食品中糖精钠的测定方法.docx

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1、食品中糖精钠的测定方法1主题内容与适用范围本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。本标准适用于食品中糖精钠的测定。最低检出量：高效液相色谱法取样量为10g，进样量为IOU1时，最低检出量为1.5ng0第一篇高效液相色谱法（第一法）2原理样品加温除去二氧化碳和乙醇，调PH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。取样量为10g,进样量为IOU1时最低检出量为1.5ng03试剂3.1 甲醇：经滤膜（0.5m）过滤。3.2 氨水（1+1）：氨水加等体积水混合。3.3 乙酸铉溶液（0.02mo11）：称取154g乙酸铁，加水至IoOOm1溶解，经滤膜（0.45

2、Pm）过滤。3.4 糖精钠标准储备溶液：准确称取0.0851g经120C烘干4h后的糖精钠（C6H4C0NNaS022H20）,加水溶解定容至100.Om10糖精钠含量1onIgm1,作为储备溶液。3.5 糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储备液10.On11放入IOOm1容量瓶中，加水至刻度。经滤膜（0.45m）过滤。该溶液每亳升相当于0.1Omg的糖精钠。4仪器高效液相色谱仪，紫外检测器。5分析步骤5.1 样品处理5.1.1 汽水：称取5.0010.00g,放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调PH约7。加水定容至适当的体积，经滤膜（0.45m）过滤。5.1.2 果汁类：称

3、取5.0010.00g,用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45m）过滤。5.1.3 配制酒类：称取10.0g,放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至20m1,经滤膜（0.45m）过滤。5.2 高效液相色谱参考条件5. 2.1色谱柱：YwG-CI84.6mmX250mm10um不锈钢柱。6. 2.2流动相：甲醇：乙酸铉溶液（0.02mo11）（5+95）7. 2.3流速：1m1min5. 2.4检测器：紫外检测器，波长230nm,灵敏度0.2AUFS。5.3 测定取样品处理液和标准使用液各101（或相同体积）注入高效液相色

4、谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据进行定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。5.4 计算式中：X1样品中糖精钠含量，g/kg：m1进样体积中糖精钠的质量，mg：V2进样体积，m1；V1一一样品稀释液总体积，m1；m2样品质量，go结果的表述：报告算术平均值的三位小数。5.5 允许差相对相差W10%。5.6 其他应用5.2的高效液相分离条件可以同时测定苯甲酸、山梨酸和糖精钠，色谱图如下：(图略)第二篇薄层色谱法(第二法)6原理在酸性条件下，食品中的糖精钠用乙醛提取、浓缩、薄层色谱分离、显色后与标准比较，进行定性和半定量测定。7试剂1.1 乙酸：不含过氧化物。1.2 无水硫酸

5、钠。1.3 无水乙醉及乙醉(95%)。1.4 聚酰胺粉：200目。1.5 盐酸(1+1)：取IOOm1盐酸,加水稀释至200m1。1.6 展开剂1.7 6.1正丁静+氨水+无水乙醉(7+1+2)。1.8 6.2异丙醇+氨水+无水乙醉(7+1+2)。1.9 显色剂嗅甲酚紫溶液(0.4g1):称取0.04g溪甲酚紫，用乙醇(50%)溶解，加氢氧化钠溶液(4g1)11m1调节PH为8,定容至10定容7 .8硫酸铜溶液(IOOg/1)：称取IOg硫酸铜(CuSO451120),用水溶解并稀释至IOOm1o8 .9氢氧化钠溶液(40g1)7. 10糖精钠标准溶液：准确称取0.0851g经120干燥4h后

6、的糖精钠，加乙醇溶解，移入IOOm1容量瓶中，加乙醇(95%)稀释至刻度。此溶液每身升相当于Img糖精钠(C6W1C0NNaS0221120)。8仪器7.1 玻璃纸：生物制品透析袋纸或不含增白剂的市售玻璃纸。7.2 玻璃喷雾器。7.3 微量注射器。7.4 紫外光灯：波长253.7nm.8. 5薄层板：IOC1nX20CIn或20CmX20cm。8.6展开槽。9分析步骤9.1 样品提取9.1.1饮料、冰根、汽水：取10.0In1均匀试样(如样品中含有二氧化碳，先加热除去。如样品中含有酒精，加4%氢氧化钠溶液使其呈碱性，在沸水浴中加热除去)置于IOOm1分液漏斗中，加2m1盐酸(1+1),用30,

