2024成人呼吸系统感染性病原诊断.docx

《2024成人呼吸系统感染性病原诊断.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2024成人呼吸系统感染性病原诊断.docx（7页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、2024成人呼吸系统感染性病原诊断呼吸道病原学检测标本的采集方法呼吸道病原学标本的采集方法见表1。表1呼吸道病原学标本类型及采集方法标本类型采集方法痰液自主咳痰，诱导痰拭子口咽拭子，鼻咽拭子保护性毛刷经支气管镜引导下采集经人工3道内吸 引收集分泌物经人工气道,在负压吸引装置刖连接无国集痰器，操作厮 诊痰液聚集部位，必要时给予体位引流或物蒯瞰，以增力哧 本的采集量支餐管肺泡灌洗 液根据病变部位选择潘先叶段，使用生理盐水在肺段或亚段进行 灌注并回收，通过细胞计数进行灌洗液质量控制，回收率应在 30%以上胸腔积液细菌培养标本量应1 mL ,真菌培养NiO mL ,分枝杆菌培养 10 mL如送检结核蛛

2、T细胞检测（T-SPOT ）还需注意添 加肝素抗凝组织活检标本可选择电视辅助胸腔镜手术，气管-支气管内超声引导下肺组 织或淋巴结活检，经气管镜M活检术，CT或B超引导下经皮 肺穿刺活检术。标本的运送、储存和预处理1 .标本的运送和储存原则首先标签应准确，信息完整，贴在容器上，而不是容器盖上。不同病原体检测标本的采集和转运原则见表2o表2不同病原体检测标本的采集、收集和转运原则病原体标本及采集方法收集装置、保存温度和转运 原则需氧菌培养组织、体液或灌洗液等无菌容器，室温，立即雌拭子标本（次选）：推荐使用 植绒尼龙拭子（采样量大，易 洗脱，检出率高）拭子转运管，室温，2 h内厌氧菌培养组织、体液及

3、灌洗液等无菌厌氧瓶，室温，立即送 检拭子标本（次选）：推荐使用 植绒尼龙拭子（采样量大，容 易洗脱，检出率高）厌氧拭子转运管，室温，2 h 内真菌培养组织、体液及灌洗液等无菌容器，室温，2 h内拭子标本（次选，仅适用于酵 母菌和浅表部位MTB感染）拭子转运管，室温，2 h内病毒培养组织、体液及灌洗液等病毒转运培养基，冷藏保存 立即送检拭子标本：推荐使用植绒尼龙 拭子（采样量大，容易洗脱， 检出羞澄I ）病毒拭子转运管，室温，2 h 内疑似生物恐怖 病原体标本应遵守国家关于此类标本的采集要求（可参考美国疾病预防控 制 中 心 网 站 ：httpsemergencycdc.gov/labissue

4、s/index.asp ）不同类型标本采集量、保存和转运时间见表3o表3不同时间标本的采集量、保存和转运时间标本类型标本采集量收集装置、保存温度和转 运时间当清学标IOml血液或5 ml血清血清分离胶促凝采血管, 室温，2 h内抗原或抗血液、脑脊液、尿液等（根宓闻史哭 玄:日7 hL体检测 据实验室的具体要求）q团宣器，至皿，2 hra核酸扩增10 ml血液或5 ml血浆含EDTA采血管，室温，2h内2 ml病毒转运培养基密闭容器，室温，2 h内2 .针对不同病原体的检测方法标本采集后应及时进行质量控制，合格的标本应尽可能短期内送检。某些特殊病原体标本的转运、保存和检测方法见表4o表4特殊病原

5、体标本的转运、保存条件及检测方法特殊病原体标本转运条件和 时间标本保存条件检测方法细菌无菌容器，至温，2 h4 , 24h革兰染色，定量培养努卡菌革兰染色,弱抗酸染色，培养军团菌培养，核酸检测，抗原检测真菌无菌容器，室温,2h4 , 24h氢氧化钾压片或荧光白染色，真菌培 养曲霉氢氧化钾压片或荧光白染色，真菌培 养，半乳甘露聚糖（GM）混验肺抱子菌六胺银染色，核酸检测，抗原检测隐球菌墨汁染色，真菌培养，隐球菌荚膜多 糖抗原分枝杆菌无菌容器，室温，2h4 , 24 h涂片抗酸染色，培养，核酸检测病毒病毒转运培养基， 室温,2 h4 , 5d核酸检测，抗原检测，分离培养寄生虫无菌容器，室温，2h4

