新型冠状病毒核酸检测操作人员理论培训试题及答案.docx

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1、Q：DNA双链中A:碱基A-T之间以两个氢键相连，G-C以三个氢键相连。Q:PCR试剂盒中A:加入尿昔糖基酶（UNG ）具有防污染作用。DNA变性是指在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢 键断裂，而核酸分子中其他共价键不受影响。自制室内质控品时,应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。PCR的测定点在PCR的指数扩增期,非平台期。临床检验中的随机误差通常表现为质控物测定结果的SD增大。核酸溶于水，不溶于乙醇等有机溶剂。核酸的解链温度（Tm）与G+C含量有关，G+C含量愈大，Tm愈高。以次氯酸为主要成分的清洁剂在配制后24小时内使用。质量管理体系要素包括质量方针、质量目标和质量指标。核

2、酸的复制是由5 -3方向进行。DNA变性的本质是双链间氢键的断裂。Q：核酸提取纯化中，RNase潜在污染源是：A:实验室环境、实验用品如吸头、离心管等、实验人员的手。Q：生物安全水平的级别共分为A:四个等级。Q：PCR出现基线漂移的可能原因有：A:蒸发、探针水解、相邻荧光通道干扰等。Q:常用RNaSe抑制剂是A:DEPC （焦碳酸二乙酯）。Q：Sanger测序体系与PCR反应体系的主要区别是前者含有：ddNTPQmRNA约占总RNA的5%Q：核酸检测对标本采集容器的要求是：密闭、一次性、无DNase和RNasex无菌。Q：肝素是TaqDNA聚合酶活性的强抑制剂。Q：PCR采用内标可识别扩增检测

3、的假阴性、假阳性。Q:Taqman荧光探针常用的荧光基团是：A:FAM,TET, VICz HEXoQ新检测系统()情况下应进行性能验证。A常规应用前、常规使用期间(定期)、更换试剂、仪器、校准品溯源性 改变、仪器搬迁、设施、环境严重失控等QPCR室内质控品的浓度设置：A弱阳性质控(浓度为检测限2-4倍)，阳性质控，阴性质控品。Q生物安全柜、超净工作台、通风橱三者的区别：AQ阳性室内质控品出现假阴性失控的常见原因分析：A(1)核酸提取中的随机误差，如核酸提取中的丢失，有机溶剂的去除不 彻底，标本中扩增抑制物的残留,所用耗材如离心管有PCR抑制物等。(2 )仪器的问题，如扩增仪孔间温度的不一致性，孔内温度与所示温度 的不一致性等。(3 )试剂的问题，如Taq酶和/或反转录酶的失活，探针的纯度及标记 效率和核酸提取试剂的效率等。Q阴性室内质控品出现假阳性失控的常见原因分析：A(1)扩增产物的污染(2)临床标本的核酸提取过程中发生的样本间的交叉污染。(3 )喷枪等关键耗材污染(4 )试剂污染(5 )仪器故障Q出现实验室污染怎么办？ A(1)开窗通风(2 )用次氯酸钠溶液清洗地面,实验台、墙面(3 )增加紫外灯照射时间(4 )用75%乙醇空中喷雾等方法去除(5 )每天进行上述过程，直到污染消除。