拆分蛋白质多聚体为单体的试验方法.docx
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1、拆分蛋白质多聚体为单体的试验方法以前回答网友提问时写的。拆分蛋白质多聚体为单体的试验方法可以参考亲和层析的试验方法:1.转变川值或离子强度:比如可以使用NaCl梯度拆解,主要是用于静电作用引起的相互作用的蛋白质多聚体,转变pH值可以跟缓冲溶液的组成加入相应的酸或者碱;2.假如蛋白质多聚体主要为疏水相互作用,而且转变pH值的结果不够有效,则需要用激烈的条件,比如加入聚乙二醇(最多到到60%,要分梯度加入)或二甲基亚飒(dimethylsulfoxide)(一般最多到到10%,要分梯度加入)以降低水溶液的极性3.可以考虑加入加入去垢剂(表面活性剂),它们是具有亲水基又具有疏水基的物质,能够在低于临
2、界胶束浓度(Citical Micelle Concentration ,简称:CMC)时有效结合于蛋白质的疏水区域,因此一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取钟应用的较多。“一般考虑使用的是:中性去垢剂或生物表面活性剂。中性去垢剂乂称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用。一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200;多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类;聚氧乙烯脂肪醇酸,如苇泽类、平平加类;聚氧乙烯烷基苯酚醛,如TgepalC0、乳化剂OP、Triton. Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、
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