显微镜的七种观察方式(仪器设备操作使用技术资料).docx
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1、显微镜的七种观察方式一.明视野观看(BrightfieldBF)明视野镜检是大家比较熟识的一种镜检方式,广泛应用于病理、检验,用于观看被染色的切片,全部显微镜均能完成此功能。明视野二.暗视野观看(DarkfieldDF)暗视野实际是暗场照明发。它的特点和明视野不同,不直接观看到照明的光线,而观看到的是被检物体反射或衍射的光线。因此,视场成为黑暗的背景,而被检物体则呈现光明的象。暗视野的原理是依据光学上的丁道尔现象,微尘在强光直射通过的状况下,人眼不能观看,这是由于强光绕射造成的。若把光线斜射它,由于光的反射,微粒好像增大了体积,为人眼可见。m.m暗视野观看所需要的特别附件是暗视野聚光镜。它的特
2、点是不让光束由下至上的通过被检物体,而是将光线转变途径,使其斜射向被检物体,使照明光线不直接进入物镜,利用被检物体表面反射或衍射光形成的光明图象。暗视野观看的辨别率远高于明视野观看,最高达0.020.004暗视野三.相差镜检法(PhasecontrastPH)在光学显微镜的进展过程中,相差镜检术的创造胜利,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观看时很难观看到标本.相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现象,将人眼不行辨别的相位差变为可辨别的振幅差,即使是
3、无色透亮的物质也可成为清楚可见。这大大便利了活体细胞的观看,因此相差镜检法广泛应用于倒置显微镜。相差图片相差显微镜的基本原理是,把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清楚可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路,同时被延迟了1/4(波长),假如再增加或削减1/4,则光程差变为1/2,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减下,提高反差。在构造上,相差显微镜有不同于一般光学显微镜两个特别之处:1 .环形光阑(annulardiaphragm)位于光源与聚光器之间,作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥,焦聚到标本上。2 .相位板(annularphase
4、plate)在物镜中加了涂有氟化镁的相位板,可将直射光或衍射光的相位推迟1/4。分为两种:1. A相板:将直射光推迟1/4,两组光波合轴后光波相加,振幅加大,标本结构比四周介质更加变亮,形成亮反差(或称负反差)。2. B相板:将衍射光推迟1/4,两组光线合轴后光波相减,振幅变小,形成暗反差(或称正反差),结构比四周介质更加变暗相差原理四.微分干涉称镜检术(DifferentialinterferencecontrastDIC)微分干涉镜检术消失于60年月,它不仅能观看无色透亮的物体,而且图象呈现出浮雕壮的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观看效果更为逼真。原理;微分干涉称镜检术是利
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