北虫草在鸡蛋内培养与制备研究.docx

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1、北虫草在鸡蛋内培养与制备研究赵庆枫高巨董凤华丁壮 陈鹏举组别又寸照组低剂量组中剂届组高剂员组表1不同接种剂量对蛋虫草粉重量的影响蛋虫草粉质显g5.350.136.46+0.64*7.220.35*#5.63O.I5#A表2不同接种部位对蛋虫草粉重量的影响组别蛋虫草粉质量/小对照组5350.13尿囊腔接种组7.21(k88*卵黄囊腔接种组6.19().3*#注：一点示与对照组比较0.05；、#法示与尿囊腔比较进样量300 mL/h、空氧流量600L/h、干燥剂比例4%进行喷雾干燥1577、称重，观察试验结果。1.4数据处理试验数据采用SPSS 24.0进行单因素方差分析，各组间数据的平均值采用邓

2、氏多重比较进行差异显著性检验，测定结果以“平均值土标准误”表示，P0. 05表示差异显著。2结果与分析2.1 北虫草菌种接种剂量对蛋虫草粉质量的影响低、中剂量组喷雾干燥的蛋虫草粉质量比对照组增20. 75%、34. 95%,差异显著(P0. 05) o中剂量组比低剂量组增加11.76%,差异极显著(P0. 05),比低剂量组减少14.74%,差异显著(P0. 05),比中剂量组减少28.24%,差异显著(P0. 05)(表 1) o2.2 鸡蛋接种部位对蛋虫草粉质量的影响尿囊腔、卵黄囊腔喷雾干燥的蛋虫草粉质量比对照组增加34. 76%、15.70%,差异显著(P0.05) o卵黄囊腔比尿囊腔喷

3、雾干燥的蛋虫草粉质量减少16.47%,差异显著(P0.05) o12日龄喷雾干燥的蛋虫草粉质量比对照组增加11.34%,差异显著(P0.05),比6日龄增加3. 07%,差异显著(1X0.05) o 18日龄喷雾干燥的蛋虫草粉质量比对照组增加23.21%,差异显著(P0. 05)；比6日龄增加14. 05%,差异显著（P0. 05）；比12日龄增加10. 66%,差异显著（P0.05）；比6日龄减少4. 38%,差异显著（P0. 05）；比18日龄减少19.06%,差异显著（P0. 05）（表3） o3讨论3.1 接种剂量对蛋虫草发酵培养的影响王蓉等18研究人工培养北虫草的接种菌种量为2. 5

4、5.0 mL,但在鸡蛋内接种北虫草菌种的研究目前还未见报道。本研究结果表明，在鸡蛋内接种低剂量北虫草菌种，蛋壳膜增厚，鸡蛋内菌丝体生长发育良好，蛋虫草粉质量比普通鸡蛋明显增加，成功培育出蛋虫草，鸡蛋内的氮源、碳源能满足北虫草菌种的生长发育，突破真菌微生物在液体、固体培养基的生长模式。尤其接种中剂量北虫草菌种时，菌丝和蛋壳膜形成一体，菌丝体比低剂量北虫草菌种生长发育更好，蛋虫草粉质量极显著增加，证明鸡蛋内的营养能满足一定剂量菌种的正常生长发育。但当接种剂量过大时，蛋壳膜表现不明显，菌丝体生长发育受阻，蛋虫草粉质量比低剂量、中剂量明显减少，说明鸡蛋内的营养物质数量有限，不能满足足量的菌种生长发育，

5、以接种中剂量时（0.3 mL）生长发育良好（表4、图1、图2）。3.2 接种部位对蛋虫草发酵培养的影响接种部位对蛋虫草发酵培养的影响结果和方华舟等19研究一致，在北虫草菌种培养中加鸡蛋为外源氮源效果良好，试验和对照组鸡蛋相比较，无论接种在尿囊腔或者卵黄囊腔内，菌丝体在蛋壳膜上生长，蛋壳膜逐渐增厚，蛋壳内环境发生不同程度的改变，北虫草菌种均能生长发育，但以接种在尿囊腔内的菌丝体变化明显，喷雾干燥的蛋虫草粉质量增加显著（表4、图3和图4）。3.3 培养日龄对蛋虫草发酵培养的影响通过观察在鸡蛋内接种3日龄后，北虫草菌丝体开始生长发育，蛋壳膜和菌丝膜形成一醴、蛋清营养物质吸收稀薄如水样、蛋黄颜色的改变

6、以及喷雾干燥蛋虫草粉重量等综合比较，在试验前生长发育不明显，到12日龄生长发育明显，尤其1218日龄时生长发育良好。但随着日龄的增加，鸡蛋内的营养物质被菌种消耗殆尽，24日龄和对照组、6日龄、12日龄之间差异不明显，应该是菌丝体逐渐出现自溶现象，与张杨等20研究关于北虫草接种时间对培养基的要求基本一致（表4、图5和图6）。4结论北虫草天然资源数量很少，再加上大量采挖已日渐枯竭，传统人工培养基以大米、小麦、高粱、蚕蛹粉等为主，各营养成分有限，对培养条件要求苛刻、工艺复杂、周期长，而鸡蛋中含有丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物，能满足北虫草菌的营养需求，使之开发成具备多种营养的单一培养基质，接种后培养

7、条件简单、周期短、方法简便，同时我国产蛋量大、价廉易得，因此将北虫草菌接种在鸡蛋内培养适合工业化批量生产。通过试验将北虫草菌种接种在无公害鸡蛋内，以在尿囊腔内接种0.3 mL培养18日龄时，菌丝体变化明显、蛋壳膜和菌丝膜形成一体、蛋清营养物质吸收稀薄如水样，喷雾干燥蛋虫草粉质量增加显著，为北虫草培养新模式提供技术依据和理论基础，为研制北虫草提供新的思路和方法，为新型免疫增强剂的开发提供更多来源。Reference：1杨其莲，韩 冰，祁 红.免疫增强剂的处方使用调查及其合理性评价J.中国临床药学杂志，2012, 21 (4) ： 213-217.2 KIM H G, SONG H, YOON D

8、 H, et al. Cordycepsproinosaextractsinduceapo pmsis of HeLa cells by a caspase dependentpathwayJ. J E thopharm a col, 2010, 128 (2) ： 342-351.3王林萍，余意，冯成强.冬虫夏草活性成分及药理作用研究进展J.中国中医药信息杂志，2014, 21 (7) ： 132-136.4黎 炼.青藤碱诱导未成熟树突状细胞对肾移植大鼠CD4+CD5+调节性T细胞及Fox3表达的影响D.湖南衡阳：南华大学，2015 (1) ： 3.5朱雅娟，樊丽超.脑脊液ADA和IL-23

9、的测定对结核性脑膜炎的诊断价值J.中国保健营养(中旬刊)，2012 (8) ： 309.6齐贺，黄竹清，郑剑玲，等.北虫草复合制剂对小鼠免疫功能的影响J.微生物学杂志，2013, 33 (3) ： 63-65.7 JIN C Y, KIM G Y, CHOI Y H. Induction of apoptosis byaqueousextract of cordyeepsm ilitaris through activation of caspasesand inactivelion of Akt in hum an breast cancer MDA-MB-231 cellsJ. JMicrohiol Bioteehnol, 2008, 18 (12) ： 1997-2003.8 CABONI M F, BOSELLI E, MCSSIA M C, et al. Effect ofprocessing and storage