输血科不规则抗体筛选试验操作规程.docx

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1、16生效日期：2014.10修改日期：2014.09新 增：类另小操作规程部n：输血科名称：输血科不规则抗体筛选试验操作规程不规则抗体筛选试验标准操作规程【目的】检测血清中是否存在抗A、抗B以外的不规则抗体，为交叉配血、AB0血型正确定型（不规则抗体干扰反定型）以及新生儿溶血病产前、产后诊断提供参考依据。【范围】1、有输血史、妊娠史的患者血标本。2、短期内多次输血的患者的血标本。3、交叉配血不合的患者的血标本。4、有输血反应史的患者的血标本。5、有新生儿溶血病史及流产史的患者的血标本。【职责】实验室负责不规则抗体筛选试验。【原理】向微柱凝胶反应卡（简称反应卡）内先后加入筛选细胞和受检血清，血清

2、中的IgG抗体与相应红细胞抗原结合后便会和凝胶中的抗人球蛋白再次结合形成红细胞凝集块，因凝胶具有分子筛的作用，从而在离心后红细胞凝集块仍留在柱子的上部或中部，此称为阳性反应，表明受检血清中有IgG抗体；反之，红细胞沉于柱底，为阴性反应，表示受检血清中没有IgG抗体。【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉血2ml,离心，取上清。2、标本保存：室温放置不超过8小时，4保存不超过72小时，无溶血及明显乳糜。【设备与试剂】1、抗体筛选红细胞试剂盒包装规格：每盒内装有I号筛选细胞、号筛选细胞、m号筛选细胞试剂各一支，5ml支。储存条件及有效期：2-8储存，不能冰冻。不得长

3、期处于室温或高温条件下。使用后，应立即旋紧瓶盖并在2-8条件下保存。储存条件下有效期为3个月。2、抗人球蛋白检测卡（凝胶微柱）包装规格：12卡/盒储存条件及有效期：18-25C避光保存。有效期为自组装之日起12个月3、BaSo2005-2医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司4、TD-3A型血型血清学用离心机：长春博研科学仪器有限责任公司5、FYQ型免疫微柱孵育器：长春博研科学仪器有限责任公司【操作步骤】1、将孵育箱开关打开，进行预温。2、对反应卡进行标记，标明红细胞编号、病人姓名、病区、床号、住院号和检查日期。3、按标记将筛选红细胞I -IH号各1滴（50ul）加入反应卡相应孔内,再各加受

4、检血清1滴入反应卡孔内。4、将已加好反应物的反应卡置孵育箱（37）内孵育15min,取出后即置TD-3A型血型血清学用离心机内离心5mio5、取出用肉眼观察，根据原理中标明的判读标准判断反应结果并记录。6、如筛选结果阳性，还须用谱细胞对受检血清进行检查，以确定抗体的特异性。【注意事项】1、红细胞浓度不可过高，0.8%即可。应使用纯血清（肝素钠抗凝管标本），如使用血浆有可能会出现假阳性结果。2、加样时加样器倾斜45。，顺柱壁缓缓加入，防止形成气泡。3、应做阳性、阴性及自身对照。对照结果正确，受检孔红细胞滞留于上部或中部为阳性，完全沉降于柱底为阴性。【支持文件】血站技术操作规程、临床输血技术规范【相关记录】ABO/Rh（I）、抗体筛选实验记录本