医院常见感染临床标本收集方法与注意事项.docx

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1、医院常见感染临床标本收集方法与注意事项第一节总则一、临床微生物标本采集原则(1)采集时机：发现感染病例，应在抗菌药物使用前及时采集标本做病原学检查。已用抗菌药物者需至少停用抗菌药物2472小时后采样。最好在病程早期、急性期或症状典型时采样。(2)做好个人防护：必须戴手套、口罩，穿工作服，必要时戴面具和护目镜。(3)无菌采集：运送培养基现用现领，避免在病房内存放时间过长而被污染或失效。标本容器需经灭菌处理，宜采用压力蒸汽等物理灭菌方法，不得使用化学消毒剂灭菌。用外表面非无菌试管留取标本前后，需将试管口置于酒精灯火焰上消毒。采集无菌标本时应注意对局部及周围皮肤的消毒，对于与外界相通的腔道，不应从腔

2、道口取标本，应从底部取组织检查。如使用消毒液消毒皮肤，需作用一定时间，待其干燥后采样。严格执行无菌操作，避免标本污染。(4)根据目的菌的特性，用不同的方法采集：混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养基内送检，如痰液、尿液、伤口拭子。对于阳性率检出低的标本，床旁接种可提高病原菌检出率。如怀疑为厌氧菌感染，应给予标本无氧环境。(5)采集适量标本，正确填写检验单：采集量不应过少，而且要有代表性。同时有些标本还要注意在不同时间采集不同部位的标本。如伤寒患者，发病的第一周应采集血液,第二周应采集粪便和尿液，以提高阳性率和准确率。检验单需注明抗生素使用情况，采集时间、部位和可疑的诊断。(6)安全采集：标本采集

3、时注意预防锐器伤。做好自身防护，严格正规操作，避免病原菌传播。(7)护士在采集标本时遵照五项原则流程：遵照医嘱；充分准备；严格查对；正确采集；及时送检。二、临床微生物标本送检的注意事项所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2小时内。一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检。如果不能及时送检，按要求存放。(1)送检标本应注明来源、检验目的和采样时间，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。(2)以棉拭子采集的标本，宜插入运送培养基内送检，如咽拭子、伤口拭子等。(3)厌氧培养标本需保持厌氧状态运送：使用专用运送培养基或用针筒抽取标本后排尽空气，在针头

4、上置无菌橡皮塞后运送。(4)通常用于细菌学检验的标本存放不要超过24小时。(5)最佳的临床标本送检，包括厌氧菌培养标本，首先取决于所获取标本的量。量少的标本要在采集后的1530分钟内送检。活检组织如果采用厌氧运送方式，可置于25。C恒温箱存放2024小时。(6)送检期间要予以安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。严禁将带有裸露针头的注射器送往实验室。三、微生物实验室对标本的拒收标准(1)所用运送培养基不合适，如厌氧培养标本却按需氧培养标本送检。(2)运送标本的时间过长。(3)标本容器上未贴标签或贴错标签。(4)容器有裂缝或被打破。(5)标本明显被污染。(6)拭子上的标本干

5、掉。(7)标本不符合检验要求，如痰标本以唾液为主。(8)标本使用了固定剂及防腐剂。(9)标本量不够。(10)24小时内重复送检的标本(血培养除外)。第二节常见部位采样方法一、呼吸系统感染标本留取方法与结果判断1咽分泌物培养标本。正常人咽喉部培养应有口腔正常菌群，而无致病菌生长。在机体全身或局部抵抗力下降和其他外部因素作用下，可以出现感染而导致疾病。个别医务人员可能存在咽耐药菌定植，故对于个别重点科室，如母婴室等，需定期检测医务人员咽分泌物。对于白喉、化脓性扁桃体炎、急性咽喉炎等，咽分泌物培养出致病菌，对于其诊断和治疗有临床意义。（1）采集方法：协助患者清水漱口后，取无菌生理盐水棉签（必要时以压

