兽药残留检测技术及标准知识汇总.docx
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1、兽药残留检测技术及标准知识汇总兽药残留分析是复杂混合物中痕量组分的分析技术,既需要精细的微量操作手段,又需要高灵敏的痕量检测技术,难度大、仪器化程度和分析成本高,分析质量控制和分析策略有特殊要求。现对兽药残留分析中的标准和检测方法作简要介绍。检测技术有许多高灵敏、通用性或专一性强的检测器供选用,如氢焰离子化检测器(FID)、氮磷检测器(NPD)等。但是大多数兽药极性或沸点偏高,需繁琐的衍生化步骤,限制了气相色谱法(Ge)的应用。所以,20世纪80年代后HP1C的发展速度超过GC,相当数量的兽药采用或改用HP1C进行分析,如氯霉索、磺胺类等。1、标记免疫分析技术常见标记免疫分析技术及其应用有哪些
2、:(1)放射免疫分析放射免疫分析(Radioimmunoassay,R1A)是最早建立的标记免疫检测方法。1968年,CentenO等首次将RIA用于DDT和马拉硫磷的检测,其后该技术在对硫磷、克百威、百草枯、氯霉素、青霉素等农兽药残留检测中得到了广泛应用。(2)酶免疫分析酶免疫分析(Enzymeimmunoassay,EIA)是在抗原或抗体分子上标记特定的酶,依据抗原抗体反应的特异性和酶催化显色反应的高效性对超微量残留物进行检测。酶联免疫吸附分析法(Enzyme.1inkedImmunosorbentAssay,E1ISA)是目前最常用的酶免疫分析方法。E1ISA法是一种非均相免疫测定方法,
3、即抗原、抗体反应在固液相间进行,反应平衡后需要进行两相分离,在实际应用中检测农兽药等小分子物质常采用间接竞争E1ISA法和包被抗体(或抗原)直接竞争E1ISA法。迄今为止,已建立了有机磷、拟除虫菊酯、三嗪类、磺胺类及氟喳诺酮类等农兽药的单残留和多残留E1ISA检测方法。(3)荧光免疫分析荧光免疫分析(F1uorescentimmunoassay,FIA)的种类很多:例如,时间分辨荧光免疫分析(Timereso1vedf1uoroimmunoassay,TRFIA);荧光偏振免疫分析(F1uorescencepo1arizafionImmunoassay,FPIA);荧光猝灭免疫分析(F1uor
4、escencequenchingimmunoassay,FQIA);荧光增强免疫分析(F1uorescenceenhancedimmunoassay,FEIA)等,它们以荧光物质为标记物,基于免疫反应对待测物进行检测。在残留分析方面,TrFIA的研究目前仅局限于敌草隆、甲草胺、沙丁胺醇等少数农兽药。(4)化学发光免疫分析发光物质主要有物理、化学和生物发光三类。在小分子残留检测中,化学发光免疫分析(Chemi1uminescenceimmunoassay,C1IA)的应用最广泛。C1IA以发光物质或酶标记抗原或抗体,标记抗原和抗体与待测物反应后经分离、洗涤等步骤,加入氧化剂或酶底物而发光,通过测
5、量最后的化学发光强度,利用标准曲线测定待测物的含量。目前国内外已建立了甲基对硫磷、涕灭威、克百威、氯氟菊酯、氯霉素、链霉素、盐酸克伦特罗等农兽药方法。(5)胶体金标记免疫分析胶体金标记免疫分析技术(Co11oida1go1dimmunoassay,CG1A)采用纳米金颗粒来标记抗体,当金标抗体聚集到一定密度时,出现肉眼可以观察紫红色,实现对抗原和抗体反应结果进行测定。实际应用中一般通过制备抗农药或兽药的单克隆抗体,将其做成胶体金免疫层析测试条,直接检测样品中的农药或兽药残留。2、其他免疫分析技术(1)以量子点为探针的免疫分析导体量子点纳米晶(Semiconductorquantumdotsna
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