基于高通量测序技术的非小细胞肺癌相关基因变异检测试剂临床试验注册审查指导原则.docx

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1、基于高通量测序技术的非小细胞肺癌相关基因变异检测试剂临床试验注册审查指导原则本指导原则旨在指导注册申请人对基于高通量测序技术的 非小细胞肺癌相关基因变异检测试剂临床试验的设计及开展， 同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。本指导原则是针对基于高通量测序(Next Generation Sequencing, NGS)技术的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLO相关基因变异检测试剂临床评价的一般要求，申请人 应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需 具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注 册申报资料的内容进行

2、充实和细化。本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包 括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果 有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要详 细阐明理由，并对其科学合理性进行验证，提供详细的研究资 料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指 导原则。本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下 制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发 展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。一、适用范围本指导原则所阐述的基于NGS技术的NSCLC基因变异检 测试剂，是指采用NGS技术检测NSCLC患者10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋（FFPE

3、）组织样本中的基因变异状态的体 外诊断试剂（以下简称“申报产品”）。本指导原则适用于进行首次注册申报和变更注册的产品。有关此类产品的背景信息参见附件。二、临床试验设计（一）临床性能研究1 .临床试验机构及人员申请人应选择不少于3家按要求备案的临床试验机构开展 临床试验。临床试验机构应常规开展NSCLC分子病理检测，具 有病理诊断、分子生物学等检测的优势，试验操作人员应有足 够的时间熟悉检测系统的各环节（仪器、试剂、质控及操作程序 等），熟悉评价方案。临床试验整个过程均应处于有效的质量控 制下，最大限度保证试验数据的准确性及可重复性。2 .临床试验适用人群和样本类型适用人群为经病理诊断为NSCL

4、C的人群。应注意纳入 NSCLC不同分期的病例，同时应纳入不同的组织分型（包括腺 癌、鳞癌、腺鳞癌以及大细胞癌等）。阳性样本应包括不同突变 率的样本。临床试验所用的样本类型应为FFPE样本。如对于穿刺标 本及手术标本均适用，则临床试验中对于两种标本均应纳入。 临床样本的处理、保存和核酸提取等应分别满足申报产品说明 书及对比试剂说明书的相关要求。3 .对比方法的选择可选择实验室参考方法或已上市同类产品作为对比方法。 参考方法的检测可在临床试验机构完成也可委托具有资质的第 三方机构完成。对比方法的选择应从预期用途、样本要求、检测 性能、检测范围、所检突变是否可以分型等方面，确认其与申报 产品具有较

5、好的可比性。也可以采用多种对比方法来分别进行 对比。4 .最低样本量临床试验样本量应采用适当的统计学方法进行估算，并详 细描述所使用统计方法及各参数的确定依据。此部分临床试验 目的为评估两种检测方法之间的一致性，因此建议采用单组目 标值法进行最低样本量的估算。通过阳性符合率和阴性符合率 来分别计算所需阳性样本和阴性样本的例数，应针对每个基因 分别进行样本量的估算。阴、阳性符合率的临床可接受标准(Po)建议不低于90%。PO(I-PO) + Zi-力Pr(I- Pt)n=(PLPo)2公式中，n为样本量；Zl-2 Zl-B为显著性水平和把握度的 标准正态分布的分数位，PO为评价指标的临床可接受标

6、准，Pt 为申报产品评价指标预期值。应对申报产品所声称的每个基因的各种突变均进行验证， 且每种突变类型均应具有一定例数。对于临床发生率较低的突 变，可结合申报产品的检测原理(如是否共用相同的引物及捕 获探针等)及申报产品的整体检测性能等综合考虑。对于融合 和插入/缺失，应覆盖常见的变异亚型。临床试验总样本量确定时应在上述阴、阳性样本最低样本 量估算的基础上，同时考虑其他可能造成受试者脱落的情况以 及申报产品所覆盖的突变位点，根据实际情况适当增加入组样 本量。5 .统计分析首先应针对所入组人群进行人口学分析，包括性别、年龄、 治疗状态、组织分型、分期、样本类型（穿刺标本或手术标本）、 肿瘤细胞含

