河医大生药学实验指导02生药的理化鉴定二.docx

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1、实验二生药的理化鉴定（二）一、实验目的（一）掌握生药中黄酮昔类、皂苔类、强心昔类、香豆精昔类的理化性质和定性反应，并能应用于生药鉴定中。（二）掌握生药中生物碱类、糅质类、氨基酸与蛋白质类的理化性质和定性鉴别反应。（三）学会应用荧光分析法、薄层层析法，水份测定法鉴别生药。二、实验材料、仪器及试剂槐米、桔梗、穿山龙、地高辛片（tabe11aedigoxin）s白芷、粉防己、硫酸阿托品注射液、五倍子、槟榔、天花粉。试管、试管架、量筒、烧杯、水浴锅、50m1三角烧瓶、滤纸、蒸发皿、紫外分析灯、硅胶板、层析瓶。乙醇、1%盐酸、碘化锄钾试剂、碘化钾碘试剂、碘化汞钾试剂、硅铝酸、明胶氯化钠溶液、三氯化铁试剂

2、、饱和漠水、醋酸铅试剂、饱和石灰水、苗三酮试剂、10%氢氧化钠溶液、0.5%硫酸铜试剂、镁粉、1%三氯化铝甲醇液、10%盐酸试液、0.9%氯化钠溶渡，2%红细胞悬浮液、醋酢、浓硫酸、冰醋酸、三氯化铁-冰醋酸试剂、K-K试剂、3,5-二硝基苯甲酸乙醇试液、乙醍、7%盐酸羟胺甲醇溶液、20%氢氧化钾甲醇溶液、稀盐酸、1%三氯化铁乙醇溶液、甲苯、醋酸乙酯、甲酸。槐花乙醇提取液、远志生理盐水提取液、夹竹桃醇提取液、粉防己酸性乙醇液；核桃楸皮、秦皮和秦皮甲素乙醇提取液。三、实验内容与方法1、黄酮苔的鉴别取槐米粗粉约0.5g,加乙醇IOmI,水浴温热5分钟，滤过，得滤液。(1)盐酸-镁粉还原反应：取上述滤

3、液2m1于大试管中，加镁粉少许振摇，滴加浓盐酸数滴，观察到产生许多泡沫，同时溶液渐变樱红色。(2)三氯化铝反应：取上述滤液2m1于试管中，加1%三氯化铝甲醇溶液Im1,振摇，可见溶液渐变鲜黄色。2、皂昔的鉴别取桔梗与穿山龙粗粉各Ig,分别置50m1三角烧瓶中，加水IOmI,煮沸2分钟，滤过，滤液加水至IOmI,备用。(1)泡沫试验：分别取上述滤液各2m1,置2个试管中，密塞或以手指压住管口，强烈振摇数分钟，观察是否产生大量泡沫，放置10分钟后，再记录泡沫的高度。另取桔梗与穿山龙滤液各4m1,分置4支试管中，每支2m1滤液其中一支桔梗与一支穿山龙滤液中分别加10%盐酸试液调节PH为I,另一支桔梗

4、与另一支穿山龙滤液中分别加10%氢氧化钠试液调节PH为13,将酸碱两管滤液同时强烈振摇数分钟，观察泡沫高度。可见桔梗溶液的酸碱两管泡沫高度相同。而穿山龙碱液管的泡沫比酸液管高。(2)溶血试验：取远志生理盐水提取液2m1置一试管中，另取一试管加0.9%NaC1溶液2m1,于二支试管中分别加2%红细胞球悬浮液Im1,摇匀后放置，注意观察哪支试管溶液变清。3、强心昔的鉴别分别取新鲜夹竹桃叶1片剪碎与地高辛3片，各置50m1三角烧瓶中，加70%乙醇IOmI,用空气冷凝装置水浴加热5分钟，滤过，得滤液，并加水至IOmI,备用。(1)-去氧糖反应(KHIer-KiIiani反应)：取夹竹桃滤液2m1于蒸发

5、皿中.水浴蒸干，加三氯化铁-冰醋酸试液Im1使残渣溶解，并转入小试管中，沿管壁缓缓滴加浓硫酸Im1,观察两液层交界处有无棕色环产生，上层醋酸液呈何颜色?另取地高辛滤液2m1,同样操作，观察结果。(2)3,5-二硝基苯甲酸反应(Kadde反应)，取滤液Im1于试管中滤液中加新配制的3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液ImI,观察溶液是否变成紫色。反应原理(C17上不饱和内酯环反应)4、生物碱的鉴别取粉防己粗粉0.5g,置50m1三角烧瓶中，加乙醇15m1用空气冷凝装置、水浴回流10分钟，滤过。滤液置蒸发皿中，于水浴蒸干，残渣加1%盐酸5m1使溶，滤过，滤液分置4支小试管中，每试管Im1,分别滴加下表中生

6、物碱沉淀剂各2滴,观察沉淀的颜色与数量（以+、+、+表示）。同时取4支去硫酸阿托品注射液，启封后按下表滴加生物碱沉淀剂，并记录反应结果。沉B沉C剂J色-C产N茎店j-金A碘化秘钾碘化钾碘碘化汞钾硅鸨酸粉防己提取液硫酸阿托品注射液5、荧光分析法：取秦皮，核桃核桃楸皮粉末各Ig,放入三角烧瓶中，分别加入乙醇IOmI,水浴回流提取IO分钟，放冷过滤。滤液作供试品。另取秦皮甲素（七叶树苗），加乙醇制成每Im1含5mg的标准液做对照品。将三者分别点于滤纸上，置365nm紫外分析灯下观察荧光反应。6、薄层层析法：（两人做一份）样品、标准品的制备：同荧光分析法。制板取硅胶G2克加入0.5%竣甲基纤维素钠的水

7、溶液6m1,搅拌均匀，倒在6cmX22cm干净的玻璃板上铺匀，放置水平位置，自然干燥，干后于105。C活化一小时，活化后置干燥器中备用。展开剂：甲苯：醋酸乙酯：甲酸：乙醇=3:4:1:2点样：距玻璃板下端一厘米处，分别点上秦皮、核桃楸皮的提取液及秦皮甲素的标准液。展开方式：倾斜上行法。展距约15cm。晾干后，置365nm紫外分析灯下观察荧光斑点并描绘出层析图谱，计算秦皮甲素的Rf值。7、水分测定法（甲苯法）当归约50go水分测定装置一套，如图6.【实验内容、方法及步骤】1甲苯的制备取甲苯约25Om1,加少量蒸储水振摇，放置后弃水层.再蒸储甲苯后备用。2、测定取经粉碎的当归粗颗粒约20g,精密称

8、定（准确至0.01g）,置A瓶中，加甲苯约20m11如图连接，再从冷凝管顶部加甲苯充满B的狭窄部分,将A置可调温电热套中加热至苯沸腾调节温度使2滴/秒至B管的水量不再增加，将冷凝管内部用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷把管壁上的甲苯推下，继续蒸僧5分钟，放冷至室温，待水分与甲苯完全分离，检读水量，并换算成当归中含有水分的百分数。生药中的水分含量%=【水分量m1)样品量g)100%四、实验报告1、记录有关鉴别反应、化学定性、荧光分析与微量升华的实验结果。2、绘出秦皮、核桃楸皮的薄层分析图谱并计算出秦皮甲素的Rf值。3、计算出当归的水分含量。五、思考题1、某生药的乙醇提取液与盐酸-镁粉反应不显红色，则能否否定其存在黄酮类成分？2、试述K-K反应的原理。3、生药中含水量与生药品质有何关系？