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1、18生效日期:2014. 10修改日期:2014. 09类另小操作规程部n:输血科名称:输血科交叉配血试验标准作规程新 增:交叉配血标准操作规程【目的】检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保受血者输血安全。【范围】所有输血前需要进行交叉配血的血制品。【职责】配血岗位负责交叉配血试验。【原理】交叉配血试验是指受血者血清与供血者红细胞及受血者红细胞与供血者血清之间的混合凝集试验,分为主管(或称主侧)及次管(或称次侧)。主管是受血者血清与供血者红细胞,次管是受血者红细胞与供血者血清。凝聚胺法利用多聚季胺盐类一一凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减
2、少,引起正常红细胞可逆性凝集。无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集消散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能消散,以此来判断供、受者间血液的相容性。【标本采集和处理】1、标本采集:EDTA抗凝静脉血2ml。2、标本保存:室温放置不超过6小时,4保存不超过72小时,无溶血及明显乳糜。【设备与试剂】1、凝胶胺介质试剂盒包装规格:150Tests盒。试剂组成:低离子溶液,凝聚胺溶液,悬浮液。储存条件及有效期:未开封试剂应贮存于2-25、相对湿度不大于80%;已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%室温环境,试剂用后应及时拧紧瓶盖保存;未开封试剂有效期为二年,在有效期内的已开封试剂应
3、在开封后6个月内使用完。2、红细胞悬液:取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制3%-5%红细胞悬液。3、BaSo2005-2 BaSo2002-2型医用低速离心机:珠海贝索生物技术有限公司。【方法】1、盐水介质法a)取小试管(内径10 mm60 m)2支,分别标明“Ps+Dc”和“Pc+Ds”,前者为主管,后者为次管。其中Ps=受血者血清,Pc=受血者红细胞,Ds=供血者血清,De二供血者红细胞。b)按标记主管内加入受血者血清2滴及供血者3%红细胞盐水悬液1滴,次管内加入供血者血清2滴及受血者3%红细胞盐水悬液1滴。c)混匀后以3400 r/min离心15秒。d)轻轻摇动试管,用肉眼观察反应结果
4、,用低倍镜观察是否有凝集现象。2、聚凝胺法a)取小试管(内径10 mm60 mm)2支,分别标明“Ps+Dc”和“Pc+Ds”,前者为主管,后者为次管。其中Ps二受血者血清,Pc二受血者红细胞,Ds=供血者血清,De=供血者红细胞。b)按标记主管内加入受血者血清2滴及供血者,3 %红细胞悬液1滴,次管内加入供血者血清2滴及受血者3%红细胞悬液1滴。c)每管加低离子介质(LIM) 0.6 ml,混匀后室温静置1 min。d)每管加聚凝胺溶液2滴,混匀后在室温静置15 soe)以3400 r/min离心15秒,倾去上清液。f)轻轻摇动试管,肉眼观察有无凝集。无凝集须重新试验,有凝集则加入2滴复悬液
5、,轻轻混匀后观察结果,必须用低倍镜观察结果。3、结果判定a)均应设阳性、阴性对照及自身对照。b)先看对照管,对照结果准确,再看配血管。c)配血管如有一管凝集或两管均有凝集,示配血不合,两管均不凝集,示配血相合。20液1滴,次管内加入供血者血清2滴及受血者3%红细胞盐水悬液1滴。c)混匀后以3400 r/min离心15秒。d)轻轻摇动试管,用肉眼观察反应结果,用低倍镜观察是否有凝集现象。2、聚凝胺法a)取小试管(内径10 mm60 mm)2支,分别标明“Ps+Dc”和“Pc+Ds”,前者为主管,后者为次管。其中Ps二受血者血清,Pc二受血者红细胞,Ds=供血者血清,De=供血者红细胞。b)按标记主管内加入受血者血清2滴及供血者,3 %红细胞悬液1滴,次管内加入供血者血清2滴及受血者3%红细胞悬液1滴。c)每管加低离子介质(LIM) 0.6 ml,混匀后室温静置1 min。d)每管加聚凝胺溶液2滴,混匀后在室温静置15 soe)以3400 r/min离心15秒,倾去上清液。f)轻轻摇动试管,肉眼观察有无凝集。无凝集须重新试验,有凝集则加入2滴复悬液,轻轻混匀后观察结果,必须用低倍镜观察结果。3、结果判定a)均应设阳性、阴性对照及自身对照。b)先看对照管,对照结果准确,再看配血管。c)配血管如有一管凝集或两管均有凝集,示配血不合,两管均不凝集,示配血相合。18