7、量、覆盖所有基因亚组等方面进行分析，还应分析 临床试验中所纳入的阳性判断值附近的样本情况。以四格表分别总结申报产品与对比方法的定性检测结果， 计算阳性符合率、阴性符合率及相应的95%置信区间。除总体 统计外，还要针对每个基因、每种突变进行统计分析，以验证申 报产品与对比方法检测结果的一致性。对于融合和插入/缺失，应分别统计每种融合或插入/缺失亚 型的例数，常见的变异亚型应有一定例数。同时应针对存在混合突变的样本单独进行统计分析。针对两种方法检测不一致样本，应采用合理的方法进行确 认，对不一致的原因综合进行分析。（二）临床意义的确认L具有明确伴随诊断意义的基因变异针对具有明确伴随诊断意义的基因变

8、异，如EGFR （19deh L858R、T790M）、ALK融合、ROSl融合、METI4外显子跳跃 突变、RET融合、BRAFV600E等，应参考伴随诊断相关指导 原则提供伴随诊断临床证据。申请人应关注国内相关靶点的抗 肿瘤药物的批准情况，针对国内已有相关抗肿瘤药物上市的基 因变异靶点，应提供伴随诊断临床证据。1.1 一致性比对针对EGFR、ALK融合、ROSl融合、BRAFV600E,如申 报产品为针对已上市的抗肿瘤药物所开发的非原研伴随诊断试 剂，则可按照相关指导原则的要求，采用与原研伴随诊断试剂 进行一致性比对的方式开展临床试验，也可采用指导原则中的 其他评价路径。1.1.1 临床试

9、验机构的数量针对此部分临床研究，申请人应选择不少于3家按要求备 案的临床试验机构开展临床试验。1.1.2 对比方法的选择应选用申报产品所声称伴随的抗肿瘤药物的原研伴随诊断 试剂作为对比试剂。应注意，申报产品所声称的基因变异位点 应与原研伴随诊断试剂具有一致性，超出原研伴随诊断试剂检 测范围的突变位点不可作为指导用药的依据或提供伴随诊断意 义的临床证据。申报产品用于指导用药的灵敏度应与原研伴随诊断试剂相 当，根据原研伴随诊断试剂的灵敏度水平设置相应的阳性判断 值，以保证两者具有较好的一致性。1.1.3 人组人群此部分临床研究的目的在于评价申报产品的伴随诊断的预 期用途，因此所入组人群应以申报产品

10、所声称的伴随的抗肿瘤 药物的适应证人群为主。如药物的适应证人群临床上较少，客 观上无法实现，则临床试验中也应包含一部分药物的适应证人 群。1.1.4 样本量要求样本量的估算方法与上述临床性能评价中的样本量估算方 法相同，根据与原研伴随诊断试剂的一致性水平设置合理的最 低可接受标准。如原研伴随诊断试剂同时能够满足对申报产品 临床性能的评价，则此部分研究可与第一部分临床性能的评价 进行合并，但应注意入组人群的差异。如采用与原研伴随诊断试剂的外部等效性研究进行伴随诊 断用途的验证，应采用合理的统计学模型进行样本量的估算， 样本量应能够满足申报产品和原研伴随诊断试剂检测结果之间 的符合率非劣效于两次原

11、研伴随诊断试剂检测结果之间的符合 率的要求。应注意在统计分析过程中非劣效性界值的确定应能 够满足临床需求，并提供非劣效界值的确定依据。此部分研究中应根据适应证人群中的基因突变率纳入临床 常见的变异类型。1.1.5 统计分析此部分研究的目的在于评价申报产品与原研伴随诊断试剂 在适应证人群中筛选人群的一致性，因此除了应按照不同突变 (如EGFRI9del、L858R)进行统计分析外，还应对申报产品 与原研伴随诊断试剂对用于筛选人群的生物标志物的不同突变 汇总统计(EGFR 19del+L858R )。如伴随诊断用途的验证采用与原研伴随诊断试剂进行比较 的外部等效性研究的评价方法，应采用特定的统计学

