需求内容长非编码RP11426A5与转录元件相互作用的检测与分析.docx
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1、需求内容-长非编码RP11-426A6.5与转录元件相互作用的检测与分析一、功能用途主要用于检测与分析长非编码RP11-426A6.5与转录元件相互作用。二、技术参数1、实验材料1)细胞SAS/HSC32)构建过表达RP11-426A6.5的过表达质粒及其对照质粒3)订购RNAPU11DOWN检测试剂盒(按12T订购)4)订购特异性结合RP11-426A6.5的生物素标记探针(正义探针,反义探针,阴性探针)。2、实验内容培养SAS细胞、HSC3细胞,按要求分为SAS细胞对照组:培养SAS细胞转染对照质粒SAS细胞过表达组:培养SAS细胞转染过表达RP11-426A6.5的过表达质粒HSC3细胞
2、对照组:培养SAS细胞转染对照质粒HSC3细胞过表达组:培养SAS细胞转染过表达RP11-426A6.5的过表达质粒转染48h后,收细胞:1)取一部分细胞,提取RNA,qPCR检测RPI1426A6.5,确定过表达2)剩余细胞,按试剂盒要求裂解,按试剂盒说明要求,采用生物素标记探针进行RNAPU11De)VVN检测,最后VVB检测EZH2的表达。项目技术参数细胞培养用二氧化碳培养箱培养4瓶细胞,每瓶107数量细胞。细胞转染1ipo2000转染转染效率90%。RNApu11down实验用RPU-426A6.5探针进行RNApu11dow富集相互作用蛋白阴性探针、反义探针、正义探针3组。质粒构建分
3、子克隆pcDNA3.I-NC和pcDNA3.I-RP11-426A6.5QPCR检测采用QPCR检测试剂盒使用伯乐IQ5仪器检测三、配置清单:实验内容数量RP11-426A6.5的表达质粒及其对照质粒构建1特异性结合RP11-426A6.5的生物素标记探针(正义探针,反义探针,阴性探针)1RPI1-426A6.5引物设计以及验证1EZH2抗体1细胞培养2细胞转染4RNA提取4逆转录4qPCR8RNAPU11DOWN实验4WB检测2四、售后服务1,供应商应按照本采购项目特点提供长期良好的售后服务,并在响应文件中提供详细具体的售后服务承诺条款及保证,在质保期内售后服务所需费用列入报价。2 .要求供应商必须拥有专业的售后维护服务团队,能够保证本项目正常运行。3 .投标的产品供应商应提供服务条款说明书,并提供相关服务机构有关资格证明文件及公司(厂家)、地址、联系人、联系电话。4 .在质保期内,成交供应商提供7*24小时服务。对于产品在使用过程中出现的问题,在1小时内响应Q如遇与所供产品有关的问题无法远程解决的,在事件确定后2小时内赶到现场提供服务。2小时内未解决的成交供应商应提供详细的应急解决方案。因成交供应商工作延误,造成采购人损失的,成交供应商应负赔偿责任。
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