柱凝集法交叉配血试验操作规程2024.docx

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1、柱凝集法交叉配血试验操作规程20241.原理柱凝集法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过预先装填有抗IgG的凝胶柱。凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中，而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。2试剂柱凝集配血卡。3操作1.1 取凝胶抗球蛋白微柱卡，标记1号（主侧），2号（次侧）。1.2 主侧：配制细胞悬液，通常情况下使用供应商提供的稀释液将献血者红细胞配成1%的悬液（根据厂商的操作说明书而定）501轻轻滴人1号微管反应池中，再加251受血者血清。1.3 次侧：配制细胞悬液，通常情况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液（根据厂商的操作说明书而定）501轻

2、轻滴人2号微管反应池中，再加251献血者血清。1.4 阴性对照：配制细胞悬液，通常情况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液501轻轻滴入2号微管反应池中再加251AB型血清。1.5 将已加好反应物的凝胶卡放入37。C孵育15分钟。1.6 取出凝胶卡，立即用专用离心机离心，通常离心的速度被设定在1000rmin（80xg1OOxg离心10分钟后,观察结果。4 .结果判定4.1 若对照管细胞沉淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。结果判断参照图示（见图1-5-1）。图片4.2 若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。4.3 若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试

3、验。5 .注意事项5.1 每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时，向反应池内要先加红细胞悬液，后加血清或抗体。5.2 不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同，一般5011%红细胞悬浮加251血清;5010.8%红细胞悬浮加401血清。5.3 除上述两种配血方法之外，常用的还有快速的聚凝胺介质配血、1ISS介质配血以及增强反应的酶法配血等。这些方法具有一些局限性，通常用于特殊情况下的配血。柱凝集法能对微弱的抗原或抗体进行反应，大大提高了试验的敏感度，便于自动化、标准化，重复性好，结果稳定，结果观察直观。但孵育、离心时间较长，不适用于特别紧急的配血。考文献川尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程（第4版）M.北京：人民卫生出版社，2019.