使蛋白质沉淀的方法.docx

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使蛋白质沉淀的方法一、概念：蛋白质从溶液中析出的现象称为沉淀。二、常用的方法：1、盐析：在蛋白质溶液中若加大量中性盐，蛋白质胶粒的水化层即被破坏，其所带电荷也被中和，蛋白质胶粒因失去这两种稳定因素而沉淀。此种沉淀过程称为盐析。常用的中性盐有硫酸铁、硫酸钠和氯化钠等。盐析沉淀的蛋白质不发生变性是其优点，缺点是沉淀的蛋白质中混有大量中性盐，必须经透析除去。2、重金属盐沉淀蛋白质：重金属离子如Ag十、Hg2+、Cu2十、Pb2十等，可与蛋白质的负离子结合，形成不溶性蛋白质沉淀。沉淀的条件为PH稍大于蛋白质的P1为宜。3、生物碱试剂与某些酸沉淀蛋白质：生物碱试剂如苦味酸、鞍酸、铝酸等以及某些酸，如三氯醋酸、磺酸水杨酸、硝酸等，可与蛋白质的正离子结合成不溶性的盐沉淀。沉淀的条件是PHPI.4）有机溶剂沉淀蛋白质：可与水混合的有机溶剂医学I教育网I整理，如酒精、甲醇、丙酮等能与蛋白质争水，破坏蛋白质胶粒的水化膜，使蛋白质沉淀析出。在常温下，有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。