细胞膜流动性fluidityPDA荧光检测试剂盒产品说明书中文版主要用途.docx
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1、细胞膜流动性(f1uidity)PDA荧光检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途细胞膜流动性(f1uidity)PDA荧光检测试剂是一种旨在通过苯并在癸酸荧光染料,选择性地与细胞膜整合,并与之产生空间交互作用,形成激基缔合物,其荧光散发波长的转移,即荧光比值的增强或减弱,来分析膜流动性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体或动物贴壁或悬浮细胞膜流动性的动力学检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,操作简易,性能稳定。技术背景细胞膜和细胞质微管以及微丝的动力学特征和微泡和囊泡内脂质的流动动力学,即流变学(rheo1ogica1)细胞功能,受到细胞膜流动性(f
2、1uidity)或粘性(Visssity)调节,包括细胞膜酶系的活化,微管和微丝的特定装配或流动,化学引诱物受体亲和力的强化,膜结构和功能的作用等。一旦调节失衡,会导致病理演变或膜性变异。苯并花癸酸(PyrenedeCanOiCaCid:PDA)为多环芳香IS(po1ycyc1icaromatichydrocarbon)化合物,一种亲脂性苯并花荧光探针染料,用于膜生物物理学研究:第一,具有亲脂性;第二,与细胞膜脂质具有类似性(ana1og),可以与细胞膜整合;第三,进入膜结构空间后,与之产生交互作用,形成激基缔合物(eximer),其荧光散发波长山372nm转移到470nm,通过缔合物和单体的
3、荧光比值(ratio),分析膜流动性强弱,包括动力学,影响因子等。产品内容染色液(Reagen1A)微升稀糅液(Reagen1B)毫升清理液(Reagen1C)毫升强化液(Reagen1D)微升产品说明书1份保存方式保存清理液(ReagentC)在4冰箱里,其余的保存在一20冰箱里;染色液(Reagen1A)避免光照;有效保证6月用户自备胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(GMS12024):用于细胞脱离操作完全细胞培养液(GMS12052):用于细胞脱落操作1.5毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于样品操作培养箱:用于染色孵育(共聚焦)荧光显微镜:用于荧光定性分析比色皿或黑色96孔板:
4、用于荧光定量分析的容器荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于荧光定量分析细胞流式仪:用于荧光分析实验步骤实验开始前,将一20冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentA)置.入冰槽里融化,稀释液(Reagentin和强化液(ReagentD)放进25恒温水槽里预热。然后分别移出xx微升染色液(ReagentA)和xx微升强化液(ReagentD)到新的1.5毫升离心管,加入980微升稀释液(ReagentR),混匀后,在冰槽里静置(共5次操作量),并标记为染色工作液,放在喑室里。然后进行下列操作。一、直接法1 .准备1个96孔细胞培养板的待测细胞,每孔铺满率达70%(约1XIO,细胞数)2 .小心抽去
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