7、20,2Om1乙醛提取三次，合并乙醛提取液，用5m1盐酸酸化的水洗涤一次，弃去水层。乙醛层通过无水硫酸钠脱水后，挥发乙醛，加2.Om1乙醇溶解残留物，密塞保存，备用。9. 1.2酱油、果汁、果酱等：称取20.Og或吸取20.Om1均匀试样，置于Ioom1容量瓶中，加水至约60m1,加20m1硫酸铜溶液(Ioog/1),混匀，再加4.4m1氢氧化钠溶液(40g1),加水至刻度，混匀，静置30min,过滤，取50m1滤液置于15Om1分液漏斗中，以下按9.1.1自“加2m1盐酸(1+1)”起依法操作。9. 1.3固体果汁粉等：称取20.Og磨碎的均匀试样，置于20Om1容量瓶中，加IoOm1水，加

8、温使溶解、放冷。以下按9.1.2自“加20m1硫酸铜溶液(IOOg/1)”起依法操作。10. .4糕点、饼干等蛋白、脂肪、淀粉多的食品：称取25.0g均匀试样，置于透析用玻璃纸中，放入大小适当的烧杯内，加50m1氢氧化钠溶液(0.8g1),调成糊状，将玻璃纸口扎紧，放入盛有20Om1氢氧化钠溶液(0.8g1)的烧杯中，盖上表面皿，透析过夜。量取125m1透析液(相当12.5g样品)，加约0.4m1盐酸(1+1)使成中性,加20m1硫酸铜溶液(IOOg/1),混匀，再加4.4m1氢氧化钠溶液(40g1),混匀,静置30min,过滤。取120m1(相当取g样品),置于25Om1分液漏斗中，以下按9

9、.1.1自“加2m1盐酸(1+1)”起依法操作。9.2 薄层板的制备称取16g聚酰胺粉,加0.4g可溶性淀粉,加约7.Om1水,研磨35min,立即涂成0.250.30nun厚的IOCmX20Cm的薄层板，室温干燥后，在80C下干燥1h。置于干燥器中保存。9.3 点样在薄层板卜.端2cm处，用微量注射器点IoU1和20U1的样液二个点，同时点3.0,5.0,7.0,10.Ou1糖精钠标准溶液，各点间距15cm。9.4 展开与显色将点好的薄层板放入盛有展开剂(7.6.1或7.6.2)的展开槽中，展开剂液层约0.5cm,并预先已达到饱和状态。展开至IOCn1,取出薄层板，挥干，喷显色剂，斑点显黄色

10、，根据样品点和标准点的比移值进行定性，根据斑点颜色深浅进行半定量测定。9.5 计算式中：X2样品中糖精钠的含量，g/kg或g/1；m3测定用样液中糖精钠的质量，mg；m4样品质量(体积)，g(m1)；V3样品提取液残留物加入乙醇的体积，m1；V4点板液体积，m10第三篇离子选择电极测定方法(第三法)10原理糖精选择电极是以季钱盐所制PVC薄膜为感应膜的电极，它和作为参比电极的饱和甘汞电极配合使用以测定食品中糖精钠的含量。当测定温度、溶液总离子强度和溶液接界电位条件一致时，测得的电位遵守能斯特方程式，电位差随溶液中糖精离子的活度(或浓度)改变而变化。被测溶液中糖精钠含量在0021mgm1范围内。

11、电极值与糖精离子浓度的负对数成直线关系。H试剂11. 1乙醛：使用前用盐酸(6mo11)饱和。12. 2无水硫酸钠。11.3 盐酸(6mo11):取IoOnI1盐酸，加水稀释至200m1,使用前以乙酰饱和。11.4 氢氧化钠溶液(0.06mo11):取2.4g氢氧化钠加水溶解并稀释至IOOOm1011.5 硫酸铜溶液(IOOg/1)：称取硫酸铜(CUSO45H20)IOg溶于Ioom1水中。11.6 氢氧化钠溶液(40g1)11.7 氢氧化钠溶液(0.02mo11):将11.4稀释而成。11.8 磷酸二氢钠c(NaH2P042H20)=1mo11溶液：取78g磷酸二氢钠(NaH2P042H20

