谷氨酸合成酶GlutamatesynthaseGOGAT试剂盒说明书微量法100管96样.docx
《谷氨酸合成酶GlutamatesynthaseGOGAT试剂盒说明书微量法100管96样.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《谷氨酸合成酶GlutamatesynthaseGOGAT试剂盒说明书微量法100管96样.docx(2页珍藏版)》请在第一文库网上搜索。
1、谷氨酸合成酶(Ghitamatesynthase,GOGAT)试剂盒说明书微量法100管/96样注意,正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定澜定意义:GoGAT广泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同构成GS/GOGAT循环,参与氨同化的调控。渊定原理:GoGAT催化谷翅酰胺的氨基转移到胡戊二酸,形成两分子的谷氨酸;同时NADH氧化生成NAD,34Onm吸光度的下降速率可以反映GOGAr活性大小。需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸储水。试剂组成和配制:提取液:液体IOom1X1瓶,4e保存:试剂一:液体
2、20m1x1瓶,4保存;试剂二:粉剂x2瓶,4C保存:粗液提取:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(IO4个):提取液体积(m1)为5001000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入Im1提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4C离心IOmin,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(m1)为1:570的比例(建议称取约0.1g组织,加入Im1提取液),进行冰浴匀浆。8000g4已离心IOmin,取上清,置冰上待测。渊定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 谷氨酸合成酶 Glutamatesynthase GOGAT 试剂盒 说明书 微量 100 96