乳酸菌检验原始记录.docx
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1、乳酸菌检验原始记录(平板计数法)检验单位检验员检验日期至环境条件温度,相对湿度%检验依据GB4789.35-2016食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验样品名称产品批号仪器设备及耗材:电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、移液器、厌氧罐培养基及试剂:MC培养基:m1配制日期:MRS培养基:m1配制日期:莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良MRS培养基:m1配制日期:生理盐水:m1配制日期:实验过程:1样品制备1.2制备样品稀释液根据样品状态,无菌操作,称取25g吸取25m1样品,加入到225m1无菌生理盐水中均质(或混匀),制成1:10样品匀液。用Im1无菌吸管或
2、微量移液器吸取1:IO样品匀液Im1,沿管壁缓慢注于盛有9m1稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。按上面步骤操作,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次Im1无菌吸管或吸头。2.乳酸菌计数乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明样品中所包括乳酸菌菌属培养条件的选择及结果说明仅包括双歧杆菌属按GB4789.34的规定执行仅包括乳杆菌属按照2.3操作。结果即为乳杆菌属总数仅包括嗜热链球菌按照2.2操作。结果即为嗜热链球菌属总数同时包括双歧杆菌属和乳杆菌属1按照2.3操作。结果即为乳酸菌总数2
3、如需单独计数双歧杆菌属数目,按照操作同时包括双歧杆菌属和嗜热链球菌1按照2.1和2.2操作,二者结果之和即为乳酸菌总数2如需单独计数双歧杆菌属数目,按照2.1操作同时包括乳杆菌属和嗜热链球菌1按照2.1和23操作。二者结果之和即为乳酸菌总数22.2结果为嗜热链球菌总数32.3结果为乳杆菌属总数同时包括双歧杆菌属、乳杆菌属和嗜热链球菌1按照2.2和2.3操作。二者结果之和即为乳酸菌总数2如需单独计数双歧杆菌属数目,按照2.1操作2.1双歧杆菌计数根据对待检样品双歧杆菌含量的估计,选择2个一3个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取Im1样品匀液于灭菌平服内,每个稀释度做两个平皿。稀释液移入平皿后,将冷
4、却至48。C的莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良的MRS培养基倾注入平皿约15m1,转动平皿使混合均匀。361厌氧培养72h2h(-/时/_/时),培养后计数平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板倾注要求在15min内完成。2.2 嗜热链球菌计数根据待检样品嗜热链球菌活菌数的估计,选择2个一3个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取Im1样品匀液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。稀释液移入平皿后,将冷却至48C的MC培养基倾注入平皿约15m1,转动平皿使混合均匀。36C1C需氧培养72h2h,(/_/时/_/时)培养后计数。嗜热链球菌在MC琼脂平板上的菌落特征为:菌落中等偏小,边缘整齐光滑的红色菌落,
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