的容器血细胞计
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