血清钙Ca偶氮胂Ⅲ法测定.docx

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1、血清钙（Ca）俵氮肿I法测定1 .实验原理偶氮肿In比色终点法。钙与偶氮肿In在中性条件下形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。加入8-羟基嗟咻-5-磺酸掩蔽镁的干扰。2 .标本采集2. 1病人准备：无特殊要求。2.2类型：血清、肝素血浆或尿液。3 .标本存放：血清/血浆稳定性：2025C保存可稳定7天；48保存可稳定3周；-20保存可稳定8个月。尿液稳定性：2025C保存可稳定2天；48保存可稳定4天；-20保存可稳定3个月；对24h尿液标本加浓盐酸Iom1,并加热标本，使草酸钙溶解。4 .标本运输：室温条件下运输5 .标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6 .实验材料：6.1上海申能钙测

2、定试剂盒（货号：I111137170试剂：870m1）6.1.1试剂组成磷酸盐缓冲液pH7.550mmo118-羟基啜咻-5-磺酸5mmo11偶氮肿HI120mmo11表面活性剂适量6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28,若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：由于钙离子到处都有，必须严加注意采取避免污染。只使用一次性检测用品。微量螯合剂（如EDTA等）都会阻碍显色复合物的生成。须严加注意。试剂中含叠氮钠（0.95g1）为防腐剂。不可入口！避免接触皮

3、肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。1.2 校准品：使用DiaSyS公司提供的TrUCaI1J校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件1.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7 .仪器：奥林巴斯AUIOoO生化分析仪8 .操作步骤8 .1项目基本参数：参见AU1OOO生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见AU1OOO生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则

4、参见室内质控操作规程.SOP文件。11 .计算方法，以TruCa1U复合校准品钙校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以InnIo1/1报告。12 .参考值范围血清/血浆：2.152.57mmo11尿液女性：6.24mmo124h男性：7.49mmo124h（注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义：钙测量用于诊断和治疗副甲状腺病，某些骨病，慢性肾病和手足抽搐（间歇性肌肉收缩或痉挛）等。尽管体内超过99%的钙存在于骨骼和牙齿，临床上最关心血液里的钙。骨骼作

5、为一个储存器，通过释放钙防止低血钙和吸收钙防止血清钙水平过高，保持血清钙的相对稳定。饮食中钙的含量增加，吸收钙的百分比就减少，因此，吸收钙的数量能够保持相对稳定。在高钙饮食中钙吸收的轻微增加被反映在增加的肾排泄中。钙在许多细胞功能中起着重要作用，细胞内如肌肉收缩和糖原代谢，细胞外如骨钙化、凝血以及神经冲动传递。血浆钙有三种不同的形式：游离离子、和蛋白结合以及与阴离子（如磷酸根、柠檬酸根和碳酸氢根等）形成复合物。总钙水平的降低与多种疾病有关，如骨病（尤其是骨质疏松症），肾病（特别是透析患者），肠道吸收不良以及甲状腺功能减退。总钙水平升高为甲状旁腺机能亢进，转移性恶性肿瘤及肉瘤样恶性病变。在预防骨

6、质疏松进行钙的补充时，钙的检测有助于临床监控。14 .操作性能14. 1线性范围：0.01-6.25mmo11o14.2 精密度：重复性的评估是根据NeC1S推荐的标准方法，AU1OOO批内重复性小于3%,总不精密度小于映。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCC1S的规则。批内精密度n=20X(uno11)S(mmo11)CV(%)批间精密度n=20X(mmo11)S(mmo11)CV(%)样品12.190.020.26样品12.200.040.50样品23.120.040.30样品23.070.030.22样品33.490.060.43样品33.420.060.4814.3 方法学比较

7、：木公司的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x）,同时对70个样品进行Ca检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.02-0.005mmo11;r=0.999。14. 4灵敏度：本试剂的检测限为0.0InInIoI/1。14.5病人结果可报告范围0.016.25mmo11,如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。15 .超出范围结果处理：本法线性上限为6.25mmo11o如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。16 .病危报警值的处理当血清钙测定值3.5mmo11或16no11时，在经过复查

8、等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。17 .方法局限性17.1本法线性上限为6.25mmo11o如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1：1稀释，重新测定，结果乘以2。17 .2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mo11,胆红素浓度684mo11,血红蛋白浓度5.00g1,甘油三酯浓度22.6mmo11,镁浓度6.2mmo11时没有观察到干扰。18 .补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。19 .参考文献1. Thomas1.C1inica11aboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt：TH-BooksVer1agsges

9、e11schaft;1998.p.192-202.2. EndresDB,RudeRK.Minera1andbonemetabo1ism.Tn：BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofc1inica1chemistry.3rded.Phi1ade1phia：W.B.SaundersCompany；1999.p.1395-1457.3. Michay1ovaV,I1kovaP.Photometricdeterminationofmicroamountsofca1ciumwitharsenazoT11.Ana1ChimActa1971;53：194-8.4. BauerPJ.Affinityandstoichiometryofca1ciumbindingbyarsenazoIII.Ana1Biochem1981;110：61-72.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。