6、舌板轻压舌根），嘱患者发“啊”音，以轻快的动作迅速擦拭两侧腭弓及咽、扁桃体分泌物后，速将试管口在酒精灯火焰上消毒，将拭子插入试管中塞紧，立即送检。（2）注意事项1）标本采集前勿用消毒液漱口。2）棉拭子避免触及舌、口腔黏膜和唾液。3）标本采集后立即送检，防止干燥。4）不可置肉汤培养基内送检。5）对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病者，用棉拭子在病灶部位擦拭数次即可。6）鼻咽拭子：查脑膜炎奈瑟球菌或百日咳杆菌，应自鼻咽部采集。7）避免在进食后2小时内留取标本，以防呕吐。（3）结果判断：咽部有大量的正常菌群存在，需注意辨别。常见的病原菌为：化脓性链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯

7、菌、流感嗜血杆菌等。2.痰培养标本（1）采集方法自然咳痰法：嘱患者先用洁口液、再用清水漱口，以除去口腔中的细菌，尽可能在应用抗菌药物之前采集标本（临检），深吸气后用力咳出12口痰于培养皿或瓶中，标本量应大于Im1（临检），痰量极少可用45。C10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。支气管采集法：建立人工气道，如气管切开或气管插管者，戴无菌手套或用无菌镶子取一次性无菌专用吸痰管，一头缓慢插入气管至隆突（叶支气管）水平，一头接电动吸引器，螺旋式抽吸，吸引痰液。小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳痰时可喷出肺部气管分泌物，将粘有分泌物的拭子送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方以诱发咳

8、痰。（2）注意事项1）标本及时送检，避免干燥，如在室温下放置2小时，则定植于口咽部的非致病菌过度生长，而肺炎球菌和流感嗜血杆菌检出率则明显下降。2）防止唾液及上呼吸道分泌物污染。3）在抗生素使用前采集价值高。4）连续采集34次，采集间隔时间24小时。5）对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。（3）结果判断1）正常人体的下呼吸道是无菌的，上呼吸道有正常菌群栖居。2）合格痰的涂片镜检鳞状上皮细胞V1O个低倍视野，白细胞25个/低倍视野，或两者比例V12.5。3）连续两次分离出相同的病原菌可认为是感染病原菌。4）经纤维支气管镜和人工气道吸引采

9、集分泌物分离出的细菌可认为是感染病原菌。5）痰液与血液或胸腔积液中分离到相同病原体，有诊断意义。6）痰培养常见病原菌为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、A群链球菌、肠球菌、卡他莫拉菌、脑膜炎奈瑟、白喉棒状杆菌、类白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、炭疽芽抱杆菌、流感嗜血杆菌、克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、百日咳杆菌、军团菌、支原体和衣原体等；常见的真菌主要有白假丝酵母菌、隐球菌、曲霉菌、毛曲霉；常见的病毒主要有腺病毒、流感病毒、副流感病毒等。7）痰中的病原菌不少属于机会致病菌，应根据病情判断。8）如查癌细胞，应用10%甲醛溶液或95%乙醇溶液固定痰液后立即送检。二、泌尿系统感染标

10、本留取方法与结果判断1 .采集方法（1）普通中段尿采集：女性采样前用肥皂水或0.现高镒酸钾溶液冲洗外阴部尿道口（男性需翻转包皮冲洗），用0.现苯扎溟钱或无痛碘消毒尿道口，最好留取清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水。为避免尿道周围皮肤及器官的正常菌群污染尿液，自然留取时尿液须呈直线状排出，或插导尿管留取中段尿，但可能损伤尿道，应注意动作轻柔，严格无菌操作。消毒时按照中、左、右、中的顺序进行。如果需要可收集第一段尿液数毫升做淋球菌和衣原体检查；不终止排尿，在排出数毫升尿液后用无菌试管收集第二段尿，即为所需中段尿。（2）留置导尿尿标本采集：培养前，有条件者可夹管1020分钟。采样时应松管弃去前段尿液

