内标法与外标法在定量分析中有何不同？.docx

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1、内标法与外标法在定量分析中有何不同?Ol内标法L定义：内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，选一与欲测组分相 近但能完全分离的组分做内标物（内标物是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标 物的混合标准溶液，进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中，进样后测得 欲测组分和内标物的定量参数。2 .内标物：内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标 准物质，它可被色谱柱所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组 分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时，内 标物的选择是

2、一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的已知化合物, 这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能 一致的物理化学性质（如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等）、色谱行为和响 应特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品 中各组分充分分离。3 .选择内标物的四个要求（1）内标物应是该试样中不存在的纯物质；（2）它必须完全溶于试样中，并与试样中各组分的色谱峰能完全分离；（3）加入内标物的量应接近于被测组分；（4）色谱峰的位置应与被测组分的色谱峰的位置相近，或在几个被测组分色谱峰中间。4 .影响因素在使

3、用内标法定量时，影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色 谱方面的和仪器方面的三类。由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时 出现。化学方面的因素（1）内标物在样品里混合不好；（2）内标物和样品组分之间发生反应；（3）内标物纯度可变等。对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一 些问题（如渗漏）对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些。但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色 谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非 线性等。进样量应足够

4、小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠，而色谱图看来也是正常的话，应着重检查积分装置和设置、斜率和 峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是：面积比可变，而峰高比保持相对恒定。5 .优点内标法是结合了峰面积归一法和外标法的优点的一种方法，它在加入内标物后，按峰面积归 一法的分析方法进行分析，这就避免了由于进样的一致性及样品基质效应导致的偶然误差。 因而，它的分析精密度也是比较高的，是一种比较理想的定量分析方法。进样量的变化、色 谱操作条件的微小变化对定量结果的影响不大，特别是在样品前处理（如浓缩、萃取、衍生 化等）前加入内标物，可部分补偿欲测组分在样品前处

5、理时的损失。若要获得很高的精密度 的结果时，可以加入树种内标物，以提高定量分析的精度。缺点是每次测定都需要用分析天 平准确称取内标物和样品的质量，故费时麻烦。同时必须要有合适的标样及内标物才能进行 内标法定量分析。6 .缺点选择合适的内标物比较困难，内标物的称量要准确，操作较麻烦。使用内标法定量时要测量 欲测组分和内标物的两个峰的峰面积（或峰高），根据误差叠加原理，内标法定量的误差中， 由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2,但是由于进样量的变化和色谱条件变 化引起的误差，内标法比标准曲线法要小很多，所以总的来说，内标法定量比标准曲线法定 量的准确度和精密度都要好。02外标法L定义与

6、内标法相比，外标法不是把标准物质加入到被测样品中，而是在与被测样品相同的色谱条 件下单独测定，把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。 外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度，分析时外标物的浓度应与被测物浓 度相接近，以利于定量分析的准确性。7 .种类外标法分为工作曲线法、外标一点法。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶 液确定工作曲线，求出斜率、截距。在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积 的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算。8 .适用范围外标法适用于常规分析，它用于衡量组分的分析也能得到满意的结

7、果。这个方法的精确度， 在很大程度上取决于操作条件的控制。样品分析的操作条件，必须严格控制于绘制校正曲线 时的条件。当峰高对操作条件的敏感性以及对拖尾峰、柱子超负荷和检测器有大的响应时， 给出非线性的校正曲线，此时峰面积计算常常可以得到更好的结果。不过，对重叠峰，难以 准确的测量峰面积，必须提高分离度才能达到预期的效果。9 .优点绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了，计算时可直接从标准工作曲线上读出含量，这 对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间，在此段时间内可 经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正，以确定该标准工作曲线是否还可使用。10 缺点每次样品分析的

8、色谱条件（检测器的响应性能，柱温度，流动相流速及组成，进样量，柱效 等）很难完全相同，因此容易出现较大误差。另外，标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组 分的标准样品（或已知准确含量的样品），因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进 行补偿。03如何选择内标法的优点是测定的结果较为准确，由于通过测量内标物及被测组分的峰面积的相对值来 进行计算的，因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操 作程序较为麻烦,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。外标法就是用标准品的峰面积或峰高与其对应的浓度做一条标准曲线，测出样品的峰面积 或峰高，在标准曲线上查

9、出其对应的浓度，这是最常用的一种定量方法，外标法简便，但进 样量要求十分准确，要严格控制在与标准物相同的操作条件下进行，否则造成分析误差，得 不到准确的测量结果。内标法是对应外表法说的，外标法需要用样品和标准品对比，但是有时我们很难保证样品和 标准品进的体积是一样的，毕竟要有误差，这时候就用内标法，就是在外标法的基础上，在 样品和标准品里在加入一种物质，通过加入物质的峰面积或峰高的变化，就可以看出我们标 准品和样品进样体积的差别,但同时会引进加入物质的秤量误差。所以一般用外标法来定量, 如果进样体积很难掌握，就用内标法，可以消除进样体积的误差。04小结内标与外标都是定量的一种方法而已，至于哪一种方法好与不好不能一概而论，做不同的分 析，面对着不同的要求，再加上分析成本分析效率等等问题，简单而有效进行定量分析来满 足要求才是最重要的。应用外标法能够满足要求，首选还是外标法了，毕竟简单而省事。对于精密度要求比较高、 结果准确度会产生重大影响、实验室条件不是很理想的等等条件下，用内标法还是必要的。 无论应用那种方法，方法的验证和确认都是很重要的，只要是按照程序经过验证和确认的方 法，都有其应用的空间的。