血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定作业指导书.docx
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1、血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定作业指导书1 .实验原理:国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。1-天门冬氨酸+a-酮戊二酸AST草酰乙酸+1-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H.M梁,I吁装果及+NAD+HQ2 .标本:2.1病人准备:12小时禁食。2.2类型:血清,肝素或EDTA血浆。3.标本存放:3天内的活性损失:28保存:8%;1525C保存:10%;标本稳定性:-20C保存至少可稳定3个月。4 .标本运输:常温条件下保存运输。5 .标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。6 .实验材料6.1试剂:甲能AST测定试剂盒(货号:141260171701试剂1:664m1
2、;试剂2:6X16m1)6.1.1试剂组成试剂1(R1):TriS缓冲液pH7.81-天门冬氨酸MDH(苹果酸脱氢酶)1DH(乳酸脱氢酶)试剂2(R2):a-酮戊二酸80mmo11240mmo112600U/1600U112mmo11NADH磷酸比哆醛试剂:Good,s缓冲液pH9.6磷酸毗哆醛0.18mmo110.7mmo110.09mmo116.1.2试剂准备:试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存试剂保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂己变质,不能继续使用。6.1.5注意事项:试剂
3、中含叠氮钠(0.95g1)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2校准品:使用DiaSyS公司提供的TruCa1U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6 .3质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7 .仪器:奥林巴斯AU1OOO生化分析仪8 .操作步骤8 .1项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AUIOoO生化分析仪项目测定参数.SOP文件9 .2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AUIOOO生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与质控做为
4、未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11 .计算方法:以TrUCaIU复合校准品AST校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测,可以直接使用A/min均值乘以计算因子得到结果,但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算A1T活力的计算因子见下表:AA/minX因子=AST活力U/1底物起始的反应(37C)样品起始的反应(37)340nm21431745334nm21841780365nm3971323512.参考值范围141不含磷酸毗哆醛含磷酸
5、毗哆醛女性31U11035U1男性37U11050U1参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义【2】丙氨酸氨基转移酶(A1T)旧称谷丙转氨酶(GPT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)IH称谷草转氨酶(GOT)o它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给a-酮酸的反应。A1T是肝脏的特异性酶,仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤,以及肝组织损害等都有关。因此同时进行A1T和AST的检测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/A1T比率可用于肝病的鉴别诊断。比率1预示中度的肝损伤
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