11、，左手戴无菌手套固定导尿管后，按中、左、右、中的顺序，严格消毒尿道口处的导尿管壁，待干后，用无菌注射器针头斜穿管壁抽吸尿液。不可打开导尿管和引流管连接处收集标本。2 .注意事项(1)采集的尿液标本放入无菌容器中立即送检，2小时内接种，标本不能立即送检者，暂存于4。C冰箱内；但不得超过24小时。(2)在用药前采集尿液，不加防腐剂。(3)严格无菌操作，避免污染。(4)不可从集尿袋下端管口留取标本。(5)会阴部分泌物过多时，应先清洁再采集。3 .结果判断(1)正常人体内膀胱中的尿液是无菌的。(2)中段尿以晨起第一次尿液为主，其革兰氏阴性杆菌浓度大于105m1,革兰氏阳性球菌大于104/m1可认为是感

12、染的病原菌；反之，污染菌可能性大。真菌浓度大于(103104)/m1可认为感染菌。(3)已用抗菌药或经导尿管采集的尿液，多次尿培养为单一的同种菌，细菌浓度虽未达到上述界限，也可认为是感染的病原菌。(4)尿培养显示浓度超过上述界限的但有3种或3种以上细菌和真菌时，应考虑污染菌的可能。(5)尿培养中常见病原菌为大肠埃希菌、肠球菌等，其他病原体有支原体、衣原体、真菌等。三、血液系统感染标本留取方法与结果判断1 .血培养标本采集法（1）采集方法1）培养瓶消毒程序：消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。2）皮肤消毒程序：用消毒液从穿刺点向外螺旋形消毒，使消毒区域直径达5cm以上，待干后采血。3）静脉穿刺和培养

13、瓶接种程序：用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头（如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头），直接注入血培养瓶，先注厌氧培养瓶，并注意避免注入空气，后注入其他培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固或严格按厂商推荐的方法采血。4）采血部位：通常为肘静脉，疑为细菌心内膜炎时以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采血。对于成人患者，每次发热时应该分别在两个部位采集血标本以帮助区分是病原菌还是污染菌。在不同部位取血,2次分离出同样菌种才能确定是病原菌。不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管易被固有菌群污染。5）采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前，以正在发冷发热前半个小时为宜或在停

14、用抗菌药物24小时后。6）采血量：成人菌血症或败血症的血液中含菌量较少,平均13m1血液中仅有1个细菌。所以采血量一定要足够。以培养基与血液之比10:1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血510d（含50m1培养基），婴幼儿和儿童每次每套培养瓶采血120m1（含20m1培养基，根据孩子的体重确定具体量）。（2）注意事项1）血液标本采集后应立即送检，不能及时送检者应置室温暂存，勿放于冰箱内。检验单需注明抗菌药物（特别是磺胺、青霉素）使用情况、采集时间和部位（如左臂等）、可疑的诊断。2）采血次数及间隔：24小时内最多采集4套标本（厌氧培养与

15、需氧培养），不同情况采血次数与间隔不同。急性发热：尽量在抗菌药物使用前，10分钟内，在不同的部位，采集2套标本（厌氧培养与需氧培养）。非急症感染病例：在抗菌药物使用前或血药浓度最低时（用药之前或停药3天后）,在不同的部位采集24套标本（厌氧培养与需氧培养）。所有标本在24小时内采集，间隔时间不超过3小时。急性心内膜炎：尽可能在抗菌药物使用前，12小时内，在3个不同的部位采集3套标本（厌氧培养与需氧培养）。不明原因发热：在不同的部位采集24套标本（厌氧培养与需氧培养），如果在2448小时内结果阴性，再采集23套甚至更多套的标本。儿童：及时采集；几乎不需要连续采样。(3)结果判断1)健康人体的血液是无菌的。2)通常血培养分离的细菌或真菌可认为是血液感染的病原体。3)大多数的菌血症是间歇性的，往往需要以多次血培养阳性证实。如为表皮葡萄球菌、类白喉棒状杆菌等皮肤常居菌，则连续两次培养为同种细菌方可确定。4)血液中常见细菌为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群链球菌、B群链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等。2 .静脉留置导管标本采集(1)采集方法：用消毒液清洁导管周围皮肤，待干燥后拔出静脉留置导管，用无菌技术剪导管。将体内段5cm立即置于血平皿上滚动涂抹1遍或将导管置于空的无菌试管内立即送检。(2