气相色谱概念简介.docx

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1、保留时间、死时间,调整保留时间.分离度、容量因子保留时间保留时间tR,它代表了色谱组份从进样到到达峰顶的时间，通常用来定性。ChromCIassO不保留组分C）组分一O组分二保留时间tRtR1tR2:31min死时间死时间tM：死时间代表不保留组份的保留时间，通常用来校正气相色谱柱柱长。0ChromCIass死时间tM死时间代表不保留组份的保留时间调整保留时间调整保留时间tR指的是保留时间减去死时间。分离度R分离度R代表两个峰相对其峰宽的分离程度，公式如下：min当R=I时，两个峰的峰面积有5%的重叠，即两个峰的分开程度是95%;tR2-tR1(W+W2)/2即两个峰的分开程度是95%R=15

2、时，两个峰的分开程度是99.7%,我们认为此时实现了基线分离；ChromCIass分离度R两个峰的分开程度是99.7%容量因子k还有一个术语叫容量因子k,它指的是在一定的温度和压力下，组分在固定相和流动相中分配达到平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比，代表了样品与填料的作用强度。公式如下：谶谶谡辔=温翻脸并当k=0时，代表化合物全部存在于流动相中，在固定相中不保留，此时调整保留时间为0；当k越大，就说明固定相对此组分的容量越大，出柱越慢，保留时间也越长。当k越大，就说明固定相对此组分的容量越大色谱柱老化什么叫做老化，有两种情况：第一种情况，新的柱子使用之前一般会先做老化，主要目的是去除键合不

3、够稳定的固定相，让新柱子性能更稳定。另一种情况，是做了一天样品,怕柱子里有残留，也叫老化一下柱子，或说烘烤一下柱子。为什么要老化？气相色谱柱使用一段时间后柱子里面会有高沸点杂质残留，这些残留的污染物和样品作用，容易导致普峰拖尾,杂质小等问题。另外，目前常用的气相色谱柱是毛细管柱中的涂壁开管柱，它的固定相是液体以涂覆的形式分布在柱管管壁的内侧。醐1寒聘瞬（螺蠲瞄虱翁褊翻Wi色谱柱长期在高温下使用，固定相会缓慢流失，这就造成了毛细管柱内壁活性基团硅基暴露，暴露的硅基吸附样品也会造成色谱峰拖尾,以及基线起伏、噪声升高等问题。为了避免发生这些情况，我们就需要对使用时间较长的气相色谱柱进行老化操作，老化

4、可以除去色谱柱中残留的污染物。也可以让色谱柱内壁上的固定相热胀冷缩后重新覆盖住部分活性点，这样就延长了色谱柱的使用寿命。老化的重点是什么？关于气相色谱柱的老化，有各种各样的说法，比如有设个缓慢的升温程序走一整晚的，也有忽高忽低走好几次循环的，也有些实验室就简单粗暴的直接升到高温下烘烤。那到底怎样做才能有好的效果呢？O1老化温度老化的第一个重点是温度C老化的最高温度通常推荐设为方法最高设定温度和色谱柱耐受温度的中间值邑谱学堂Chromdass方法最高设定温度和色谱柱耐受温度的中间值,色谱学堂比如，这个方法的最高温度是300度，色谱柱的耐受温度是325,就可以老化到310度。邑谱学堂Chromc1

5、ass190918-433FM(m)6.5.1I机色诳条件色谱性：舛性E细管色遗柱：囿定相：5%笨星95X规格为130（长度）0.25i（内径）0.25U1n（腺原）遇样U温度I300r.进样Ii1IM1.分潦进祥.分流比：40:1.一：气气（纯度299.999）,忸流模式.流速：1.0o1/rn升温理序：初始温收70X?,W1OC/min的速率至300C,仅丽蔬丽!而5einH运行根式1300件下保持5in.色谱柱的耐受温度是325,就可q但要注意的是，不同的柱子耐受温度有很大差别，极性强、膜厚大的柱子通常耐受温度比较低。比如这根DB-WaX柱的恒温耐受温度只有250摄氏度。如果膜厚增加到0