12、)溶解后于50Om1容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。11.9 磷酸氢二钠c(Na2HP0412H20)=1mo11：取89.5g磷酸氢二钠(Na2HP04121120)于250m1容量瓶中溶解后，加水稀释至刻度，摇匀。11.10 总离子强度调节缓冲液：87.7In1磷酸二氢钠溶液(ImO1/1)与12.3m1磷酸氢二钠溶液(ImO1/1)混合即得。11.11 糖精钠标准溶液：准确称取0.085Ig经12(C干燥4h后的糖精钠结晶移入IOOm1容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。此溶液每毫升相当于1Omg糖精钠(C6H4CONNaSO22H20)o12仪器12.1 精密级酸度计或离子活度计或其他

13、精密级电位计，准确到1mV.12.2 糖精选择电极。12.3 217型甘汞电极：具双盐桥式甘汞电极，下面的盐桥内装入含1%琼脂的氯化钾溶液(3Ino1/1)。12.4 磁力搅拌器。12.5 透析用玻璃纸。12.6 半对数纸。13分析步骤13.1 样品提取13.1.1 液体样品：浓缩果汁、饮料、汽水、汽酒、配制酒等。准确吸取25m1均匀试样(汽水、汽酒等需先除去二氧化碳后取样)，置于25Om1分液漏斗中，加2m1盐酸(6mo11),用20,20,1Om1乙醛提取三次，合并乙酸提取液，用5m1经盐酸酸化的水洗涤一次，弃去水层，乙酸层转移至50m1容量瓶，用少量乙酸洗涤原分液漏斗合并入容量瓶，并用乙

14、醯定容至刻度，必要时加入少许无水硫酸钠，摇匀，脱水备用。13.1.2 含蛋白质、脂肪、淀粉量高的食品：糕点、饼干、耨菜、豆制品、油炸食品，称取20.0Og切碎样品，置透析用玻璃纸中，加50In1氢氧化钠溶液(0.02mo1),调匀后将玻璃纸口扎紧，放入盛有200In1氢氧化钠溶液(0.02mo11)的烧杯中，盖上表面皿，透析24h,并不时搅动浸泡液。量取125m1透析液，加约0.4In1盐酸(6mo11)使成中性,加20m1硫酸铜溶液混匀，再加4.4m1氢氧化钠溶液(40g1),混匀。静置30min,过滤。取IOOm1滤液于250m1分液漏斗中，以下按13.1.1自“加2m1盐酸(6mo11)

15、”起依法操作。13.1.3 1.3蜜饯类:称取10.0Og切碎的均匀样品,置透析用玻璃纸中,加50m1氢氧化钠溶液(0.06mo11),调匀后将玻璃纸扎紧，放入盛有20Om1氢氧化钠溶液(0.06mo11)的烧杯中，透析、沉淀、提取按13.1.2操作。13.1.4 糯米制食品：称取25.OOg切成米粒状的小块均匀样品，按13.12操作。13.2 测定13.3 2.1标准曲线的绘制:准确吸取0,0.5,1.0,2.5,5.0,10.Om1糖精钠标准溶液(相当于0,0.5,1.0,2.5,5.0,10.Omg糖精钠)，分别置于50m1容量瓶中，各加5m1总离子强度调节缓冲液，加水至刻度，摇匀。将糖精选择电极和廿汞电极分别与测量仪器的负端和正端相连接，将电极插入盛有水的烧杯中，按其仪器的使用说明书调节至使用状态，在搅拌卜.用水洗至电极起始电位(例如某些电极起始电位达一32OmV)O取出电极用滤纸吸干。将上述标准系列溶液按低浓度到高浓度逐个测定，得其在搅拌时的平衡电位值(一mV).在半对数纸上以亳升(亮克)为纵坐标；电位值(一InV)为横坐标绘制标准曲线。13.2.2样品的测定：准确吸取20