6、 , 24 h直接镜检,核酸检测，抗原检测病原特殊结 构HiSS荚膜染色，Loeffler多色亚甲蓝 雉鞭毛银盐染色法，复红染色法芽抱孔雀绿染色法，石碳酸著工染色法呼吸道病原体检测方法的优缺点不同检验方法的优缺点见表5o表5病原体不同检测方法的优缺点聚合酶链反应（如直接PCR、mPCR、 RT-PCR. qPCR）简单，快速，便宜，可定量假阳性率高，污染风险高，引物可能失效，用于 诊断常见和某些特殊病原体（如肺抱子菌、 核分枝杆菌等）等温（恒温）扩增技术 （LAMP、NASBA、RPA 和 SDA ）快速，敏感，特异假阳性率高，污染风险高，引物可能失效，用于 诊断常见和某些特殊病原体芯片技术（

7、多病原等温 扩增微流控芯片技术、PoC得）快速，敏感，特异，污染率低 无需PCR认证大部分检测仍需在扩增前进行样本和速算提取， 未完全实现样品前处理自动化靶向通用引物多重PCR 和一代测序（如16s、 ITS）靶向NGS宏基因组NGS血清学试验（如酶联免 疫和免疫层析等检测）涂片显微镜检查病原体培养引物可能失效，诊断某些特定病原体，难以区分寸病而伏坨昭处f=处;#定植微生物和病原微生物，测序文库构建复杂， 以变暨普鹘、黑挈进可诊断某强寺定的病原体，价格昂贵且耗时，有 仃力K 啾心度向 RJM 可能被环境物种污染，难以区分定植微生物禾嘛 原微生物喜罂糯露原架可能存在宿主核酸亏染,价格昂贵且耗时（

8、23 亶?罂的鲁身谭籥等-d ）,有可能被环境物种污染，难以区分定植微 嚣蠹黑有友现生物和病原微生物血清特异性抗体检测在感染早期可能呈假阳性， 包括对血清特异性抗体检测和需要采集急性期和恢复期双份血清进行检测未匿 快速抗原检测，价格便宜，可果评价；体液免疫缺陷会导致假阴性，受一些因 诊断急性感染素影响也可能会出现假阳性结果；抗原检测结果不受机体免疫状况影响，但准确率较低快速（数分钟至数小时），可 通过计算分析标本中各种微生 SBSl敏感度及特异度低,加者缴佥的限制 据疑诊病原体采取特殊染色进 行诊断经济，标本容易收集，并可结敏感度及特异度低，无法检测非培养病原体，某 合体外药敏试验结果为治疗提

9、些病原培养十分耗时，某些病原微生物培养困难 螃用的信息或无法进彳言外培养基质辅助激光解析电离 飞行时间质谱技术敏感度高，培养后检测快速需要病原体培养结果和已知病原体蛋白谱检测方法优点缺点注：PCR :聚合酶链式反应；RT-PCR :实时逆转录PCR ; mPCR :多 重PCR ;qPCR :实时荧光定量PCR ;LAMP :环引物介导的等温扩增； NASBA :核酸序列扩增；RPA :重组聚合酶扩增;SDA :链置换扩增； POCT:即时检验或床旁检测；ITS :内部转录间隔区；NGS :二代测 序技术病原检测结果的判读及其临床价值病原学检查结果的判读应该综合考虑患者的年龄、基础疾病、免疫状

10、态、临床特点、病情严重程度以及先期的抗感染治疗等情况。1 .直接抗原快速检测胶体金法病毒抗原快速检测方法简便、快速、成本低。病毒抗原快速 检测的特异性较好，但存在敏感度低、假阴性率较高的问题。当临床 高度怀疑为病毒感染，但病毒快速检测结果为阴性时，应加做病毒核 酸检测，以排杳假阴性。2 .血清特异性抗体检测适合在门诊、急诊或基层医院用于病原体的筛查。但由于早期阳性率 较低，需要采集急性期及恢复期双份血清进行检测和效果评价，但体 液免疫缺陷的患者可呈假阴性。3 .涂片所获取的各种标本均应行病原学涂片检查。在结果判读时，需要结合 患者的临床症状和影像学表现，排除操作过程或环境污染的可能。 BALF离心沉淀后六胺银染色、抗酸染色和革兰染色可分别用来检测肺 泡子菌、分枝杆菌和部分细菌等。肺穿刺标本和胸腔积液涂片发现病 原体对确诊具有重要意义。4 .培养 在进行痰培养前必须确定是合格痰标本，并排除操作不当或环境污染 的情况。定量培养有助于区分致病菌和定植菌。5 .核酸分子扩增检测和基因芯片检测核酸分子扩增及等温扩增基因芯片检测等方法可实现快速分子诊断， 所需时间短，但现有核酸分子扩增技术也存在一定的局限性，尤其是 难以快速检测和确定多药耐药病原菌的耐药基因突变部分。