12、方法进行 统计分析，即：评价同时与原研伴随诊断试剂的第一次检测结 果相比，申报产品和原研伴随诊断试剂的第二次检测结果的阳 性符合率的差值和阴性符合率的差值的95%置信区间上限是否 小于预先设定的非劣效界值。1.2 桥接试验及药物疗效观察性研究对于MET 14外显子跳跃突变、RET融合等目前国内已有 相应的抗肿瘤药物上市的基因变异，按照伴随诊断相关指导原 则的要求，目前尚不能进行一致性比对的路径提供伴随证据， 可选择桥接试验或药物疗效观察性研究的路径进行伴随诊断意 义的验证。1.3 与抗肿瘤药物同步研发的伴随诊断试剂如申报产品为与新开发的抗肿瘤药物同步研发的伴随诊断 试剂，则可提供与药物同步开发

13、的药物临床试验资料作为其伴 随诊断证据。药物临床试验报告中应明确所使用的伴随诊断试 剂为申报产品，并明确申报产品在药物临床试验中所起的作用 以及与药物疗效的关系。2.具有临床意义的基因变异基于NGS方法的检测能力及技术特点，对于尚不是伴随诊 断的基因变异位点，但经临床诊疗指南公认为具有临床意义的 基因变异亦可以纳入其检测范围。针对此类基因变异，对于有已上市同类产品的，无需提供其 临床意义的证据。如尚无已上市同类产品的，申请人应提供针 对NSCLC患者的临床诊疗指南等临床公认的相关资料作为该 类基因变异位点临床意义的支持性资料。（三）通用要求L临床试验方案临床试验实施前，研究人员应从流行病学、统

14、计学、临床医 学、检验医学等多方面考虑，设计科学合理的临床试验方案。各 临床试验机构应执行同一临床试验方案，且保证在整个临床试 验过程中遵循预定的方案实施，不可随意改动。整个试验过程 应在临床试验机构的实验室内并由本实验室的技术人员操作完 成，申请人的技术人员除进行必要的技术指导外，不得随意干 涉实验进程，尤其是数据收集过程。试验方案中应确定严格的病例纳入/排除标准，任何已经入 选的病例再被剔除出临床试验都应记录在案并明确说明原因。 在试验操作过程中和判定试验结果时应采用盲法以保证试验结 果的客观性。2.质量控制临床试验开始前，建议进行临床试验方案的培训，以熟悉并 掌握相关试验方法的操作、仪器

15、、技术性能等，最大限度控制试 验误差。整个试验过程都应处于有效的质量控制下，最大限度 保证试验数据的准确性及可重复性。3.临床试验报告临床试验报告应该对试验的整体设计及各个关键点给予清 晰、完整的阐述，应该对整个临床试验实施过程、结果分析、结 论等进行条理分明的描述，并应包括必要的基础数据和统计分 析方法，最后得出临床试验结论。临床试验报告的撰写应参考 相关法规的要求。报告中应明确所配套使用的测序仪、生物信息数据分析软 件、测序试剂等具体信息。数据汇总表中应提供唯一可溯源的样本编号、基本人口学 信息（性别、年龄等）、临床诊断背景信息、肿瘤的组织分型、 分期、组织样本肿瘤细胞占比、突变类型、突变

16、频率、测序深度、 覆盖该位点的整个测序深度的测序数据（reads数）、申报产品及 对比方法的检测结果等信息。委托第三方机构进行参考方法检测的，应提供临床试验机 构委托第三方机构的委托协议。同时应提供参考方法的详细资 料，如：方法原理、所需试剂及仪器、参考方法的性能验证、参 考方法质控、典型的实验图谱及数据等。上述资料应由临床试 验机构签章确认。三、参考文献1 NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines) Non-Small Cell Lung Cancer, Version 3.2023.中国临床肿瘤学会(CSCO)非小细胞肺癌诊疗指南2023.3中国临床肿瘤学会非小细胞肺癌专家委员会，二代测