霉菌和酵母计数检验原始记录平板计数法.docx

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1、霉菌和酵母计数检验原始记录（平板计数法）检验单位检验员检验日期至环境条件温度,相对湿度%检验依据GB4789.15-2016食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数样品名称产品批号仪器设备及耗材：电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、移液器培养基及试剂：孟加拉红琼脂：m1配制日期：生理盐水：m1配制日期：实验过程：1 .样品稀释：1.2制备样品稀释液根据样品状态，无菌操作，称取25g吸取25m1样品，加入到225m1无菌生理盐水中均质（或混匀），制成1:10样品匀液。用Im1无菌吸管或微量移液器吸取1：IO样品匀液Im1,沿管壁缓慢注于盛有9m1稀释液的无菌试

2、管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成11Oo的样品匀液。按上面步骤操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次Im1无菌吸管或吸头。2 .接种选择适宜23稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），吸取Irn1于无菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取1In1无菌稀释液加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时用20m125m1冷却至46C的孟加拉红琼脂倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。同时再以只加平板计数琼脂培养基的平皿同步培养，作为PCA的空白对照。待琼脂凝固。3 .培养将以上平板正置于281C,培养5天（/_/时/_/时）并计数。4 .菌落计数

3、4.1 可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位（COIOnyformingUnit,CFU）表示。4.2 选取菌落数在IoCFU150CFU之间，霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为菌落菱延。结果1 .计算同一稀释度的两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数。2 .若有两个稀释度平板上菌落数均在10CFU-150CFU之间，则按照GB4739.2的相应规定进行计算。3 .若所有平板上菌落数均大于150CFU,则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。4 .若所有平板上菌落数均小于

4、IOCFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。5 .若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。6 .若所有稀释度的平板菌落数均不在10CFU-150CFU之间，其中一部分小于IOCFU或大于150CFU时，则以最接近10CFU或150CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。样品序号霉菌各稀释度平板上的菌落数结果CFUm1CFUg第一稀释度：第二稀释度：第三稀释度：样品1样品2样品3样品4样品5样品序号酵母各稀释度TF板上的菌落数结果CFUm1CFUg第一稀释度：第二稀释度：第三稀释度：样品1样品2样品3样品4样品5空白稀释NHPCAPCA空白（仅PCA）结果1 .菌落数按“四舍五入”原则修约。菌落数在10以内时，采用一位有效数字报告；菌落数在10T00之间时，采用两位有效数字报告。2 .菌落数大于或等于100时，前第3位数字采用“四舍五人”原则修约后，取前2位数字，后面用。代替位数来表示结果；也可用10的指数形式来表示，此时也按“四舍五入”原则修约，采用两位有救数字。3 .若空白对照平板上有菌落出现，则此次检测结果无效。4 .称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/m1为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或酵母数。报告人报告日期复核人复核日期