6、.5Um,耐受温度还会进一步下降到240摄氏度。建议老化之前要仔细看一下色谱柱的包装盒或者说明书，因为超过温度上限使用色谱柱对性能和寿命都影响很大。值得注意的是色谱柱老化时温度越高伴随着固定相的流失也会越严重，所以老化温度以及老化时间需要精确把握。色谱柱老化的温度并不建议越高越好，而是在保证能赶走污染物的前提下温度越低越好。举个栗子,平时做样品时的最高温度会做到220度，而已知的样品中杂质的汽化温度不超过260度,那么只需要将老化温度最高设置到260度就可以了。如果我们不知道样品中杂质的汽化温度，大多数情况下可以在做样品运行最高温度往上加20-50度就可以了。02老化时间具体的老化程序,通常会

7、缓慢升温至老化温度，比如25摄氏度min,然后再继续老化2个小时。程序升温的速率可以根据自己的经验或者实验要求来设置。Time03避免氧气比具体的升温速率更重要的事情是绝对避免氧气的存在，这也是老化失败最常见原因。因为高温下的氧气是破坏化学键的好手，而色谱柱里的固定相一旦氧化，彼此间的键键链接会被破坏，固定相就不再能稳定“固定在色谱柱里，造成大量柱流失，柱效也会大幅下降。从避免氧气的角度，严格的老化需要注意以下几点：第一，把色谱柱末端伸入溶剂中，观察是否有连续气泡，如果没有，要检查是否漏气，色谱柱断裂或者堵塞。邑谱学堂Chromdass;连续气泡V、/漏气断裂，堵塞U如果没有,要检查是否漏气,

8、色谱柱断裂或者堵塞1色谱学堂第二，升温前，先通15min载气，置换掉色谱柱中可能存在的氧气。第三，确保其它接头，正确安装。04避免污染另外，从避免污染的角度来说，新柱子老化的时候，最好不要连接检测器。如果是F1D检测器，可以不用点火，也不用开氢气和空气。去残留，该注意哪些呢?如果是已经使用的柱子，怕有残留，希望通过高温老化去除污染物，有些实验室甚至每天都会在关机之前运行一针老化方法，但这种做法，其实是有一定风险的。因为这种污染，往往是沸点高的化合物，一般聚集在柱头，比如样品中的色素、蛋白质、胶状物等等，盲目的老化可能会促使污染物更快的向后转移，却不能完全排出色谱柱，反而会污染整根柱子。正确的做

9、法应该是先分析样品的成分和污染情况。色谱学堂邑谱学堂Chromdass分析样品成分如果是存在老化温度也不能完全气化的成分，比如色素、蛋白质、胶状物等，那在老化之前，应当先进行色谱柱的维护，包括换衬管、色谱柱柱头切割，去除污染源再做老化，才是有意义的。老化的要点1、查看说明书，确定老化温度2、检查仪器连接，确保无氧3、最好不接检测器4、必要时，先做进样口维护5、缓慢升温至老化温度，保持2小时溶剂效应溶剂效应待测样品溶解在溶剂中成为溶液，被进样针注射到进样口里进行汽化。有时候进样口里面样品溶液汽化后的体积，相对于柱内载气流量，显得太大太大，不可能瞬间进入色谱柱。而汽化后的体积中溶剂是最大的组成部分

10、，这就会造成溶剂峰很宽并伴有严重拖尾，还盖掉了较早流出的组分，这一现象被称为溶剂效应。在不分流模式下，溶剂效应的影响尤为明显。为了改善这些情况，防止低沸点的组分很难被检测出来，我们可以通过将柱温箱程序升温的初始温度设置为低于溶剂沸点以下20度左右来解决。Time因为柱温箱的初始温度设置得较低，样品和溶剂会在柱头冷凝，样品溶液重新聚接下来，程序升温开始，把冷凝后的待测物逐步汽化，溶剂和各个组分开始逐一进入色谱柱并依次出峰。翩瞬咯个缠翁襁逐T火色雕舞麒眼喷怎样理解呢？我们以跑步为例，把小人看做是溶剂，如果从天而降二十个人到不同位置一起跑那么到达终点时大家会分散的较开,也就是溶剂拖尾严重。但如果在中间某个位置先集合一下再一起出发，0)CtornCte那么到达终点时就不会分散得那么开了。这个聚焦的效果，把很宽的溶剂峰变窄变高避免覆盖后面紧随的样品峰，改善进样口部分的溶剂效应。除了柱头聚焦，还可以考虑减少进样量和增大分流比等办法来减少溶剂峰对样品峰的影响。